一种去氢表雄酮的分析方法技术

技术编号:22882338 阅读:43 留言:0更新日期:2019-12-21 06:43
本发明专利技术公开了一种去氢表雄酮(3β‑羟基雄甾‑5‑烯‑17‑酮)的分析方法,通过HPLC法进行分析,具体采用苯基柱,以乙醇、乙腈和水为流动相,实现去氢表雄酮的精准检测。本发明专利技术的分析方法操作简便,提高了分离效率及检测的准确度。

An analytical method of dehydroepiandrosterone

【技术实现步骤摘要】
一种去氢表雄酮的分析方法
本专利技术涉及甾体药物分析
,具体涉及一种去氢表雄酮的分析方法。
技术介绍
去氢表雄酮,英文名称:Dehydroepiandrosterone,化学名:3β-羟基-5-雄烯-17-酮,分子式为C19H28O2。去氢表雄酮是用于制造甾体药物的重要中间体和原料,同时具有延缓衰老,保持青春活力;增强体能,改善情绪和睡眠,提高记忆力,调节免疫系统功能,提高肌体免疫力等功效。在实现本专利技术的过程中,专利技术人发现现有技术中至少存在如下问题:近年来,越来越多的厂家利用植物甾醇发酵产物雄烯二酮(4-AD)为原料经过酯化、缩酮、还原、水解来合成去氢表雄酮,其合成路线如下:由于该工艺第三步还原反应采用硼氢化钠进行还原,还原过程产生异构体杂质,经过水解后变成α-异构体。现有去氢表雄酮(DHEA)的液相常规检测方法为:色谱柱:15cm×4.6mm,5µm,苯基色谱柱;流动相:45%乙腈(V/V);流速:1.0mL/min。检测波长:210nm。由于DHEA与α-异构体的极性相似,常规检测方法分离DHEA及α-异构体的效果较差,无法获取准确数据。
技术实现思路
为了解决现有分析技术分离效果差的问题,本专利技术提供一种全新的去氢表雄酮分析方法。为实现上述目的,一种去氢表雄酮的分析方法,采用HPLC法进行分析,其特征在于:色谱条件设置为:色谱柱:采用苯基柱;柱温:30-35℃;流动相:以乙醇、乙腈和水为流动相,各组分的体积比为:乙醇:乙腈:水=(15~20):(15~20):(60~70);流速为:1.0~1.2ml/min;检测波长:200-210nm;具体分析方法为:取检测样品适量,精密称定,用流动相溶解并稀释成浓度为2.0~2.5mg/ml的溶液,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图。作为优选,所述苯基柱采用的型号为SuplexPKB-100,250*4.6mm,5µm。作为优选,所述记录色谱图至主峰保留时间的1.2-1.5倍。有益效果:本专利技术提供去氢表雄酮的分析方法,易于操作,该方法优点如下:1)设备要求不高,使用普通的液相色谱仪即可。选用苯基柱采用的型号为SuplexPKB-100,250*4.6mm,5µm,柱子分离效率较高。2)流动相选用的乙醇、乙腈和水,普通易得,可行性高。3)操作过程简单方便,杂质分离效果较好,灵敏度高,易于控制,检测成本低,并具有良好的精密度、稳定性和重复性,α-异构体与DHEA的分离度≥1.5。附图说明图1是现有常规分析方法检测图谱。图2是本专利技术的分析方法检测图谱。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述,但该实施例不应理解为对本专利技术的限制。实施例一:色谱条件:色谱柱:苯基柱,SuplexPKB-100,250*4.6mm,5µm;流动相:乙醇:乙腈:水=15:15:70(V/V/V)进样量:20μl检测波长:210nm流速:1.0ml/min操作:柱温:30℃;取检测样品适量,精密称定,用乙腈溶解并稀释成2.0mg/ml溶液,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图至主峰保留时间的1.2倍。实施例二:色谱条件:色谱柱:苯基柱,SuplexPKB-100250*4.6mm,5µm;流动相:乙醇:乙腈:水=20:20:60(V/V/V)进样量:20μl检测波长:200nm流速:1.2ml/min操作:柱温:35℃;取检测样品适量,精密称定,用乙腈溶解并稀释成2.5mg/ml溶液,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图至主峰保留时间的1.5倍。本说明书中未作详细说明之处,为本领域公知的技术。应当理解的是,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,而所有这些改进和变换都应属于本专利技术所附权利要求的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种去氢表雄酮的分析方法,采用HPLC法进行分析,其特征在于:/n色谱条件设置为:/n色谱柱:采用苯基柱;/n柱温:30-35℃;/n流动相:以乙醇、乙腈和水为流动相,各组分的体积比为:乙醇:乙腈:水= (15~20) :(15~20) :(60~70);/n流速为:1.0~1.2 ml/min;/n检测波长:200-210nm;/n具体分析方法为:/n取检测样品适量,精密称定,用流动相溶解并稀释成浓度为2.0~2.5mg/ml的溶液,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图。/n

【技术特征摘要】
1.一种去氢表雄酮的分析方法,采用HPLC法进行分析,其特征在于:
色谱条件设置为:
色谱柱:采用苯基柱;
柱温:30-35℃;
流动相:以乙醇、乙腈和水为流动相,各组分的体积比为:乙醇:乙腈:水=(15~20):(15~20):(60~70);
流速为:1.0~1.2ml/min;
检测波长:200-210nm;
具体分析方法为:
取检测样品适量,精密称定,...

【专利技术属性】
技术研发人员:侯海波杨艳青郑建雄张阳洋汪洋赵静刘林李廿罗宇肖康狄飞飞蔡啸
申请(专利权)人:湖北竹溪人福药业有限责任公司
类型:发明
国别省市:湖北;42

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