一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，优化公式为

Application of a new drug for treatment of Haemophilus Haemophilus

【技术实现步骤摘要】
一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途
本专利技术涉及兽医药理学领域，特别是涉及一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途。
技术介绍
副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,HPS)是定殖于猪上呼吸道的一种常见的条件性致病菌，一般多继发于其它呼吸道病毒和细菌病原体，引起猪群严重的呼吸道疾病综合征，各种应激因素也可诱发该病。副猪嗜血杆菌在临床上可感染各年龄阶段的猪，以2周龄至4月龄最易感，临床上以浆液性纤维素性胸膜炎、关节炎、脑膜炎和肺炎为特征，有时会引起肺炎和败血症，又称为Glasser’sdisease。多数病呈亚急性或慢性，患畜出现精神沉郁、食欲不振、体温升高(39.6℃～41℃)，关节跛行等，常发病后2～3天死亡，给畜牧业的发展造成了巨大的经济损失。临床上用于治疗副猪嗜血杆菌病的药物有很多，包括β-内酰胺类、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类等。达氟沙星(Danofloxacin)是第3代动物专用氟喹诺酮类药物，能抑制细菌DNA旋转酶的合成而呈现杀菌作用，具有抗菌谱广、杀菌活性强、体内分布广泛、与其他抗菌药无交叉耐药等特点。以甲磺酸盐的形式给药后，吸收迅速、生物利用度高、组织中浓度高。目前达氟沙星在亚洲、欧洲、北美洲和拉丁美洲等很多国家已被批准应用于治疗牛、猪和鸡等兽禽类动物因细菌和支原体感染引起的呼吸道疾病。但由于抗生素在临床上的不合理或不正当使用以及副猪嗜血杆菌的适应性突变，很多地区的副猪嗜血杆菌均出现了不同程度的耐药性。副猪嗜血杆菌耐药菌株在德国，英国，西班牙，中国等许多国家都逐步被检测出来，现有的给药方案已经难以达到最初的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术结合目前达氟沙星对副猪嗜血杆菌的体内外抗菌效应以及临床治疗的有效性，建立了相应的给药剂量公式。本专利技术所述副猪嗜血杆菌菌株购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.11146。WindoW为本领域在期刊中发表过的一种计算折点值的通用方法，本专利技术涉及的软件的操作过程均为本领域技术人员的常规技术手段，且并非专利技术要点，在此不做赘述。为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：本专利技术提供一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，用量优化方法为：(1)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值；(2)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的药效学临界值；(3)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的临床临界值；(4)利用上述三种临界值，综合分析建立副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定耐药判定折点值；(5)运用折点值优化达氟沙星治疗副猪嗜血杆菌的给药剂量，具体公式为其中，Dose表示给药剂量；(AUC24/MIC)ex表示半体内药动学参数；CL/F表示生物利用度校正过的体清除率；fu表示蛋白结合率，BP为耐药判定折点值。进一步的，所述野生型临界值的获取包括：对副猪嗜血杆菌进行鉴定，测定达氟沙星对副猪嗜血杆菌的MIC，整理分析得到的MIC数据，用Ecoffinder软件模拟，得到副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值。进一步的，达氟沙星对副猪嗜血杆菌的体外药效学实验：用ERIC-PCR分型方法和小鼠毒力实验，筛选毒力较强的血清5型的菌株。测定达氟沙星对副猪嗜血杆菌H80菌株的体外MIC,MBC,MPC和PAE，绘制杀菌曲线，选择合适的PK-PD参数。进一步的，所述药效学临界值的获取包括：给猪肌肉注射2.5mg/kgb.w.的甲磺酸达氟沙星注射液，测定不同时间点血浆和肺泡液中的药物浓度，用Winnonlin软件模拟出相关的PK-PD参数，用蒙特卡洛软件模拟得到达标率为90％以上所对应的最大MIC值为最终的药效学临界值。进一步的，所述临床临界值的获取：选取血清5型的5个不同MIC的副猪嗜血杆菌进行临床治疗实验，以PK-PD推荐的治疗剂量为给药剂量，统计实验对副猪嗜血杆菌的抑制率。分析MIC与抑制率之间的关系，取抑制率大于等于90％的最大MIC为最终的临床临界值。进一步的，耐药判定折点值的判定包括：将得到的3个临界值按照CLSI的折点获取流程图来分析，得到达氟沙星对副猪嗜血杆菌的耐药判定标准。进一步的，运用耐药判定折点值优化达氟沙星治疗副猪嗜血杆菌的给药剂量，将得到的敏感性折点带入推荐的浓度依赖性药物的给药剂量公式，替换其MIC值，获取出推荐的给药剂量，具体公式为其中，Dose表示给药剂量；(AUC24/MIC)ex表示半体内药动学参数；CL/F表示生物利用度校正过的体清除率；fu表示蛋白结合率，BP为耐药判定折点值。本专利技术还提供所述的优化达氟沙星治疗副猪嗜血杆菌的给药剂量的技术在指导临床用药中的应用。本专利技术的有益效果是：1、本专利技术获取了达氟沙星对副猪嗜血杆菌的野生型临界值，基本代表了我国副猪嗜血杆菌的分布以及耐药现状，所获取的野生型临界值代表了我国达氟沙星对副猪嗜血杆菌的体外抗菌效应；2、本专利技术测定了达氟沙星在健康动物体内的药物代谢情况，获得了更稳定、可靠的达氟沙星在猪体内的药动学数据，并根据半体内的杀菌效应，获取了相应的药效学临界值；3、本专利技术采用不同MIC副猪嗜血杆菌攻毒，得到了MIC与临床治疗效应之间的关系，进一步分析得到了其临床临界值；4、本专利技术综合其野生型临界值、药效学临界值和临床临界值，建立了相应的给药剂量公式；5、经过本专利技术中的用量优化方法优化得到的给药剂量对于治疗副猪嗜血杆菌时具有良好的效果。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为达氟沙星对副猪嗜血杆菌的MIC分布；图2为副猪嗜血杆菌在TSB肉汤和猪肺泡灌洗液中的生长曲线；图3为达氟沙星对副猪嗜血杆菌的体外杀菌曲线；图4为达氟沙星对副猪嗜血杆菌的半体内杀菌曲线；图5为CART回归树分析临床治疗的结果；图6为敏感性折点获取流程图；图7为本专利技术的技术路线图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。本专利技术涉及的软件的操作过程均为本领域技术人员的常规技术手段，且并非专利技术要点，在此不做赘述。实施例1副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值的获取(1)达氟沙星对副猪嗜血杆菌的最小抑菌浓度(MIC)的测定采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的琼脂稀释法测定达氟沙星对副猪嗜血杆菌的MIC，参考标准为M31-A3。质控菌为粪肠球菌ATCC29212，质控药物为达氟沙星，质控范围为0.25μg/mL～1μg/mL，参考标准为M31-A3。每次测定MIC时均须同时测定质控菌株对质控药物的MIC，只有测定MIC在质控范围内，结果才可信。同时设定阳性对照和阴性对照，阳性对照为未添加药物的TSA平板，阴性对照为未加滴菌液的平板。含药平板的制备：准确称取本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，其特征在于：其用量优化方法为：(1)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值；(2)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的药效学临界值；(3)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的临床临界值；(4)利用上述三种临界值，建立副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定折点值；(5)运用耐药判定折点值优化达氟沙星治疗副猪嗜血杆菌的给药剂量，具体公式为

【技术特征摘要】
1.一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，其特征在于：其用量优化方法为：(1)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值；(2)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的药效学临界值；(3)获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的临床临界值；(4)利用上述三种临界值，建立副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定折点值；(5)运用耐药判定折点值优化达氟沙星治疗副猪嗜血杆菌的给药剂量，具体公式为公式(1)中，Dose表示给药剂量；(AUC24/MIC)ex表示半体内药动学参数；CL/F表示生物利用度校正过的体清除率；fu表示蛋白结合率，BP为耐药判定折点值。2.根据权利要求1所述的一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，其特征在于：步骤(1)所述获取副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值的过程包括：对副猪嗜血杆菌进行鉴定，测定达氟沙星对副猪嗜血杆菌的MIC，整理分析得到的MIC数据，用Ecoffinder软件模拟，得到副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值。3.根据权利要求1所述的一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，其特征在于：步骤(2)所述药效学临界值的获取包括：给猪肌肉注射2.5mg/kgb.w.的甲磺酸达氟沙星注射液，测定不同时间点血浆和肺泡液中的药物浓度，用Winnonlin软件模拟出相关的PK-PD参数，用蒙特卡洛软件模拟得到达标率为90％以上所对应的最大MIC值为最终的药效学临界值。4.根据权利要求1所述的一种达氟沙星在治疗副猪嗜血杆菌药物中的用途，其特征在于：步骤(3)所述临床临界值是根据达氟沙星对副猪嗜血杆菌的临床有效性建立的，通过CART软件、“WindoW”和非线性回归模拟得...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝海红，袁宗辉，徐紫慧，罗讯，黄玲利，王玉莲，彭大鹏，王旭，陈冬梅，陶燕飞，潘源虎，谢书宇，程古月，瞿玮，刘振利，谢长清，房诗薇，黄啸，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42