富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，包括以下步骤：（1）将橄榄油与棕榈油酸油脂、ARA油脂和DHA藻油充分混合获得初混油脂；（2）将混合油脂与大豆卵磷脂、伯克霍尔德氏菌复合酶液混合均匀，在35‑45℃下反应2‑4小时，获得磷脂粗产物。（3）将磷脂粗产物在乙醇中溶解，混合后除去不溶物获得提取液A；向提取液A中滴加硫酸锌水溶液，反应结束后除去水相获得提取液B。（4）将提取液B超声孵育20‑30分钟，萃取，获得富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物。所述橄榄油衍生物增加了橄榄油的食用价值，提高了其抗氧化性能，解决了在不添加外源抗氧化剂前提下富含多不饱和脂肪酸复配油脂保存期限太短的问题，具有广阔的市场应用前景。

Preparation and Application of Olive Oil Derivatives Rich in Equilibrium Unsaturated Fatty Acids

【技术实现步骤摘要】
富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备及应用
本专利技术属于油脂化工领域，涉及一种橄榄油衍生物的制备及应用，尤其涉及一种多用途且富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备及应用。
技术介绍
橄榄油是由新鲜的油橄榄果实直接冷榨而成的，不经加热和化学处理，保留了天然营养成分。橄榄油富含丰富的单不饱和脂肪酸——油酸，还有维生素A、维生素B、维生素D、维生素E、维生素K及抗氧化物等；被认为是迄今所发现的油脂中最适合人体营养的油脂。橄榄油的突出特点是含有大量的单不饱和脂肪酸。众所周知，单不饱和脂肪酸可以调整人体血浆中高、低密度脂蛋白胆固醇的比例，能增加人体内的高密度脂蛋白HDL(好胆固醇)的水平和降低低密度脂蛋白LDL(坏胆固醇)水平，从而能防止人体内胆同醇过量。然而，橄榄油油脂成分主要包括棕榈酸C16:0(7.5wt％-20wt％)，棕榈油酸C16:1(0.3wt％-3.5wt％)，硬脂酸C18:0(0.5wt％-5.0wt％)，油酸C18:1(55.0wt％-83.0wt％)，亚油酸C18:2(3.5wt％-21.0wt％)，亚麻酸C18:3(0.1wt％-1.0wt％)，由此可知，橄榄油中缺乏长链多不饱和脂肪酸组分，营养成分不尽均衡。多不饱和脂肪酸(Polyunsaturatedfattyacids,PUFAs)具有重要的生理功能，目前人们重点关注的PUFA主要有两大类：ω-3型和ω-6型PUFAs。其中，二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)分别是它们的代表，是人体自身不能直接从头合成又不可缺少的重要营养素。ω-6和ω-3PUFAs在哺乳动物细胞内不能相互转换，且是动植物细胞膜的重要组成成分，具有不同的生理功能。细胞膜多不饱和脂肪酸组成比例很大程度上由膳食决定，因此平衡膳食中ω-6/ω-3PUFAs具有非常重要的意义。专利技术专利201310634890.7通过向橄榄油中添加甘油三酯型的DHA增加橄榄油中长链多不饱和脂肪酸的含量；然而，DHA的添加量低于5％，远远不能满足下游食品加工行业的需求。这是由于，长链多不饱和脂肪酸极易被氧化，大量添加长链多不饱和脂肪酸使其混合产品十分不易保存，必须额外添加抗氧化剂如TBHQ、抗坏血酸棕榈酸酯等，不但工艺繁琐，而且额外增加了成本，同时使用剂量有严格限制，在多不饱和脂肪酸含量较高时抗氧化效果欠佳。专利技术专利申请201711252630.8通过将大豆、油菜籽分别与红花籽、亚麻籽、核桃籽混合粉碎，利用超临界的方法制备了ω-6/ω-3PUFAs比值为2-4的甘油三酯型调和油。专利技术专利申请200910010346.9公开了“一种脂肪酸比例均衡的营养调和油”，其中油脂按质量百分比，紫苏油和亚麻油占5-30％，两者之间以任意比混合，余量为葵花籽油、芝麻油和核桃油，根据确定的紫苏油和亚麻油中ω-6、ω-3多不饱和脂肪酸(PUFA)的含量，对葵花籽油、芝麻油和核桃油进行调配，使所述营养调和油的最终ω-6和ω-3多不饱和脂肪酸达到4-6:1的质量比。这些专利均尝试对ω-6/ω-3PUFAs比值进行控制，但最终结果均未达到1:1的最佳比例。磷脂酰胆碱是一种具有乳化、渗透、湿润和抗氧化等独特功能的天然乳化剂。由于磷脂酰胆碱既亲脂又亲水，可以将体内的水分和油脂充分混合，避免水分大量流失而引起的皮肤粗糙老化；可将多余的脂肪化为较小的乳滴排出体外，帮助产妇或肥胖者尽快恢复体形；可将血液中的胆固醇和脂肪酸化为极细的颗粒，从血管中排出，升高了高密度脂蛋白，使血管恢复弹性，血流畅通，被誉为“血管清道夫”。因此，磷脂酰胆碱在医药、保健品、食品、日化、饲料、皮革等领域中都有广泛的用途。目前，通常使用蛋黄或大豆磷脂制备磷脂酰胆碱，不但制备工艺相对复杂、产率和纯度较低，而且产物中脂肪酸组成相对单一，通常缺乏不饱和脂肪酸。
技术实现思路
针对现有技术橄榄油利用方面存在的诸多问题，本专利技术提供了一种富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法。本专利技术制备的橄榄油衍生物不但增加了橄榄油的食用价值，而且提高了其抗氧化性能，从而解决了在不添加外源抗氧化剂的前提下富含多不饱和脂肪酸复配油脂的保存期限太短的问题，为产品的市场化提供了技术支持，具有巨大的经济前景。本专利技术的技术方案：富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，主要包括以下步骤：(1)将橄榄油与棕榈油酸油脂、ARA油脂和DHA藻油充分混合获得初混油脂，四种油脂混合的比例为(按重量计)：橄榄油50-70份，棕榈油酸油脂25-35份，ARA油脂20-30份，DHA藻油20-30份。橄榄油、ARA油脂和DHA藻油均为购买的商业化产品。棕榈油酸油脂从魏氏藻(Vischeria)中提取制备。(2)将混合油脂与大豆卵磷脂、伯克霍尔德氏菌复合酶液按重量比3-5:1:8-10的比例混合均匀，氮气保护、在35-45℃条件下反应2-4小时，获得富含功能性脂肪酸的磷脂粗产物。所述伯克霍尔德氏菌复合酶液中脂肪酶与磷脂酶的活力比为1:7-10。(3)将步骤(2)获得的磷脂粗产物在无水乙醇中溶解，混合均匀后过滤除去不溶物获得提取液A；向提取液A中在氮气保护下以每分钟60-120滴的速率滴加浓度为50-70％的硫酸锌水溶液，控制pH为6.0-7.5，反应时间为40-60分钟。反应结束后除去水相获得提取液B。(4)将提取液B超声孵育20-30分钟，随后进行萃取。萃取温度为40-60℃，萃取压力为0.8-1.5Mpa，萃取时间60-90分钟，并使用无水乙醇作为溶剂萃取2-4次。(5)萃取获得的产物即为富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物。其中富含均衡不饱和脂肪酸的磷脂酰胆碱含量可达90％以上，其总脂肪酸中ω-6/ω-3/ω-7脂肪酸的比值约为1:1:1。其中，棕榈油酸油脂从魏氏藻(Vischeria)中提取制备的具体方法为：魏氏藻培养基包括葡萄糖5-30g/L，酵母提取物5-10g/L，玉米浆5-10g/L，磷酸二氢钾0.5-5g/L，硫酸镁0.5-3g/L，柠檬酸钠0.5-3g/L。培养温度为20-28℃，通入1％的CO2搅拌培养，培养周期为10天。然后按湿藻重量的1-5％加入蜗牛酶，40-50℃反应4-6小时，将获得的酶解液使用三相离心机进行分离后，上层油相即为棕榈油酸油脂。所述离心力为10000-11000g，所使用分离环的孔径为0.5-1mm。其中，伯克霍尔德氏菌复合酶液由伯克霍尔德氏菌发酵获得。发酵培养基成分为：质量体积比为2.0-5.0％的葡萄糖、质量体积比为2.0-5.0％的酵母提取物、质量体积比为0.4-0.8％的KH2PO4、质量体积比为0.3-0.5％的MgSO4，维生素B1220-50mg/L和生物素30-50mg/L。具体培养条件为：培养温度为20-28℃，通气比2-2.5VVM，培养时间48-72小时，离心收集，获得的上清液利用低温真空浓缩装置在30-50℃下浓缩至原体积的10-15％，即获得伯克霍尔德氏菌复合酶液。所述低温真空浓缩的温度为30-50℃，真空度为10-100Pa。其中，在步骤(2)和步骤(3)所述的氮气是高纯氮气。富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物，其总脂肪酸的组成比例为：豆蔻酸(C14:0)2-4％，棕榈酸(C16:0)13-18％，棕榈油酸(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)按重量份数计，将50‑70份橄榄油、25‑35份棕榈油酸油脂、20‑30份ARA油脂和20‑30份DHA藻油混合，得到初混油脂；(2)将初混油脂与大豆卵磷脂、伯克霍尔德氏菌复合酶液按3‑5:1:8‑10的重量比混合均匀，在35‑45℃条件下反应2‑4小时，得到富含功能性脂肪酸的磷脂粗产物；(3)将步骤(2)得到的磷脂粗产物在无水乙醇中溶解，混合均匀、过滤，得到提取液A，向提取液A中滴加浓度为50‑70％的硫酸锌水溶液，控制pH为6.0‑7.5，反应40‑60分钟；反应结束后，除去水相，得到提取液B。(4)将提取液B孵育20‑30分钟，随后进行萃取；萃取温度为40‑60℃，萃取时间60‑90分钟，萃取溶剂为无水乙醇；萃取2‑4次，得到的产物即为富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物。

【技术特征摘要】
1.富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)按重量份数计，将50-70份橄榄油、25-35份棕榈油酸油脂、20-30份ARA油脂和20-30份DHA藻油混合，得到初混油脂；(2)将初混油脂与大豆卵磷脂、伯克霍尔德氏菌复合酶液按3-5:1:8-10的重量比混合均匀，在35-45℃条件下反应2-4小时，得到富含功能性脂肪酸的磷脂粗产物；(3)将步骤(2)得到的磷脂粗产物在无水乙醇中溶解，混合均匀、过滤，得到提取液A，向提取液A中滴加浓度为50-70％的硫酸锌水溶液，控制pH为6.0-7.5，反应40-60分钟；反应结束后，除去水相，得到提取液B。(4)将提取液B孵育20-30分钟，随后进行萃取；萃取温度为40-60℃，萃取时间60-90分钟，萃取溶剂为无水乙醇；萃取2-4次，得到的产物即为富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物。2.根据权利要求1所述的富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，其特征在于：步骤(3)滴加硫酸锌水溶液的速率为每分钟60-120滴；所述步骤(2)和步骤(3)中均使用纯度为99.999％以上的高纯氮气作为保护气体。3.根据权利要求2所述的富含均衡不饱和脂肪酸的橄榄油衍生物的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的棕榈油酸油脂从魏氏藻中提取制备，魏氏藻培养基具体包括：葡萄糖5-30g/L，酵母提取物5-10g/L，玉米浆5-10g/L，磷酸二氢钾0.5-5g/L，硫酸镁0.5-3g/L，柠檬酸钠0.5-3g/L；具体培养条件为：培养温度为20-28℃，通入1％的CO2搅拌培养，培养周期为10天；然后按湿藻重量的1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔球，邓煜，宋晓金，刘婷，
申请(专利权)人：青岛中科潮生生物技术有限公司，陇南市经济林研究院油橄榄研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37