【技术实现步骤摘要】
可以清除体内隐性感染的免疫细胞及其制备方法与应用
本专利技术是关于一种可以清除体内隐性感染的免疫细胞及其制备方法与应用,具体地说,是关于一种激活并扩增外周血单个核细胞制备得到的免疫细胞SIET(SilentInfectionEliminationTcells)及其制备方法,以及在制备用于减少感染及清除隐性感染的制剂中的应用,属于生物
技术介绍
隐性感染(Recessiveinfection)又称亚临床感染。是指病原体侵入人体后,仅引起机体产生特异性的免疫应答,不引起或只引起轻微的组织损伤,因而在临床上不显出任何症状、体征,甚至生化改变,只能通过免疫学检查才能发现。其中癌症感染的因素主要包括:乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV),人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV),丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus,HCV),幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)等。根据HPV与宫颈癌的关系,可将其分为两大类型:低危型主要指HPV-6、11型,高危型主要是指HPV-16、18型,有研究者 ...
【技术保护点】
1.一种免疫细胞的制备方法,该方法包括:体外分离并纯化外周血单个核细胞;用细胞激活因子I激活外周血单个核细胞;其中,细胞激活因子I含有IL‑2、IFN‑γ、GM‑CSF、IL‑4、TNF‑α,以生理盐水配置;用细胞激活因子II将激活后的细胞进行扩增;其中,细胞激活因子II含有IL‑2、IFN‑γ、IL‑15,以生理盐水配置;收获免疫细胞。
【技术特征摘要】
1.一种免疫细胞的制备方法,该方法包括:体外分离并纯化外周血单个核细胞;用细胞激活因子I激活外周血单个核细胞;其中,细胞激活因子I含有IL-2、IFN-γ、GM-CSF、IL-4、TNF-α,以生理盐水配置;用细胞激活因子II将激活后的细胞进行扩增;其中,细胞激活因子II含有IL-2、IFN-γ、IL-15,以生理盐水配置;收获免疫细胞。2.根据权利要求1所述的制备方法,其中,体外分离并纯化外周血单个核细胞的过程包括:将已加入肝素抗凝处理后的外周血分装至离心管中,离心,弃上清,向管中加入AIMV培养基,制成淋巴细胞悬液;然后加入到预置有淋巴细胞分离液的离心管中离心,离心后将淋巴细胞层转移到另一离心管中,加入AIMV培养基后离心,弃上清,再加入AIMV培养基后离心,弃上清,获得外周血单个核细胞;向外周血单个核细胞中加完全培养基,制成细胞悬液。3.根据权利要求2所述的制备方法,其中,所述完全培养基是按照以下方法进行操作的:全血离心,弃上清,4℃静置过夜,再离心,取上清作为向AIMV培养基中添加的血浆;向AIMV培养基中加入上述血浆,并按100U/ml浓度加入庆大霉素,制成含10v/v%自身血浆的完全培养基。4.根据权利要求1所述的制备方法,其中,细胞激活因子I含有IL-2浓度200-5000IU/mL、IFN-γ浓度500-10000IU/mL、GM-CSF浓度200-1500IU/mL、IL-4浓度10-500IU/mL、TNF-α浓度20-1000IU/mL,以生理盐水配置;用细胞激活因子II将激活后的细胞进行扩增;其中,细胞激活因子II含有IL-2浓度300-10000IU/mL、IFN-γ浓度300-10000IU/mL、IL-15浓度100-10000IU/mL,以生理盐水配置。5.根据权利要求1所述的制备方法,其中,用细胞激活因子I激活外周血单个核细胞的过程包括:向每20ml细胞悬液中加入细胞激活因子I0.5ml,于38.5℃、6.5%CO2的恒温培养箱中培养72小时;用细胞激活因子II将激活后的细胞进行扩增的过程包括:接种细胞72h后,将培养物转移至离心管中,离心;弃上清,AIMV培养基混悬细胞,并调...
【专利技术属性】
技术研发人员:古松海,吴茂友,蔡晓晴,康国媛,
申请(专利权)人:赛德特生物科技开发有限公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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