VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒制造技术

一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，包括盒体和用于扣合的上盖，所述盒体内设有POCT荧光免疫层析试纸条，所述POCT荧光免疫层析试纸条包括底板、加样区、样本垫、结合垫、吸水垫、检测线和质控线，所述结合垫与吸水垫之间为硝酸纤维素膜(简称NC膜)，该膜有微米级的孔隙构成，用于样本在试纸条上流动。该试剂盒具有检测灵敏度高，操作简单，操作流程短，储存时间长等优点。一方面减少了检测时间，另一方面，通过二者含量比值建立标准曲线，消除或大大减少了检测误差和假阳性的机率，使检测更加精准、重复性更高。

Fluorescence immunochromatography combined detection kit for VEGF multi tumor markers

【技术实现步骤摘要】
VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒
本专利技术涉及癌症诊断
，具体为VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒。
技术介绍
临床研究，肿瘤大于2mm时，主要通过新生血管输送足够的养分和排除代谢废物，并为其转移提供便利(2.HanahanD,FolkmanJ,Patternsandemergingmechanismsoftheangiogenicswitchduringtumorigenesis[J].Cell,1996,86(3)：353-364.)，血管生成需多种因子的参与，其中血管内皮生长因子信号通路是主要的限速环节(3.FerraraN.Vascularendothelialgrowthfactor[J].Arteriosclerthromb,2009,29(6):789-791)。肿瘤特异性生长因子(TumorSpecificGrowthFactor,TSGF)是恶性肿瘤及其周边毛细血管大量扩增的结果，并随着肿瘤的形成和增长逐渐释放到外周血液。恶性肿瘤病人血沮中存在TSGF，对恶性肿瘤血管增生起重要作用，在肿瘤形成早期即明显升高。血清TSGF是一种新的、敏感性和特异性较高的广谱肿瘤标志物，检测方法简便快捷，结果稳定。对恶性肿瘤的初筛、早期辅助诊断、疗效评价和预示肿瘤复发具有重要临床意义和应用价值。通过化学显色和分析技术,可以检测当细胞发生恶性转化时含量升高的TSGF。因此，这个指标可以用来做体检指标，是一种适合群体肿瘤普查的过筛试验。血管内皮生长因子(VEGF)是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，能够促进内皮细胞增生、促进血管增生、增加血管通透性、改变细胞外基质。能够通过结合分布于肿瘤血管内皮表面的VEGF抗体，调节肿瘤血管的生成。参与许多血管生成依赖性疾病的发病及其进展，主要是癌症，也包括某些炎性疾病以及风湿、类风湿、糖尿病视网膜病变等。研究证实，VEGF广泛分布于癌症患者体内，其浓度远远超过正常人。因此，可以通过检测人体内VEGF浓度达到癌症早期筛查的目的。此外，癌症患者中VEGF的浓度与肿瘤大小的变化密切相关，肿瘤数量越多，体积越大，VEGF浓度越高；肿瘤数量越少，体积越小，VEGF浓度越低。因此，VEGF的测定对于肿瘤患者病情监测及临床动态追踪有着积极意义。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒。该试剂盒简便、准确且高效。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，包括盒体和用于扣合的上盖，所述盒体内设有POCT荧光免疫层析试纸条，所述POCT荧光免疫层析试纸条包括底板、加样区、样本垫、结合垫、吸水垫、检测线和质控线，所述结合垫与吸水垫之间为硝酸纤维素膜，质控线位于试剂条的末端。作为一种优选的技术方案：所述硝酸纤维素膜上包被VEGF受体肿瘤标志物：PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、NSE、CYFRA21-1。作为一种优选的技术方案：所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体。作为一种优选的技术方案：所述POCT荧光免疫层析试纸条所检测蛋白抗原为VEGF、PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、CYFRA21-1肿瘤标志物抗原。作为一种优选的技术方案：所述荧光微球标记抗体分别为荧光微球标记的抗VEGF抗体，荧光微球标记PSA抗体，荧光微球标记AFP抗体，荧光微球标记CEA抗体，荧光微球标记CA199抗体，荧光微球标记CA125抗体，荧光微球标记CA153抗体，荧光微球标记CA50抗体，荧光微球标记CA724抗体。作为一种优选的技术方案：所述硝酸纤维素膜上抗体的包被量为0.05～1.0μg，结合垫上荧光微球标记抗体的标记量为0.05～1.0μg。作为一种优选的技术方案：所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体细胞裂解液包含体积百分比为0.05％～2％的表面活性剂、5mM～1M缓冲液和0.5mM～10mM蛋白酶抑制剂及含校准品干粉。作为一种优选的技术方案：所述校准品干粉为相应溶液浓度作为横坐标荧光强度的比值作为纵坐标，采用拟合法得到标准曲线。作为一种优选的技术方案：包括如下步骤：S1:首先将细胞裂解液加入样本采集管中，涡旋震荡；S2:将S1中震荡液置于冰箱-20℃，静置10min，之后置于37℃烘箱中烘烤1-5min；S3:再次震荡，离心处理，收集上清液；S4:将试剂盒中的荧光免疫层析试纸条在室温中恢复10-20min，于加样区加样；S5:置于荧光检测仪孵育仓，8-12min后，仪器自动检测并读取X线的荧光强度；S6：根据实际测得荧光的值与浓度标准曲线，得到样品中VEGF及其他肿瘤标志物蛋白浓度，再与标准取样时样本中VEGF及其它肿瘤标志物蛋白浓度对比，获得修正系数，根据标准曲线计算得出最终的浓度结果。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：该试剂盒具有检测灵敏度高，操作简单，操作流程短，储存时间长等优点。一方面减少了检测时间，另一方面，通过二者含量比值建立标准曲线，消除或大大减少了检测误差和假阳性的机率，使检测更加精准、重复性更高。附图说明图1为联合检测盘俯视图；图2为联合检测盘截面图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。结合图1、图2具体说明，VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，包括盒体和用于扣合的上盖，所述盒体内设有POCT荧光免疫层析试纸条，所述POCT荧光免疫层析试纸条包括底板、加样区、样本垫、结合垫、吸水垫、检测线和质控线，所述结合垫与吸水垫之间为硝酸纤维素膜，质控线位于试剂条的末端。在本实施例中，所述硝酸纤维素膜上包被VEGF受体肿瘤标志物：PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、NSE、CYFRA21-1。在本实施例中，所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体。在本实施例中，所述POCT荧光免疫层析试纸条所检测蛋白抗原为VEGF、PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、CYFRA21-1肿瘤标志物抗原。作为一种优选的技术方案：所述荧光微球标记抗体分别为荧光微球标记的抗VEGF抗体，荧光微球标记PSA抗体，荧光微球标记AFP抗体，荧光微球标记CEA抗体，荧光微球标记CA199抗体，荧光微球标记CA125抗体，荧光微球标记CA153抗体，荧光微球标记CA50抗体，荧光微球标记CA724抗体。在本实施例中，所述硝酸纤维素膜上抗体的包被量为0.05～1.0μg，结合垫上荧光微球标记抗体的标记量为0.05～1.0μg。在本实施例中，所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体细胞裂解液包含体积百分比为0.05％～2％的表面活性剂、5mM～1M缓冲液和0.5mM～10mM蛋白酶抑制剂及含校准品干粉。在本实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，包括盒体和用于扣合的上盖，所述盒体内设有联合检测盘，所述联合检测盘为POCT荧光免疫层析试纸条，所述POCT荧光免疫层析试纸条包括底板、加样区、样品垫、结合垫、吸水垫、检测线和质控线，所述结合垫与吸水垫之间为硝酸纤维素膜，质控线位于试剂条的末端。

【技术特征摘要】
1.一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，包括盒体和用于扣合的上盖，所述盒体内设有联合检测盘，所述联合检测盘为POCT荧光免疫层析试纸条，所述POCT荧光免疫层析试纸条包括底板、加样区、样品垫、结合垫、吸水垫、检测线和质控线，所述结合垫与吸水垫之间为硝酸纤维素膜，质控线位于试剂条的末端。2.根据权利要求1所述的一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上包被VEGF受体肿瘤标志物：PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、NSE、CYFRA21-1等。3.根据权利要求1所述的一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，所述结合垫上喷涂有荧光微球标记抗体。4.根据权利要求1所述的一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，所述POCT荧光免疫层析试纸条所检测蛋白抗原为VEGFPSAAFPCEACA199CA125CA153CA50CA724CA242CYFRA21-1肿瘤标志物抗原。5.根据权利要求3所述的一种VEGF多肿瘤标记物的荧光免疫层析联合检测试剂盒，其特征在于，所述荧光微球标记抗体分别为荧光微球标记的抗VEGF抗体，荧光微球标记PSA抗体，荧光微球标记AFP抗体，荧光微球标记CEA抗体，荧光微球标记CA199抗体，荧光微球标记CA125抗体，荧光微球标记CA153抗体，荧光微球标记CA50抗体，荧光微...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹检平，
申请(专利权)人：北京健平金星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11