The invention relates to a fluorinase aggregate labeled with a self-assembled short peptide tag, which is prepared by combining the self-assembled short peptide tag and the fluorinase. The fluorinase aggregate is a kind of nano scale fluorinase using self-assembled short peptide tag, which can improve the catalytic efficiency, enhance the thermal stability and have the reusability. The fluorinase aggregate can be used in the biotransformation catalyst of fluoride. At the same time, the fluorinase aggregate can be combined with nucleoside hydrolase to directly catalyze the inorganic fluoride ion (f
【技术实现步骤摘要】
一种自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体及应用
本专利技术属于蛋白质与酶工程
,尤其是一种自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体及应用。
技术介绍
随着基因组学和蛋白质组学的发展,越来越多的蛋白质通过基因重组技术,使用工程菌种进行表达纯化。所以,廉价、经济的蛋白质纯化方法的开发仍然是一项基本任务,蛋白质纯化也同样是生物技术的核心要求之一。在制药行业中,利用传统的色谱技术如离子交换、亲和色谱、凝胶过滤和反相色谱等纯化分离蛋白质,已经被很好地开发和使用。然而,这些年来,在实验室中,对于许多研究者来说,采用纯化标签来纯化蛋白质变得十分流行。这些标签主要基于亲和力,包括His标签,GST标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)标签和几丁质结合域(CBD)标签与内含肽介导的切割位点(IMPACT-CN)等。这些纯化标签通常能够使目的蛋白质含量达到约90%或更高的纯度,这样的纯度足以用于许多实验用途,例如测定酶学性质和蛋白质的表征。在这些纯化标签中,His-tag技术是无可争辩最常用的一种预填充镍柱来结合带His标签的靶蛋白,最终达到纯化的目的,这种 ...
【技术保护点】
1.一种自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述氟化酶聚集体是通过自组装短肽标签和氟化酶相结合制备得到的。/n
【技术特征摘要】
1.一种自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述氟化酶聚集体是通过自组装短肽标签和氟化酶相结合制备得到的。
2.根据权利要求1所述的自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述氟化酶聚集体为FIA-ELK16,其编码基因的基因序列为SEQNO.1,其编码基因的氨基酸序列为SEQNO.2;
或者,所述氟化酶聚集体为FIA-L6KD,其编码基因的基因序列为SEQNO.3,其编码基因的氨基酸序列为SEQNO.4;
或者,所述氟化酶聚集体为FIA-18A,其编码基因的基因序列为SEQNO.5,其编码基因的氨基酸序列为SEQNO.6。
3.根据权利要求2所述的自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述FIA-ELK16、FIA-L6KD、FIA-18A的最适温度分别为40℃、50℃、60℃,最适pH值均为6.0。
4.根据权利要求2所述的自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述FIA-ELK16的尺寸为500-600nm;所述FIA-L6KD和FIA-18A的尺寸均为200-300nm。
5.根据权利要求1至4任一项所述的自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述氟化酶聚集体的底物为S-腺苷-L-甲硫氨酸,即SAM。
6.根据权利要求1至4任一项所述的自组装短肽标签标记的氟化酶聚集体,其特征在于:所述氟化酶聚集体的催化产...
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