用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的miRNAs标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的miRNAs标志物及其应用。miR‑21、miR‑155、miR‑221、miR‑222在不稳定斑块伴脑梗死组、不稳定斑块组、稳定斑块组的表达水平较健康对照组明显升高，miR‑126在不稳定斑块伴脑梗死组、不稳定斑块组中的表达水平较稳定斑块组均明显降低，而且不稳定斑块伴脑梗死组中miR‑126的表达水平较不稳定斑块组也有明显降低。上述5种miRNAs与斑块的增长、不稳定、破裂演变过程密切相关，可应用于评估颈动脉粥样硬化斑块稳定性及脑卒中高危人群的筛查。

MicroRNAs markers for the diagnosis of carotid atherosclerotic plaques and their application

【技术实现步骤摘要】
用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的miRNAs标志物及其应用
本专利技术涉及检验医学
，具体涉及一组用于颈动脉粥样硬化斑块的诊断标志物miRNAs及其应用。
技术介绍
根据卫生部第三次全国死亡原因调查显示，脑血管疾病已经成为中国人疾病死亡第一位原因，其中脑梗死约占75％，其具有高发病率、高复发率、高致残率、高致死率、高费用“五高”的特点，给个人、家庭和社会造成了严重的负担。我国每年用于卒中医疗费用高达400亿元。颈动脉粥样硬化斑块破裂所致栓子是导致脑梗死的主要原因，其形成不仅与斑块大小有关，而且与斑块稳定性明显相关。近年来，颈动脉斑块稳定性的研究越来越受到重视，如何准确评价斑块稳定性是现代医学领域研究的热点之一，识别和干预不稳定的颈动脉硬化斑块对于卒中的防治意义非常重大。当不稳定的颈动脉斑块破裂、脱落所致栓子导致脑梗死时，此时该斑块即为此次脑梗死的责任斑块，亦有学者称之为罪犯斑块。影像学对责任斑块的判定，需要具体结合临床知识和特定患者，尚无统一判定标准。颈动脉粥样硬化斑块(稳定斑块、易损斑块)的识别目前临床主要借助于影像学检查，如B超、高分辨率MRI、DSA检查等，其中B超检查常为首本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一组用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的引物组，其特征在于,引物具体序列如下所示：

【技术特征摘要】
2019.02.04 CN 20191010917101.一组用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的引物组，其特征在于,引物具体序列如下所示：2.一组用于诊断颈动脉粥样硬化斑块的miRNAs标志物：miR-21、miR-126、miR-155、miR-221和miR-222；具体地，miR-21、miR-155、miR-221、miR-222在不稳定斑块伴脑梗死组、不稳定斑块组、稳定斑块组的表达水平较健康对照组升高，miR-126不稳定斑块伴在脑梗死组、不稳定斑块组中的表达水平较稳定斑块组均降低，而且不稳定斑块伴脑梗死组中miR-126的表达水平较不稳定斑块组也降低。3.一种利用miRNAs诊断颈动脉粥样硬化斑块的方法，具体步骤如下：(1)收集颈动脉粥样硬化患者及对应的健康血清样本；(2)颈动脉粥样硬化患者及对应健康血清总RNA提取：1)将步骤(1)获得的血清样本转移至离心管，加入Trizol置于涡旋震荡仪剧烈涡旋10-40s，然后室温静置2-10min,使核蛋白复合物充分裂解，制得裂解物；2)在步骤1)制得的裂解物中加入氯仿，剧烈震荡5-30s，室温静置2-6min，得混合物A；其中，血清、Trizol和氯仿的体积比为1:3:1；3)提前开启离心机使其预冷至4℃，将步骤2)制得的混合物A，12000g离心10-25min；4)用移液器吸取步骤3)离心后的上清液体转移到新的离心管，加入0.6～1倍体积的异丙醇混匀，将混匀的样品在15-20℃条件下孵育5-20min，沉淀RNA；5)将步骤4)中沉淀后的样品，12000g，4℃，5min离心后弃上清，加0.5-2ml75％乙醇清洗沉淀，7500g，4℃，5min离心得RNA粗品；6)将步骤5)中的RNA粗品晾干沉淀，再加入溶剂溶解沉淀并保存；其中，步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈红芳，程兴，潘小玲，
申请(专利权)人：金华市中心医院，
类型：发明
国别省市：浙江,33