心脏肥大中的微小RNA hsa-miR-665制造技术

本发明专利技术涉及人微小RNA hsa‑miR‑665，其用于治疗或预防与心脏肥大和随后的心脏病理性重塑相关联的心脏疾病，特别是用于预防和/或治疗心力衰竭(HF)。包含用于所公开用途的所述微小RNA的载体和药物组合物也在本发明专利技术的范围内。

Hsa-mir-665 microRNA in cardiac hypertrophy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】心脏肥大中的微小RNAhsa-miR-665
本专利技术涉及药物和生物
特别地，本专利技术涉及人微小RNA(microRNA)hsa-miR-665，其用于治疗与心脏肥大和随后的心脏病理性重塑相关联的心脏疾病，其特别是用于预防和/或治疗心力衰竭(HF)。
技术介绍
尽管最近在心血管外科和治疗方面取得了进展，但心血管疾病(CVD)每年造成超过1700万人死亡，相当于全世界所有死亡人数的31％(http://www.who.int/cardiovascular_diseases/en/)。CVD的负担不再局限于高收入人群，因为其中80％的死亡发生在中低收入国家。在CVD谱中，心力衰竭(HF)代表由不同的潜在病理原因决定的最终病症。美国心脏协会/美国心脏病学会指南将HF定义为“一种可能由损害心室填充或排出血液的能力的任何结构或功能性心脏紊乱引起的复杂的临床综合症”[1][2]。该综合征影响全世界超过2600万人，其中74％患有至少1例合并症，其因HF而严重恶化[3]。成人心脏是一种能够响应不同的外在和内在刺激而进行显著的重塑的动态器官。大多数病理刺激首先诱导心脏肥大阶段，这是由个体心肌细胞大小的代偿性增加所致。后来，这通常演变成一种失代偿性肥大的形式，最终决定LV解剖结构的重塑并沉淀成明显的HF(参见参考文献[4]-[5])。补偿性肥大可以通过慢性或突发性缺血性损伤(缺血性心肌病或心肌梗塞)、慢性高血压或心脏瓣膜病(参见[5])引起的心肌细胞损失来确定。由于遗传性心肌病的不同基因突变导致肥大表型，也观察到相同的反应(参见[5])。心肌细胞肥大也通常与左心室(LV)射血分数(EF)保留型HF(HFpEF)的进展相关联，该HFpEF现在占HF病例的大约50％。就这一病症而言，流行病学观察表明，相对于EF降低型HF(HFrEF，其通常由于缺血性心脏病而观察到)，HFpEF的患病率每十年增长10％，从而达到流行病的比例[6,7]。HFpEF相关联合并症(特别是高血压和肥胖)的增加率、人群平均寿命的增加以及冠状动脉疾病(CAD)患者的更好管理可以维持这一趋势。HFpEF患者的死亡率在第5年接近60％，住院率高并且生活质量严重受损。目前用于由CAD引起的HFrEF的治疗(特别是血管紧张素醛固酮系统抑制剂、β阻滞剂、LCZ696、起搏器/装置疗法)对于HFpEF患者反而多半无效[8]。利用斯达汀的治疗在185例HFpEF患者的小型临床试验中显示出相对的益处[9]；然而，这种药物的工作机制仍然缺失，并且这一结果尚未在大量患者中复制。HFpEF的生理学和分子相关性是复杂的并且理解非常片面。该疾病逐渐从无症状演变为有症状，并且具有以下不同的特征：LV肥大、LV舒张缓慢、LV舒张硬度、LV收缩性能降低、左心房重塑、外周血管阻力、内皮功能受损、肺动脉和静脉阻力增加、神经激素激活和心室-动脉耦合[10]。虽然HFpEF的潜在病因尚不清楚，但有充分的共识认为，这种情况的两个最显著的表型相关性是心肌细胞硬度[11]增大和心肌细胞收缩性受损[12]。通过胶原蛋白积聚和交联[13]、心肌细胞损失和反应性肥大[14]，老化延长松弛并增加LV硬度。因此，仍然需要一种用于治疗心脏肥大及其后果，特别是心力衰竭，更特别是用于治疗目前无法治愈的左心室(LV)射血分数(EF)保留形式心力衰竭(HFpEF)的治疗工具。此外，期望干预心脏肥大病症以预防相关联疾病的进展。微小RNA是在进化上保守的非编码小RNA，其通过与存在于靶信使mRNA中(更通常存在于其3'-UTR，但也存在于5'UTR和编码序列中)的互补序列的不完全碱基配对调节转录后水平的基因表达。配对导致翻译抑制、mRNA降解或两者[15]。微小RNA与mRNA结合所必需的微小RNA种子序列是一种最常见于自微小RNA5'-末端始的2-8位的保守序列[16]。微小RNA是基因组编码的序列，其一般由RNA聚合酶II转录成初级微小RNA(初微RNA)。该初微RNA然后由不同的细胞核酸内切酶按顺序处理，以最终生成含有两条约19-23个核苷酸的链的双链体。然后解开微小RNA双链体，以及将成熟的微小RNA整合到RNA诱导的沉默复合物(RISC)中，该RISC通过微小RNA介导沉默(参见参考文献[17])。已经广泛研究了不同的微小RNA在心脏发育、肥大和心力衰竭中的作用(参见文献[18]；[19])。特别是，显示微小RNA参与适当的心脏发育。在发育中的心脏和成人心脏两者中，通过Dicer的敲除消融完整的微小RNA网络导致严重的心力衰竭和死亡[20]。此外，许多关于功能获得和丧失的研究突出了参与病理性心脏重塑的微小RNA家族或单个微小RNA，从而提高了将这些微小RNA用作新疗法的生物标记物或靶的可能性(参见参考文献：[21]和[22])。已经描述了几种微小RNA来调节心脏生物学中的特定过程，包括心肌细胞增殖(miR-1[23]、miR-133a[24]、miR-199a-3p[25])、心肌细胞肥大(miR-208a[26]、微小RNA-212/132家族[27]、miR-378[28])，心肌纤维化(miR-29[29]、miR-21[30]、miR-378[28])、心肌细胞收缩性(miR-208a[26])。鉴于微小RNA在几乎任何人类疾病中的作用，其中许多已被视为用于创新疗法的靶，而少数也被视为治疗剂本身。然而，到目前为止，这些潜在应用中只有少数已达到临床实验，并且这些应用都没有用于治疗心脏疾病。因此，非常需要参与心力衰竭并且可以用于治疗心力衰竭和相关疾病(特别是目前无法治愈的HFpEF形式)的微小RNA。现已发现微小RNAhsa-miR-665在调节心肌细胞功能方面的先前未知作用。实际上，已经发现所述微小RNA有效地减小了促肥大条件下大鼠和小鼠新生心肌细胞的大小。以前发表的证据已经报告，这种微小RNA在心力衰竭患者的血液中有增加[31]。另一份报告则显示，相反，这些心力衰竭患者具有相同微小RNA的甚至更低的心内水平[32]。然而，在现有技术中尚未显示或甚至暗示该微小RNA在心力衰竭的进展，或退一步讲，在心力衰竭的治疗中的致病或有效作用。现在已经发现，hsa-miR-665一旦经外源地施用(administer)于培养的心肌细胞和体内心脏，就具有先前未知的药理学作用。特别是，已经发现，在肥大病症中，所述微小RNA阻断并减少心脏肥大和病理性心脏重塑，同时增加心脏功能。此外，已发现该微小RNA特异性地下调参与生物力学应激反应调节的基因的表达，进一步支持其在肥大病症中的治疗用途。在充分评估和接受的动物模型中获得的这些结果允许开发用于治疗人类受试者的心脏疾病的包含hsa-miR-665的药物。hsa-miR-665可用作抵抗病理性肥大和预防和/或治疗心力衰竭的治疗选择。此外，所述微小RNA可用于预防和/或治疗以病理性心脏肥大(特别是涉及增加的心肌细胞硬度，例如缺血后病理性肥大、H本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.微小RNA hsa-miR-665或这种微小RNA的初级转录物或这种微小RNA的前体或这种微小RNA的模拟物或编码这种微小RNA的DNA，其用于预防或治疗以心脏肥大为特征的心脏病变的用途。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170314 EP 17160768.21.微小RNAhsa-miR-665或这种微小RNA的初级转录物或这种微小RNA的前体或这种微小RNA的模拟物或编码这种微小RNA的DNA，其用于预防或治疗以心脏肥大为特征的心脏病变的用途。


2.根据权利要求1所述的用于所述用途的微小RNA，其中所述病变选自心力衰竭；心肌病；病理性心脏肥大，特别是缺血后病理性肥大；遗传和非遗传起源的心肌病，特别是肥大表型；心肌梗塞；缺血性或非缺血性来源的心肌病；心肌缺血；以及以舒张功能障碍增加为特征的病因不明的心肌病。


3.根据权利要求1所述的用于所述用途的微小RNA，其中所述病变是射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)。


4.根据权利要求1所述的用于所述用途的微小RNA，其中所述微小RNA用于处于发生心脏肥大风险的病症中。


5.根据权利要求4所述的用于所述用途的微小RNA，其中所述处于发生心脏肥大风险的病症选自慢性高血压、心脏瓣膜病、导致肥大表型的遗传性心肌病、心肌梗塞、慢性或突发性缺血性损伤引起的心肌细胞损失以及缺血性或非缺血性来源的心肌病。


6.根据权利要求1所述的微小RNA，其用于基因疗法。


7.用于...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫罗·贾卡，卢卡·布拉加，马泰奥·达尔费罗，米格尔·路易斯·库尼亚马诺，安娜·索非亚·布雷吉艾若埃乌拉里奥，
申请(专利权)人：遗传工程及生物技术国际中心，
类型：发明
国别省市：意大利;IT