有用物质的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种有用物质的生产方法，其为利用培养液中含有的微生物将有用物质分泌生产到培养液中的有用物质的生产方法，该生产方法中，微生物为选自由欧氏酵母属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、耶氏酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种，培养液含有选自由阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)组成的组中的一种以上的表面活性剂(A)。

Production methods of useful substances

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】有用物质的生产方法
本专利技术涉及有用物质的生产方法。
技术介绍
酵母被广泛用于生产氨基酸、蛋白质等有用物质。特别是，近年来，已知一种使用通过将医药上/工业上有用的蛋白质的基因导入酵母中而进行了转化的酵母来有效地生产蛋白质的技术。在使用大肠杆菌作为用于有用物质生产的细菌的情况下，由于大肠杆菌体内不存在糖链合成酶，因此其限于不带有糖的蛋白质的生产。另一方面，若在有用物质的生产中使用酵母，则酵母所表达的蛋白质通过糖链合成酶受到糖链附加等翻译后修饰后被分泌到菌体外，因此能够生产带有糖的蛋白质。但是，在利用酵母的蛋白质生产方法中，与大肠杆菌相比，存在蛋白质生产能力低的课题。为了解决该课题，报道了下述技术：以减薄酵母的细胞壁为目的，使用酿酒酵母(S.cerevisiae)或解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)的PMR1基因破坏株，由此来增加蛋白质分泌量(非专利文献1)。但是，该方法中仍然存在蛋白质的生产能力低的问题。现有技术文献非专利文献非专利文献1：J.Bacteriol.1998vol.180no.246736-6742
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的目的在于提供一种有用物质的生产方法，该生产方法能够利用微生物高效地分泌生产有用物质。用于解决课题的手段本专利技术人为了解决这些问题进行了深入研究，结果完成了本专利技术。即，本专利技术为一种有用物质的生产方法，其为利用培养液中含有的微生物将有用物质分泌生产到培养液中的有用物质的生产方法，该生产方法中，微生物为选自由欧氏酵母(Ogataea)属、酵母(Saccharomyces)属、克鲁维酵母(Kluyveromyces)属、汉逊酵母(Hansenula)属、毕赤酵母(Pichia)属、耶氏酵母(Yarrowia)属和假丝酵母(Candida)属组成的组中的至少一种，培养液含有选自由阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)组成的组中的一种以上的表面活性剂(A)。专利技术的效果本专利技术的有用物质的生产方法能够利用微生物高效地分泌生产有用物质。具体实施方式本专利技术的有用物质的生产方法为利用培养液中含有的微生物将有用物质分泌生产到培养液中的有用物质的生产方法，该生产方法中，微生物为选自由欧氏酵母属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、耶氏酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种，培养液含有选自由阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)组成的组中的一种以上的表面活性剂(A)。作为本专利技术的生产方法中使用的培养液，只要是该
中通常使用的细胞培养用培养基就可以没有特别限制地使用，可以使用包含碳源、氮源和其他必需营养素的天然培养基、合成培养基中的任一种。作为碳源，可以举出葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉等碳水化合物；乙酸、丙酸等有机酸；乙醇、丙醇等醇类。作为氮源，可以举出氨、氯化铵、硫酸铵、乙酸铵、磷酸铵等无机酸或有机酸的铵盐或者其他含氮化合物、以及蛋白胨、肉提取物、玉米浆等。作为其他必需营养素，可以举出无机盐类，作为无机盐类，使用磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸镁、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、碳酸钙等。从有用物质生产的方面出发，本专利技术中的微生物为选自由欧氏酵母属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、耶氏酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种，最优选为选自由酵母属、毕赤酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种。本专利技术中，培养液中含有选自由阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)组成的组中的一种以上的表面活性剂(A)。阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)与非离子型表面活性剂不同，可以说是离子型表面活性剂。即，本专利技术中的表面活性剂(A)为离子型表面活性剂。作为这些表面活性剂(A)，从有用物质的分泌效率的方面出发，表面活性剂(A)中的离子性基团在水中的pKa优选为1～5和/或8～14、进一步优选为1～4和/或9～14。离子性基团在水中的pKa是在25℃确定的值。作为pKa为1～5的离子性基团，具体地说，可以举出羧基(-COOH)、硫酸基(-OSO3H)、磺基(-SO3H)、亚磺基(-SO2H)、次磺基(-SOH)、磷酸基{-OP(＝O)(-OH)2}等酸性基团及其盐的基团。作为pKa为8～14的离子性基团，具体地说，可以举出季铵基、伯胺基～叔胺基等及其盐的基团。在(A)具有两个以上的离子性基团的情况下，从有用物质的分泌效率的方面出发，优选(A)中的离子性基团中的任一者的pKa为上述范围，进一步优选全部离子性基团的pKa为上述范围。作为阴离子表面活性剂(A1)，可以举出醚羧酸(A11)及其盐、硫酸酯(A12)或其盐、醚硫酸酯(A13)及其盐、磺酸盐(A14)、磺化琥珀酸盐(A15)、磷酸酯(A16)及其盐、醚磷酸酯(A17)及其盐、脂肪酸盐(A18)、酰基化氨基酸盐以及天然来源的羧酸及其盐(鹅去氧胆酸、胆酸和去氧胆酸等)等。作为醚羧酸(A11)及其盐，包含具有烃基(碳原子数为8～24)的醚羧酸及其盐。作为醚，从有用物质的分泌效率和细胞毒性的方面出发，优选环氧烷加成物，进一步优选为环氧乙烷和环氧丙烷中的一种或两种的加成物，特别优选为环氧乙烷加成物。作为环氧烷的聚合度，从有用物质的分泌效率和细胞毒性的方面出发，优选1～10。作为醚羧酸(A11)及其盐，具体地说，可以举出聚氧乙烯月桂基醚乙酸、聚氧乙烯月桂基醚乙酸钠盐、聚氧乙烯十三烷基醚乙酸钠盐、聚氧乙烯辛基醚乙酸钠盐和月桂基二醇乙酸钠盐等。作为硫酸酯(A12)及其盐，包含具有烃基(碳原子数为8～24)的硫酸酯及其盐。作为硫酸酯(A12)及其盐，具体地说，可以举出月桂基硫酸钠盐和月桂基硫酸三乙醇胺盐等。作为醚硫酸酯(A13)及其盐，包含具有烃基(碳原子数为8～24)的醚硫酸酯及其盐。作为醚，从有用物质的分泌效率和细胞毒性的方面出发，优选环氧烷加成物，进一步优选为环氧乙烷和环氧丙烷中的一种或两种的加成物，特别优选为环氧乙烷加成物。作为环氧烷的聚合度，从有用物质的分泌效率和细胞毒性的方面出发，优选1～10。作为醚硫酸酯(A13)及其盐，具体地说，可以举出聚氧乙烯月桂基醚硫酸钠盐和聚氧乙烯月桂基醚硫酸三乙醇胺盐等。作为磺酸盐(A14)，可以举出十二烷基二苯基醚二磺酸钠盐、十二烷基苯磺酸钠盐和萘磺酸钠盐等。作为磺化琥珀酸盐(A15)，可以举出聚氧乙烯月桂基磺化琥珀酸二钠盐、磺化琥珀酸月桂基二钠盐和磺化琥珀酸聚氧乙烯月桂酰乙醇酰胺二钠盐等。作为磷酸酯(A16)及其盐，可以举出辛基磷酸二钠盐和月桂基磷酸二钠盐等。作为醚磷酸酯(A17)及其盐，可以举出聚氧乙烯辛基醚磷酸二钠盐和聚氧乙烯月桂基醚磷酸二钠盐等。作为脂肪酸盐(A18)，可以举出辛酸钠盐、月桂酸钠盐和硬脂酸钠盐等。作为阴离子表面活性剂(A1)，优选下述通式(1)所表示的化合物。[化1]R1-(OA)s-Q(1)通式(1)中，R1表示碳原子数为1～30的一价烃基，(OA)表示氧化亚烷基(例如氧化亚乙基、氧化亚丙基和氧化亚丁基等)，s为1以上的整数，Q表示磺酸(盐)基、羧酸(盐)基或磷酸(盐)基。需要说明的是，磺酸(盐)是指磺酸和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种有用物质的生产方法，其为利用培养液中含有的微生物将有用物质分泌生产到培养液中的有用物质的生产方法，该生产方法中，微生物为选自由欧氏酵母属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、耶氏酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种，培养液含有选自由阴离子表面活性剂(A1)、阳离子表面活性剂(A2)和两性表面活性剂(A3)组成的组中的一种以上的表面活性剂(A)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.03.01 JP 2017-0384031.一种有用物质的生产方法，其为利用培养液中含有的微生物将有用物质分泌生产到培养液中的有用物质的生产方法，该生产方法中，微生物为选自由欧氏酵母属、酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、耶氏酵母属和假丝酵母属组成的组中的至少一种，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杣本聪，大洞怜惠，中西睦，
申请(专利权)人：三洋化成工业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP