一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法技术

本发明专利技术涉及污水处理与生化分析及检测领域，公开了一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法，具体为：采用低温强酸提取微生物体内核苷酸的方式，有效提取微生物体内的核苷酸类物质，然后通过选择磷酸二氢钾浓度为5～10mM、pH值为3.9～4.1的超纯水溶液作为流动相A，磷酸二氢钾浓度为0.5M、硫酸钠浓度为0.5M、pH值为5.3～5.5的超纯水溶液作为流动相B，利用高效液相色谱结合标准曲线法进行检测及计算，实现对水处理微生物中鸟苷四磷酸含量的准确测定，为完善水处理工艺中微生物生长状态调节机制研究奠定基础。

A method for determination of guanosine tetraphosphate in microorganisms in water treatment process by HPLC

【技术实现步骤摘要】
一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法
本专利技术涉及污水处理与生化分析及检测领域，具体地说，涉及一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法。
技术介绍
鸟苷四磷酸又叫ppGpp，分子式为C10H17N5O17P4，分子量603.2，其结构如下：鸟苷四磷酸是一种高度磷酸化的鸟苷酸分子，其是微生物应对不同环境胁迫压力，进行生理适应性基因表达调控的报警信号分子，具有作用广泛、时效显著、微量易分解的特点。微生物细胞内鸟苷四磷酸的水平变化可导致如DNA复制受阻、rRNA合成抑制及降解、基因的差别表达以及代谢酶的激活或抑制等一系列重要生命过程改变。污水生物处理是现代污水处理应用中最广泛的方法之一，主要借助微生物的分解作用把污水中的有机物转化为简单的无机物，使污水得到净化。然而，微生物的生长环境条件较为严苛，营养物质、温度、pH与溶解氧等都会影响到微生物的正常生长繁殖，从而影响到污水处理的效果。因此，通过研究微生物体内鸟苷四磷酸的分析检测方法，可以为污水生物处理过程中微生物的生长状态进行监测，即为污水处理工艺运行状况监测提供了新的思路。目前常用于鸟苷酸分子分析的方法主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)将鸟苷四磷酸标准品加水溶解，配制成不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液；(2)采用高效液相色谱分别对不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液进行分析，色谱分析条件如下：流动相A为磷酸二氢钾浓度为5～10mM、pH值为3.9～4.1的超纯水溶液；流动相B为磷酸二氢钾浓度为0.5M、硫酸钠浓度为0.5M、pH值为5.3～5.5的超纯水溶液；进样并进行梯度洗脱，流动相梯度A:B由100:0到0:100，流速为0.8mL/min；以鸟苷四磷酸标准品溶液的浓度为横坐标，以测得的色谱主峰面积为纵坐标，绘制色谱主峰面积随鸟苷四磷酸浓...

【技术特征摘要】
1.一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)将鸟苷四磷酸标准品加水溶解，配制成不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液；(2)采用高效液相色谱分别对不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液进行分析，色谱分析条件如下：流动相A为磷酸二氢钾浓度为5～10mM、pH值为3.9～4.1的超纯水溶液；流动相B为磷酸二氢钾浓度为0.5M、硫酸钠浓度为0.5M、pH值为5.3～5.5的超纯水溶液；进样并进行梯度洗脱，流动相梯度A:B由100:0到0:100，流速为0.8mL/min；以鸟苷四磷酸标准品溶液的浓度为横坐标，以测得的色谱主峰面积为纵坐标，绘制色谱主峰面积随鸟苷四磷酸浓度变化的标准曲线，得到线性方程；(3)利用甲酸裂解待测微生物，提取待测微生物体内的鸟苷四磷酸，得到待测样品溶液，采用高效液相色谱对所述待测样品溶液进行分析，色谱分析条件与步骤(2)相同；(4)根据步骤(3)分析得到的所述待测样品溶液的色谱主峰面积，代入步骤(2)确定的标准曲线的线性方程，即可计算得到待测样品溶液的鸟苷四磷酸浓度，进而对待测微生物体内的鸟苷四磷酸进行定性和定量。2.根据权利要求1所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：金鹏康，任童，金鑫，石烜，池玉蕾，
申请(专利权)人：西安建筑科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61