【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞的制备方法及其应用
本专利技术属于生命科学的
,具体地,涉及用于治疗红斑狼疮的一种间充质干细胞的制备方法及其应用。
技术介绍
系统性红斑狼疮(简称SLE)是一种常见的免疫性疾病。病因尚不明确,其特点为整个免疫系统功能紊乱,细胞凋亡异常,淋巴细胞功能异常,其血清具有以抗核抗体为代表的多种自身抗体,造成全身多系统器官的慢性损害。传统激素免疫抑制剂的治疗方式副作用大,病人需终身服药。系统性红斑狼疮是一种累及多系统多器官的自身免疫病,患者体内免疫系统功能紊乱,T、B淋巴细胞异常活化,产生多种自身抗体和免疫复合物,导致患者皮肤、关节、肾脏等全身多个器官及系统受到损害。SLE好发于青年女性,男女比例为1:9,在我国成年女性中发病率为0.1%,高于西方国家的0.05%,且随着社会经济的发展及生活压力的增加,SLE的发病率日益上升,由于该病病程长且反复发作,给患者的心理和生理带来了极大的影响。SLE常用的治疗方法主要是通过服用糖皮质激素或免疫抑制剂等药物,以此来缓解因免疫系统攻击正常组织所造成的炎症反应和抑制免疫系统的作用。虽然糖皮质激素与免疫抑制剂被用于治 ...
【技术保护点】
1.一种间充质干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从绿色荧光蛋白转基因的小鼠的股骨和胫骨收集等分的骨髓(BM)抽吸物,骨髓(BM)抽吸物是在无菌条件下进行的;(2)通过Ficoll‑Paque密度梯度离心法选择骨髓单核细胞;(3)在37℃下和5%CO2的75‑cm
【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从绿色荧光蛋白转基因的小鼠的股骨和胫骨收集等分的骨髓(BM)抽吸物,骨髓(BM)抽吸物是在无菌条件下进行的;(2)通过Ficoll-Paque密度梯度离心法选择骨髓单核细胞;(3)在37℃下和5%CO2的75-cm2烧瓶中,在补充有体积分数为20%胎牛血清(FBS)、100μl/ml青霉素和100μg/ml链霉素的改良的EAG培养基(MEM-α)中进行培养;(4)每4-5天更换一次含有非贴壁细胞的培养基;(5)在达到90%汇合后,通过胰蛋白酶消化收获贴壁细胞;在这种条件下,Sca-1阳性细胞超过96.67%。2.根据权利要求1所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,进行密度梯度离心法时首先将置于离心管中的骨髓抽吸物用与所述骨髓抽吸物等体积的磷酸缓冲盐溶液进行3遍洗涤。3.根据权利要求2所述的间充质干细胞的制备方法,其特征在于,所述离心管是采用SepMateTM离心管,安装有插件;离心是以2800-3200r/min的转速进行离心操作30-40min。4.根据权利要求1-3所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:聂瑛洁,张湘燕,陈辉,胡荣贵,余福勋,罗振华,叶贤伟,查艳,许永杰,
申请(专利权)人:贵州省人民医院,
类型:发明
国别省市:贵州,52
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