一种叶黄素冻干脂质体制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种叶黄素冻干脂质体制剂及其制备方法，制剂由以下重量百分比成分组成：叶黄素：0.5～15％；磷脂：20～50％；胆固醇：1～10％；表面活性剂：0.5～8％；支撑剂1～15%；pH缓冲液至全量。其制备方法为：采用三氯甲烷有机溶剂溶解含叶黄素、磷脂和胆固醇、表面活性剂，得到混合溶液；去除混合溶液中的三氯甲烷有机溶剂，直至形成一层均匀的薄膜；将膜水化后得到脂质体混悬液；加入支撑剂，经冷冻干燥方法制得冻干叶黄素脂质体；本发明专利技术制成的叶黄素的冻干脂质体制剂，增加水溶性同时具有稳定性好、粒度均匀，延长体内消除半衰期，从而一定程度上提高药效。

Preparation and preparation of lutein lyophilized liposome

The invention discloses a lutein lyophilized liposome preparation and a preparation method thereof. The preparation is composed of the following weight percentage components: lutein: 0.5-15%; phospholipid: 20-50%; cholesterol: 1-10%; surfactant: 0.5-8%; proppant: 1-15%; pH buffer to the full amount. The preparation method comprises the following steps: dissolving lutein, phospholipid, cholesterol and surfactant with chloroform organic solvent to obtain the mixed solution; removing chloroform organic solvent in the mixed solution until a uniform film is formed; hydrating the film to obtain the liposome suspension; adding the proppant to obtain the lyophilized lutein liposome by freeze-drying method; preparing The lyophilized liposome preparation of lutein can increase water solubility, have good stability and even particle size, and prolong the elimination half-life in vivo, so as to improve the efficacy to a certain extent.

【技术实现步骤摘要】
一种叶黄素冻干脂质体制剂及其制备方法
本专利技术涉及一种药物制剂领域，具体涉及一种叶黄素冻干脂质体制剂及其制备方法。
技术介绍
目前，叶黄素是一类含氧类胡萝卜素，广泛存在于深绿色叶蔬菜、橙子等黄色水果中，是人眼视网膜组织色素层的重要组成部分[1]。天然叶黄素是由一个含十八碳原子的共轭长链接两个不同的紫罗酮环（βiononeringandεiononering）构成，具有清除氧自由基和光屏蔽能力，可以作为强抗氧剂淬灭单线态氧和吸收短波长的蓝紫光。叶黄素的摄入可有效的预防和治疗年龄相关性黄斑变性、视网膜光损伤等疾病（璐姚,林嵩齐.叶黄素类物质对视觉功能的保护作用及其在青少年视力维护中的应用[J].眼科学报,2017,32(3):171-175.）；叶黄素在水中的溶解度低，叶黄素不溶于水，主要与脂类结合被人体吸收；且稳定性差，易受光、热、酸、溶剂、金属离子等影响，易发生氧化降解、光分解和热异构化反应；生物利用率差，在生物体内的血浆半衰期短，有研究表明游离叶黄素的生物利用度只有2%～9.4%。叶黄素的水不溶性和不稳定性限制了其在各领域的应用。脂质体是磷脂双分子层膜形成的囊泡将药物包裹后形成的一种新剂型，具有亲水性和疏水性，易与生物膜融合，安全无刺激等特点。利用脂质体作为载体，将叶黄素包埋在磷脂双分子层膜形成的囊泡中，提高了叶黄素的稳定性，增加了叶黄素在水中的溶解度；而且脂质体中的双分子层膜，与人体细胞膜结构相似，容易渗透进入细胞并释放药物，促进包裹药物跨角膜转运。叶黄素脂质体具备生理相容性好、载药能力强、物理化学存储稳定、进一步提高药物的生物利用度，且成本低、利于大规模生产等优点。研究表明最佳的冻干保护剂是蔗糖，糖脂比为3：1。对冻干脂质体进行显微形态观察发现为圆球状，得到的冻干叶黄素脂质体包封率为73.85%，粒径为202nm，PDI为0.167，渗漏率为7.26%。通过对各个指标进行对比，尽管包封率有所下降，粒径增大至200nm左右，冻干后明显抑制了脂质体的泄露，有效的降低了渗漏率和提高了稳定性，并不影响叶黄素的抗氧化特性。通过MDA和体外抗DPPH实验，发现叶黄素脂质体比叶黄素抗氧化效果更佳，在体外消化实验中，观察脂质体在模拟胃肠液中的形貌变化、磷脂水解程度和芯材的释放行为，对胃肠液中叶黄素和进一步运用相关性分析发现，叶黄素的生物可给率受其载入双分子层的能力和脂质体载体理化特性的影响。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种叶黄素冻干脂质体制剂及其制备方法，该制剂中的叶黄素具有良好的水溶性、脂质体粒度均匀、稳定性好，延长体内消除半衰期，从而一定程度上提高药效。本专利技术解决技术问题所采用的技术方案是：一种叶黄素冻干脂质体制剂，由以下重量百分比成分组成：叶黄素：0.5～15％；磷脂：20～50％；胆固醇：1～10％；表面活性剂：0.5～8％；支撑剂：1～15%；pH缓冲液至全量,缓冲液溶媒部分在冰冻干燥过程中除去。作为一种优选，所述磷脂为蛋黄卵磷脂、口服大豆磷脂和注射用大豆磷脂中的一种或两种的复合。作为一种优选，所述注射用大豆磷脂的用量为5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml或20mg/ml。作为一种优选，所述磷脂与胆固醇的比为5：1、10：1、15：1、20：1或25：1。作为一种优选，所述表面活性剂为span80、tween80和泊洛沙姆188或F68中的一种或两种的组合。作为一种优选，所述支撑剂由蔗糖、乳糖、葡萄糖、山梨醇和甘露醇中的一种或两种以上的组合，其质量比为1:1～6。作为一种优选，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液PBS、醋酸钠缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、硼酸钠缓冲液中的一种或两种的复合缓冲液，所述缓冲液的pH值为6.5～7.4作为一种优选，所述的溶剂是三氯甲烷。一种制备如上所述叶黄素冻干脂质体制剂的制备方法，包括以下步骤，1)将叶黄素、磷脂、胆固醇、表面活性剂溶于有机溶剂，制备叶黄素脂质体混悬液，所述叶黄素脂质体混悬液的制备采用薄膜超声法，具体步骤如下：将叶黄素、磷脂、胆固醇、表面活性剂溶解到有机溶剂中，将混合溶液减压于40℃下旋蒸除去有机溶剂直至在容器内壁形成一层黄色薄膜，继续旋蒸除去残余有机溶剂，然后加入pH为6.5～7.4的缓冲液，先在40～70℃条件下搅拌10～30min，随后在冰浴条件下超声3～10min，最后用微孔滤膜过滤整粒3次得到脂质体混悬液；2)向叶黄素脂质体混悬液中加入冻干支撑剂剂，进行冷冻干燥，所述冷冻干燥包括预冻、升华、干燥阶段，每个阶段的操作步骤如下：预冻：先将物料温度迅速降至-35～-45℃，保温3～5小时；升华：将已预冻的叶黄素冻干脂质体温度升至-20～-15℃，升华8～15小时；干燥：将物料温度升高到30～40℃，保温8～15小时。作为一种优选，所述微孔滤膜的孔径为0.22μm，粒径控制于80～250nm。本专利技术的有益效果是:脂质体作为新型的载体给药系统，具有生物膜特性和药物传输能力，将难溶性叶黄素药物包裹在脂质双分子层中，使其具有较强的两亲性,可以显著提高药物的口服跨膜吸收率及体内生物利用度，且具有生物相容性、低毒、易制备、可提高药物治疗指数等优点。附图说明图1为本专利技术磷脂种类对EE%和n影响的参考图。图2为本专利技术磷脂浓度对脂质体粒径大小影响的参考图。图3为本专利技术膜材比对EE%和n影响的参考图。图4为本专利技术表面活性剂对EE%和n影响的参考图。图5为本专利技术旋蒸转数对脂质体粒径大小影响的参考图。图6为本专利技术水化液种类对脂质体粒径大小影响的参考图。图7为本专利技术水化液浓度对脂质体粒径大小影响的参考图。图8为本专利技术缓冲液pH对EE%和n影响的参考图。图9为本专利技术超声功率对EE%和n影响的参考图。图10为本专利技术超声时间对EE%和n影响的参考图。图11为本专利技术冻干脂质体粒径分析图。图12为本专利技术冻干脂质体释放率曲线图。图13为本专利技术抗氧化实验结果的参考图。下面结合附图对本专利技术做进一步说明。具体实施方式一种叶黄素冻干脂质体由以下配比成分组成：叶黄素：0.5～15％；磷脂：20～50％；胆固醇：1～10％；表面活性剂：0.5～8％；支撑剂：1～15%；pH缓冲液至全量,缓冲液溶媒部分在冰冻干燥过程中除去。所述的磷脂为口服大豆磷脂、注射用大豆磷脂和蛋黄卵磷脂中的一种或二种；本专利技术磷脂选择注射用大豆磷脂，见图1；本专利技术所述的注射用大豆磷脂的使用浓度为5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml，优选地选用15mg/ml；见图2。本专利技术使用的磷脂与胆固醇的比为5：1、10：1、15：1、20：1、和25：1。其中磷脂与胆固醇的最优比为15:1左右，见图3。所述表面本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：由以下重量百分比成分组成：/n叶黄素： 0 .5～15％；/n磷脂： 20～50％；/n胆固醇： 1～10％；/n表面活性剂： 0.5～8％；/n支撑剂： 1～15%；/npH缓冲液至全量, 缓冲液溶媒部分在冰冻干燥过程中除去。/n

【技术特征摘要】
1.一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：由以下重量百分比成分组成：
叶黄素：0.5～15％；
磷脂：20～50％；
胆固醇：1～10％；
表面活性剂：0.5～8％；
支撑剂：1～15%；
pH缓冲液至全量,缓冲液溶媒部分在冰冻干燥过程中除去。


2.如权利要求1所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述磷脂为蛋黄卵磷脂、口服大豆磷脂和注射用大豆磷脂中的一种或两种的复合。


3.如权利要求2所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述注射用大豆磷脂的用量为5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml或20mg/ml。


4.如权利要求1所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述磷脂与胆固醇的比为5：1、10：1、15：1、20：1或25：1。


5.如权利要求1所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述表面活性剂为span80、tween80和泊洛沙姆188或F68中的一种或两种的组合。


6.如权利要求1所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述支撑剂由蔗糖、乳糖、葡萄糖、山梨醇和甘露醇中的一种或两种以上的组合，其质量比为1:1～6。


7.如权利要求1所述的一种叶黄素冻干脂质体制剂，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液PBS、醋酸钠缓冲液、枸橼酸盐...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈凤明，沈亿海，
申请(专利权)人：海宁凤鸣叶绿素有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33