一种米格列奈钙R-异构体的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种米格列奈钙R‑异构体的检测方法，采用高效液相色谱法，所述方法包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：取米格列奈钙原料药供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；2)米格列奈钙对照品溶液的制备：取米格列奈钙对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；3)米格列奈钙R‑异构体对照品溶液的制备：取米格列奈钙R‑异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；4)测定法：取步骤1)，步骤2)和步骤3)的溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中的峰面积按照归一法计算米格列奈钙原料药中米格列奈钙R‑异构体的含量。

A method for the determination of R-isomer of migrainet calcium

【技术实现步骤摘要】
一种米格列奈钙R-异构体的检测方法
本专利技术涉及一种米格列奈钙R-异构体的鉴定方法。
技术介绍
米格列奈钙二水合物，化学名称为：双〔(2s)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸〕单钙二水合物，结构式如下：米格列奈钙是日本橘生公司研制的降糖药，是一种新型苄基琥珀酸类胰岛素分泌促进剂。米格列奈通过关闭胰腺β细胞膜上的ATP依赖性K+通道，造成Ca2+内流，使细胞内Ca2+浓度增加而使细胞外含胰岛素的囊泡脱粒，从而刺激胰岛素的分泌。米格列奈钙片用于食疗和运动疗法不能取得满意效果的2型糖尿病患者控制餐后血糖。米格列奈钙与其手性异构体差别只存在于结构中的S-苄基琥珀酸片段位置，是S-苄基琥珀酸内含有R-苄基琥珀酸，称为：米格列奈钙R-异构体，其结构式如下：米格列奈钙R-异构体作为米格列奈钙原料药中的杂质成分，必须被控制在一定的限度以内，因此需要对米格列奈钙原料药中米格列奈钙R-异构体进行含量检测和分析，现有标准公开了以下检测方法：标准一，《国家药品标准》YBH00192012标准二，《国家药品标准》YBH04122012其中，R-异构体的检验方法可以将米格列奈钙峰与R-异构体峰分开，但分离度无法达到法定要求。见附图6，其色谱条件如下：色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：采用手性色谱柱(SumichiralOA-3300250×4.6mm5μm)；流动相：以0.03mol/L醋酸铵的甲醇溶液-乙腈(80:20)；检测波长：210nm；流速：0.8ml/min柱温：30℃供试品溶液的制备：取供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。对照溶液的制备：精密量取供试品1ml置100ml的容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀即得。系统适应性的制备：取米格列奈钙R-异构体对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。测定法取系统适应性溶液20μl注入液相色谱仪，各组分出峰顺序应依次为米格列奈钙和R异构体，其分离度应符合规定，再取供试品溶液和对照溶液20μl注入色谱仪，理论板数按米格列奈峰计算，应不低于2000。
技术实现思路
本专利技术在现有技术的基础上，对色谱条件和供试品溶液的配制进行了改进，检测效果优于现有技术。本专利技术提供一种米格列奈钙原料药中米格列奈钙R-异构体的含量测定方法，采用高效液相色谱法，所述方法包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：取米格列奈钙原料药供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。2)米格列奈钙对照品溶液的制备：取米格列奈钙对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。3)米格列奈钙R-异构体对照品溶液的制备：取米格列奈钙R-异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。4)测定法：取步骤1)，步骤2)和步骤3)的溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中的峰面积按照归一法计算米格列奈钙原料药中米格列奈钙R-异构体的含量。其中，色谱图中各组分出峰顺序依次为米格列奈钙和米格列奈钙R异构体，理论板数按米格列奈峰计算，应不低于2000。其中高效液相色谱仪的色谱条件如下：色谱柱：采用手性色谱柱UltimateAmy-DR(250×4.6mm5μm)；流动相：以乙腈-三氟乙酸(100：0.05-0.2)；检测波长：210nm。流速：0.3-0.8ml/min其中，米格列奈钙原料药是根据现有技术的方法制备的，方法如下：亚苄基琥珀酸合成→苄基琥珀酸合成→(S)-苄基琥珀酸-(R)-a-苯乙胺盐合成→(S)-苄基琥珀酸合成→顺式六氢异吲哚合成→二氢异吲哚丁酸合成→米格列奈苄基酯合成→2S－二氢异吲哚丁酸合成→米格列奈钙。本专利技术方法的建立是经过筛选获得的，筛选过程如下：1、波长筛选：取本品米格列奈钙对照品溶液与R-异构体对照品混合溶液在200-400nm紫外分光光度仪扫描，确定在210nm有最大吸收，且无干扰。2、流动相的筛选：样品的处理方法：取米格列奈钙、R-异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的混合溶液，摇匀即得。用以下不同的流动相进样，以乙腈：三氟乙酸比例为100:0.1的最佳。稀释剂比例分离度理论板数按乙腈：三氟乙酸100:0.051.502134乙腈：三氟乙酸100:0.12.632530乙腈：三氟乙酸100:0.22.012076甲醇：三氟乙酸100:0.051.251965甲醇：三氟乙酸100:0.11.101852甲醇：三氟乙酸100:0.20.9318693、系统适用性色谱柱的筛选:选用不同的色谱柱进行实验，以手性色谱柱UltimateAmy-DR分离度最佳。色谱柱键合相分离度手性色谱柱UltimateAmy-SR2.37手性色谱柱UltimateAmy-DR2.65手性色谱柱SumichiralOA-33000.70手性色谱柱SumichiralOA-31001.034、专属性供试品溶液的制备：取供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。阴性样溶液的制备：取空白溶剂，滤过，即得。对照品溶液的制备：取R-异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得。分别各取以上3种溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果：供试品溶液中米格列奈钙与对照品溶液中R-异构体达到基线分离。阴性样溶液无干扰，本品专属性良好。见附图1-5。5、耐用性5.1流动相：以乙腈-三氟乙酸(100：0.1)；5.2流速为0.3ml/min、0.5ml/min、0.8ml/min的理论塔板数都不低于2000，但其分离度是流速为0.5ml/min的最佳。流速理论塔板数分离度0.3ml/min21702.450.5ml/min24802.630.8ml/min2010...

【技术保护点】
1.一种米格列奈钙R-异构体的检测方法，采用高效液相色谱法，所述方法包括以下步骤：/n1)供试品溶液的制备：取米格列奈钙原料药供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；/n2)米格列奈钙对照品溶液的制备：取米格列奈钙对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；/n3)米格列奈钙R-异构体对照品溶液的制备：取米格列奈钙R-异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；/n4)测定法：取步骤1)，步骤2)和步骤3)的溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中的峰面积按照归一法计算米格列奈钙原料药中米格列奈钙R-异构体的含量；/n其中，色谱图中各组分出峰顺序依次为米格列奈钙和米格列奈钙R异构体，理论板数按米格列奈峰计算，不低于2000；/n其中高效液相色谱仪的色谱条件如下：/n色谱柱：采用手性色谱柱Ultimate Amy-DR(250×4.6mm 5μm)；/n流动相：以乙腈-三氟乙酸(100：0.05-0.2)；/n检测波长：210nm；/n流速：0.3-0.8ml/min。/n

【技术特征摘要】
1.一种米格列奈钙R-异构体的检测方法，采用高效液相色谱法，所述方法包括以下步骤：
1)供试品溶液的制备：取米格列奈钙原料药供试品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；
2)米格列奈钙对照品溶液的制备：取米格列奈钙对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；
3)米格列奈钙R-异构体对照品溶液的制备：取米格列奈钙R-异构体对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀即得；
4)测定法：取步骤1)，步骤2)和步骤3)的溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中的峰面积按照归一法计算米格列奈钙原料药...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈小敏，张克勤，赵有红，彭常春，易耀江，
申请(专利权)人：江西济民可信金水宝制药有限公司，江西济民可信药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36