本发明专利技术提供了一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，所述方法包括以下步骤：将定量的泡吴茱萸粉末于定量的乙醇水溶液中静置浸泡后超声处理，冷却后，固液分离收集滤液；使用高效液相色谱法检测，色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比53:47的乙腈‑水溶液，等度洗脱，最后使用外标法定量。本发明专利技术提供了一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，本发明专利技术的方法使得吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的色谱峰分离度较高，检测方法简便、准确、重复性良好，适用于泡吴茱萸的质量控制。
A method for the determination of evodiamine, rutaecarpine and limonoids in Evodia
【技术实现步骤摘要】
一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法
本专利技术属于中药质量控制领域，具体涉及一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法。
技术介绍
吴茱萸始载于《神农本草经》，列为中品，为临床常用中药，其有效成分主要为柠檬苦素、吴茱萸次碱以及吴茱萸碱等生物碱成分。热水(开水)泡制亦为吴茱萸的传统炮制方法之一。沸水泡制能够有效降低吴茱萸的毒性，因此，采用沸水泡制方法制备而成的饮片品种“泡吴茱萸”仍在临床使用，现行的检测方法当中没有泡吴茱萸的含量测定方法，现有的吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱总量及柠檬苦素的含量测定方法为2015版《中国药典》规定的检测方法，该方法分离度较低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)将定量的泡吴茱萸粉末置于定量的乙醇水溶液中静置浸泡后超声处理，冷却后，固液分离收集滤液，即得供试品溶液；(2)配制吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素对照品溶液；(3)对步骤(1)得到的供试品溶液和步骤(2)的对照品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件包括：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比53:47的乙腈-水溶液，等度洗脱，检测波长为215nm；理论板数按柠檬苦素峰计算不低于4000、按吴茱萸碱峰计算不低于5000、按吴茱萸次碱峰计算不低于4000；(4)使用外标法计算泡吴茱萸中的吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量。本专利技术的泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，通过改进流动相的比例和洗脱方法使得吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的色谱峰分离度较高，检测方法简便、准确、重复性良好，适用于泡吴茱萸的质量控制。优选地，静置浸泡时间为30～60min。优选地，所述步骤(1)中，静置浸泡时间为45min。优选地，所述步骤(1)中，超声处理的功率为300W，超声处理的频率为32kHz，超声处理的时间为25～50min。优选地，所述步骤(1)中，超声处理的功率为300W，超声处理的频率为32kHz，超声处理的时间为30min。优选地，所述步骤(1)中，乙醇水溶液的乙醇的体积分数为70％，泡吴茱萸粉末和乙醇水溶液的比例为10～15g/L。优选地，所述步骤(3)中，流动相的流速为1ml/min，色谱柱的柱温为25℃，液相色谱检测进样量10μL。优选地，所述步骤(1)中，将0.3g的泡吴茱萸粉末置于具塞锥形瓶中，加入25ml70％乙醇，称定重量，静置浸泡，超声处理，冷却后，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤后收集滤液。优选地，所述步骤(2)中，对照品溶液中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的重量比为8:5:10。本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供了一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，本专利技术的方法使得吴茱萸碱、吴茱萸次碱总量及柠檬苦素的色谱峰分离度较高，检测方法简便、准确、重复性良好，适用于泡吴茱萸的质量控制。附图说明图1为本专利技术实施例的方法应用于检测的对照品的色谱图。图2为本专利技术实施例的方法应用于检测泡吴茱萸样品的色谱图。其中，1、柠檬苦素，2、吴茱萸碱，3、吴茱萸次碱。具体实施方式为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1作为本专利技术实施例的一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)将0.3g的泡吴茱萸粉末置于具塞锥形瓶中，加入25ml70％乙醇，称定重量，静置浸泡45min，超声处理30min，超声处理的功率为300W，超声处理的频率为32kHz，冷却后，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤后收集滤液；(2)配制吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的对照品溶液，对照品溶液中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的浓度分别为：8μg/ml、5μg/ml、10μg/ml；(3)对步骤(1)得到的滤液和步骤(2)的对照品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件包括：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比53:47的乙腈-水溶液，等度洗脱，检测波长为215nm，流动相的流速为1ml/min，色谱柱的柱温为25℃，液相色谱检测进样量10μL；理论板数按柠檬苦素峰计算不低于4000、按吴茱萸碱峰计算不低于5000、按吴茱萸次碱峰计算不低于4000，；(4)使用外标法计算泡吴茱萸中的吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量。实验例1对本专利技术实施例1的检测方法进行实验验证。1、仪器：JA3003电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)，Secura225D-1CN电子天平(德国赛多利斯集团)，GZX-9070MBE电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)，DMF-4B手提式高速中药粉碎机(温岭市铭大药材机械设备有限公司)，UltiMate3000高效液相色谱仪(美国戴安公司)，KQ-300DA数控超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)。2、药品吴茱萸碱对照品(中国药品生物制品检定研究院，批号：110802-201710，含量以99.6％计)，吴茱萸次碱对照品(中国药品生物制品检定研究院，批号：110801-201608，含量以99.7％计)，柠檬苦素对照品(中国药品生物制品检定研究院，批号：110800-201707，含量以97.9％计)。泡吴茱萸为自制，共有10批。所用吴茱萸药材由广州市药材公司中药饮片厂提供，经广州中医药大学高明副教授鉴定为芸香科植物吴茱萸Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.、石虎Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果实。本实验所用样品的信息见表1。表1泡吴茱萸样品信息炮制方法：Ⅰ法：取吴茱萸，洗净，置沸水中略泡，捞出，晒干即得。(《广东省中药炮制规范(1984版)》方法)Ⅱ法：取吴茱萸，用开水泡约1h至顶端开口，再置锅内炒热，洒入盐水至发香气，焙干。每100kg吴茱萸，用食盐3kg。(《江西省中药饮片炮制规范(2008年版)》方法)3、方法的线性关系配制吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的对照品溶液，吴茱萸碱的浓度为8.12μg/ml，吴茱萸次碱的浓度5.33μg/ml，柠檬苦素的浓度10.12μg/ml。将上述对照品溶液分别进样2、5、10、15、25μl进行测定。以吴茱萸碱、吴本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)将定量的泡吴茱萸粉末于定量的乙醇水溶液中静置浸泡后超声处理，冷却后，固液分离收集滤液；/n(2)配制吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的对照品溶液；/n(3)对步骤(1)得到的滤液和步骤(2)的对照品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件包括：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比53:47的乙腈-水溶液，等度洗脱，检测波长为215nm；理论板数按柠檬苦素峰计算不低于4000、按吴茱萸碱峰计算不低于5000、按吴茱萸次碱峰计算不低于4000；/n(4)使用外标法计算泡吴茱萸中的吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量。/n
【技术特征摘要】
1.一种泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)将定量的泡吴茱萸粉末于定量的乙醇水溶液中静置浸泡后超声处理，冷却后，固液分离收集滤液；
(2)配制吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的对照品溶液；
(3)对步骤(1)得到的滤液和步骤(2)的对照品溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件包括：色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比53:47的乙腈-水溶液，等度洗脱，检测波长为215nm；理论板数按柠檬苦素峰计算不低于4000、按吴茱萸碱峰计算不低于5000、按吴茱萸次碱峰计算不低于4000；
(4)使用外标法计算泡吴茱萸中的吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，静置浸泡时间为30～60min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，超声处理的功率为300W，超声处理的频率为20～40kHz，超...
【专利技术属性】
技术研发人员：马恩耀，严冬慧，刘国伟，黄玉梅，罗文英，孔箭，
申请(专利权)人：梅州广药采芝林药业有限公司，甘肃广药白云山中药科技有限公司，广州采芝林药业有限公司，广州市药材公司中药饮片厂，
类型：发明
国别省市：广东;44
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