【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过适体-介导的多腺苷酸化信号可及性来调控基因表达专利
本专利技术提供用于通过基于适体调节一种或多种多腺苷酸化信号的可及性来调控基因表达的多核苷酸构建体，和使用所述多核苷酸构建体响应于结合适体的配体的存在或不存在来调控基因表达的方法。所述多核苷酸构建体含有核糖开关，所述核糖开关包含适体和效应物茎环，其中效应物茎环包含多腺苷酸化信号序列。专利技术背景真核细胞中的信使RNA(mRNA)通过广泛的转录后加工从前-mRNA转录物产生，包括5′末端帽化、通过剪接除去内含子以及3′末端裂解和多腺苷酸化。几乎所有的真核mRNA的3′末端包含多聚(A)尾—20-250个腺苷残基的均聚物。在细胞核中通过裂解和多腺苷酸化(通过大的蛋白复合物催化的过程)，多聚(A)尾被添加到前-mRNA。多聚(A)尾的添加依赖于多种元件的存在，包括多腺苷酸化位点上游存在的高度保守的AATAAA(或其变体ATTAAA)多腺苷酸化信号序列和其它上游元件(“USE”)，以及富含T或GT的下游元件(“DSE”)。多聚(A)尾添加到mRNA保护信息免于降解，以及其它功...
【技术保护点】
1.用于调控靶基因的表达的多核苷酸盒，其包含核糖开关，其中所述核糖开关包含效应物茎环和适体，其中所述效应物茎包含多腺苷酸化信号，和其中所述适体和效应物茎环通过可替代共有茎臂连接，所述可替代共有茎臂包含与适体茎的非共有臂和效应物茎环的非共有臂互补的序列。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170221 US 62/4616891.用于调控靶基因的表达的多核苷酸盒，其包含核糖开关，其中所述核糖开关包含效应物茎环和适体，其中所述效应物茎包含多腺苷酸化信号，和其中所述适体和效应物茎环通过可替代共有茎臂连接，所述可替代共有茎臂包含与适体茎的非共有臂和效应物茎环的非共有臂互补的序列。
2.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述适体结合小分子配体。
3.权利要求1的多核苷酸盒，其中与适体茎中的序列和效应物茎环中的序列互补的可替代共有茎臂的部分是4-8个核苷酸、5-7个核苷酸、5个核苷酸或6个核苷酸。
4.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述适体茎是6-12个碱基对、7-10个碱基对、8个碱基对或9个碱基对。
5.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环的茎是4-24个碱基对、5-20个碱基对、9-14个碱基对、9个碱基对、10个碱基对、11个碱基对或12个碱基对。
6.权利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环位于适体的3′，使得可替代共有茎臂包含3′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的5′臂的全部或一部分。
7.权利要求6的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信号是AATAAA或ATTAAA。
8.权利要求1-5的多核苷酸盒，其中所述效应物茎环位于适体的5′，使得可替代共有茎臂包含5′适体茎臂的全部或一部分和效应物茎的3′臂的全部或一部分。
9.权利要求8的多核苷酸盒，其中所述多腺苷酸化信号是下游元件(DSE)。
10.权利要求1-5的包含两个核糖开关的多核苷酸盒，其中第一个核糖开关的效应物茎环包含多腺苷酸化信号AATAAA或ATTAAA的全部或一部分，和第二个核糖开关的效应物茎环包含下游元件(DSE)的全部或一部分。
11.权利要求10的多核苷酸盒，其中所述两个核糖开关各自包含结合相同配体的适体。
12.权利要求10的多核苷酸盒，其中所述两个核糖开关包含结合不同配体的不同适体。
13.一种调节靶基因的表达的方法，其包括：
a.将一个或多个权利要求1-5的多核苷酸盒插入靶基因的3′非翻译区中，
b.将包含多核苷酸盒的靶基因引入细胞中，和
c.将...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭雪翠，J韩，仲昭敬，
申请(专利权)人：梅里特斯英国第二有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB
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