用于快速诊断哮喘或过敏性疾病的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种用于诊断哮喘的试剂盒，上述用于诊断哮喘的试剂盒包括检测条，上述检测条包括基底部、形成于上述基底部的上部的第一反应部以及形成于上述第一反应部与上述基底部之间的展开膜，上述第一反应部包含从保藏编号为KCLRF‑BP00389(保藏日期：2017年1月9日，保藏单位：韩国细胞系研究联盟(KCLRF))的杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体，上述第二反应部包含从保藏编号为KCLRF‑BP00389(保藏日期：2017年1月9日，保藏单位：韩国细胞系研究联盟(KCLRF))的杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于快速诊断哮喘或过敏性疾病的试剂盒
本专利技术涉及用于诊断哮喘或过敏性疾病的试剂盒。本专利技术涉及可通过利用免疫色谱法来在外界(医院、门诊)或家中在20分钟内快速诊断以往不容易诊断的婴幼儿或小儿的哮喘或过敏性疾病的试剂盒。
技术介绍
在全世界范围内，哮喘和过敏性疾病的发病率和重症度持续增加。在美国，7％的小儿患有哮喘，并且，与支气管哮喘类似的作为呼吸道疾病的慢性鼻窦炎也占有15％。由于对这种疾病的诊断不简单，到目前为止还是没有找到用于帮助医师们诊断或预防疾病恶化的简单的诊断法。虽然知道在哮喘或过敏性疾病患者的呼吸道内发生慢性呼吸道炎症反应，但实际上，还是没有找到除了能够检测呼吸道炎症反应的研究目的的几种实验室性免疫检测法之外的简单的临床诊断法。尤其，难以区分呼吸道炎症是否由如细菌感染等微生物感染引起的还是在如哮喘等过敏性疾病中由过敏免疫反应引起的。由于这些原因，患有哮喘或过敏性疾病的患者们在大多数情况下接受长期使用抗生剂等的错误的治疗。目前，利用于支气管哮喘的诊断中的肺功能检查及乙酰甲胆碱支气管激发试验在使用过程中具有各种困难，即，为了获得准确的结果，需要良好的设备管理、熟练的检查人员、患者的积极配合，但由于这些原因，不容易对无法积极配合的6岁以下的婴幼儿或小儿患者、高龄层患者、身体障碍人士、目前哮喘已经严重恶化的患者等进行检查。并且，由于患者需要消耗很多体力而容易对检查产生反感，因此大多数情况下无法反复进行检查。因此，从以前开始就试图开发有助于哮喘的诊断的非侵入式或血液检查，而与此有关的为目前辅助性地利用于哮喘患者的血液嗜酸性粒细胞数、血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophilcationicprotein；ECP)等。这些在正常人、其他过敏性患者、哮喘等之间具有个人差别，因此无法利用于诊断中。因此，若能够开发可对在哮喘和过敏性疾病中作为最重要的免疫反应的嗜酸性粒细胞性炎症反应检测的简单的诊断用具，则可将会对如哮喘等疾病的诊断和治疗作出巨大的贡献。
技术实现思路
技术问题本专利技术所要解决的问题为提供可高可靠性地快速诊断哮喘或过敏性疾病的试剂盒。技术方案本专利技术的用于诊断哮喘的试剂盒可包括检测条，上述检测条包括：基底部；第一反应部，位于上述基底部的上部，并包含从杂交瘤细胞株(保藏编号为KCLRF-BP-00389)表达的单克隆抗体；以及展开膜，位于上述第一反应部与上述基底部之间，并包括包含从杂交瘤细胞株(保藏编号为KCLRF-BP-00389)表达的单克隆抗体的第二反应部。本专利技术的用于诊断过敏性疾病的试剂盒可包括检测条，上述检测条包括：基底部；第一反应部，位于上述基底部的上部，并包含从杂交瘤细胞株(保藏编号为KCLRF-BP-00389)表达的单克隆抗体；以及展开膜，位于上述第一反应部与上述基底部之间，并包括包含从杂交瘤细胞株(保藏编号为KCLRF-BP-00389)表达的单克隆抗体的第二反应部。有益效果本专利技术提供可高可靠性地快速诊断哮喘或过敏性疾病并预测及监测哮喘或过敏性疾病的预后的试剂盒。附图说明图1为根据本专利技术一实施例的用于诊断哮喘的试剂盒所包括的检测条的示意图。图2为将哮喘症状积分与通过ELISA法检测的EDN、ECP及总嗜酸性粒细胞数进行比较的结果。图2的a部分为EDN与哮喘症状积分的比较结果，图2的b部分为ECP与哮喘症状积分的比较结果，图2的c部分为与总嗜酸性粒细胞与哮喘症状积分的比较结果。图3示出根据本专利技术的用于诊断哮喘的试剂盒与当通过ELISA法诊断时的相关关系。图4示出根据本专利技术的用于诊断哮喘的试剂盒与基于MBL的诊断的相关关系(r＝0.8933)。图5示出根据本专利技术的用于诊断哮喘的试剂盒与基于BF的诊断的相关关系(r＝0.8748)。具体实施方式参照附图详细说明本专利技术，以使本专利技术所属领域的普通技术人员根据实施例容易实施本专利技术。本专利技术能够以多种不同形式来体现，且并不限定于在此说明的实施例中。附图中，为了明确说明本专利技术，省略了与说明无关的部分，在整个说明书中，对相同或类似的结构要素使用相同的名称。在本说明书中，“上部”和“下部”以附图为基准来定义，根据观察角度，“上部”可变更为“下部”，而“下部”可变更为“上部”，“上面(on)”或“上部(on)”也可以包括中间介有其他结构的情况，而不仅指就在上面的情况。相反地，“直接在上面(directlyon)”或“就在上面”表示在中间没有其他结构。在本说明书中，术语“杂交瘤”是指人工融合两种不同种类的细胞来制备的细胞。使用如聚乙二醇等使产生细胞融合的物质或特定种类的病毒来融合两种以上的同种细胞或异种细胞，由此制备杂交瘤细胞，可通过形成杂交瘤细胞来将互不相同的细胞所具有的其他功能整合到一个细胞中。若根据本专利技术的目的，可利用从保藏编号为KCLRF-BP-00389(保藏日期：2017年1月9日，保藏单位：韩国细胞系研究联盟(KCLRF))的杂交瘤细胞株制备的单克隆抗体。包含在试样中的嗜酸性粒细胞来源神经毒素(EDN：eosinophil-derivedneurotoxin)在第一反应部120与单克隆抗体结合后通过展开膜130移动并到达第二反应部140，则可在第二反应部140与单克隆抗体结合来被检测到。本专利技术中所使用的术语“单克隆抗体”作为在本领域中公知的术语，意味着指示单抗原性部位(表位(epitope))的高度特异性抗体。一般而言，单克隆抗体与包含指示不同的表位的不同的抗体的多克隆抗体不同，单克隆抗体指示抗原上的单表位。单克隆抗体具有改善利用抗原-抗体结合的诊断及分析学分析法的选择性和特异性的优点，并且，可通过融合细胞株(杂交瘤(hybridoma))的培养或噬菌体展示(phagedisplay)方法来生产，因此具有不被其他免疫球蛋白污染的优点。本专利技术的单克隆抗体能够以没有纯化的状态使用，但按照在本领域中通常使用的方法并根据需要，进行纯化之后再使用。作为这种纯化方法的例，包括透析、盐沉淀、离子交换层析法、尺寸排除色谱法、亲和层析法等，但本专利技术的抗体纯化方法并不限定于上述例。并且，本专利技术的单克隆抗体除非通过识别抗原的特定表位来具有抗原-抗体复合体的结合特性，不仅包含重链可变区及轻链可变区的形态，而且还包含抗体分子的功能性片段。上述抗体分子的功能性片段是指至少保有抗原结合功能的片段，可以为Fab、F(ab')、F(ab')2及Fv等。本专利技术的单克隆抗体可以为均包含重链可变区及轻链可变区的单克隆抗体。本专利技术的单克隆抗体的轻链及重链的可变区包括公知为“互补决定区(complementarity-determiningresion，CDR)”的三个多变性区域及四个“框架区(frameworkregion，FR)”。上述CDR的主要作用为与抗原的表位(epitope)结合。各个链的CDR典型地从N-末端依次被称为CDR1、CDR2、CDR3，并且，通过位于特定CDR的链来识别。另一方面，可通过在互补决定区(CDR)结合公知的治疗用抗体的框架区(FR)来制备本专利技术的单克隆抗体。在本专利技术中，提供与上述单克隆抗体的重链及轻链的可变区有关的CDRs的碱基序列。作为通过识别抗原的特定表位来形成抗原-抗体复合体的抗体的重要部位的重链和轻链的可变区，尤其CDR(co本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于诊断哮喘的试剂盒，其特征在于，包括检测条，所述检测条包括：基底部；第一反应部，位于所述基底部的上部，并包含从杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为KCLRF‑BP‑00389；以及展开膜，位于所述第一反应部与所述基底部之间，并包括包含从杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体的第二反应部，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为KCLRF‑BP‑00389。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.02.10 KR 10-2017-00185171.一种用于诊断哮喘的试剂盒，其特征在于，包括检测条，所述检测条包括：基底部；第一反应部，位于所述基底部的上部，并包含从杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为KCLRF-BP-00389；以及展开膜，位于所述第一反应部与所述基底部之间，并包括包含从杂交瘤细胞株表达的单克隆抗体的第二反应部，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为KCLRF-BP-00389。2.根据权利要求1所述的用于诊断哮喘的试剂盒，其特征在于，所述单克隆抗体由选自由金、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、荧光素及色素组成的组中的一种以上的标志物结合。3.根据权利要求1所述的用于诊断哮喘的试剂盒，其特征在于，所述展开膜还包括包含小鼠免疫球蛋白抗体的对照部。4.根据权利要求1所述的用于诊断哮喘的试剂盒，其特征在于，若第二反应部...

【专利技术属性】
技术研发人员：金昌根，
申请(专利权)人：仁济大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国,KR