一种黄豆黄素纯品的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种黄豆黄素纯品的制备方法，包括如下步骤：将豆浆水经过静置沉降、加碱处理、乙酸乙酯选择性萃取，制得；加碱处理中，加入的碱为NaOH；所述豆浆水为碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的乳清。脱脂豆粕经过碱提将大豆纤维等和蛋白的分离，也促使蛋白和大豆异黄酮分离，蛋白又经酸沉和溶液中的黄酮分离，碱提和酸沉排放液混合成pH接近5‑6.5的豆浆水，豆浆水中含大量的黄豆黄素，是制备黄豆黄素的优质原料。

A Method for Preparing Pure Soybean Flavone

【技术实现步骤摘要】
一种黄豆黄素纯品的制备方法
本专利技术具体涉及一种黄豆黄素纯品的制备方法。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。黄豆黄素，其别名为：4',7-二羟基-6-甲氧基异黄酮，化学式为C16H12O5，与大豆素、大豆素苷、染料木素、染料木苷和黄豆黄苷并称为大豆异黄酮。黄豆黄素的药理药效为：1)具有雌性激素及抗雌激素性质；2)具有抗氧化作用；3)可以抑制酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性；4)可以抑制拓扑异购酶Ⅱ的活性；5)具有诱发细胞程序性死亡、提高抗癌药效、抑制血管生成等作用，是一种很有潜力的癌症化学预防剂，其抗癌作用及机制具有广泛的应用前景。我国每年从国外大量进口大豆，除加工成大豆蛋白产品外，大豆异黄酮产品的生产种类越来越多，其中包括各种单一组分的产品以及各种组分的混配产品。为了检测各种产品的质量是否达标，需要对各种产品中的各种组分进行检测，检测过程中常用大豆异黄酮的各种标准品进行标定，现有的标准品，如黄豆黄素的价格昂贵，是因为黄豆黄素标准品一般是采用逆流分配色谱、柱色谱、高效液相色谱等方法进行制备，这些方法必须依赖于仪器，样品处理繁琐使样品达到仪器运行的要求，样品处理过程中试剂用量多、处理时间长且制样少。现有的大豆异黄酮的制备工艺一般是将原料大豆粕加热恒温醇萃取，萃取液在提纯塔中分离提纯，萃取液浓缩，大豆异黄酮萃取液的连续真空干燥，制得产品。产品一般为各种异黄酮的混合物，产品的纯度一般在40％左右。采用现有的方法难以制备出纯净的大豆异黄酮，且由于大豆异黄酮中的6种物质的物化性质相似，致使更难以从中直接提取纯净的黄豆黄素产品。
技术实现思路
脱脂大豆(豆粕)经碱水浸提，离心分离除去不溶物，从而获得一个分散有可溶性蛋白和某些非蛋白质的溶液(母液)，母液被酸沉，分离出凝乳和乳清，凝乳经清洗除去非蛋白溶质，再经喷雾干燥，得到大豆蛋白粉，乳清中难以再制备出优质的蛋白粉，所以一般是作为污水经过处理后排放。专利技术人发现，这些需要处理的乳清(即本专利技术中的豆浆水)中含有大量的大豆异黄酮，可以成为提取黄豆黄素的原料，但是乳清中还含有纤维素、碳水化合物、钙、磷、铁、维生素、胡萝卜素、蛋白质、尼克酸等物质，而且大豆异黄酮的六种物质有相同的基本结构，其物理化学性质相似。所以，如何从豆浆水中提取纯净的黄豆黄素成为专利技术人需要解决的问题。针对上述现有技术中存在的技术问题，本专利技术的目的是提供一种从豆浆水中提取纯化黄豆黄素的方法。为了解决以上技术问题，本专利技术的技术方案为：一种黄豆黄素纯品的制备方法，包括如下步骤：将豆浆水经过静置沉降、加碱处理、乙酸乙酯选择性萃取，制得；加碱处理中，加入的碱为NaOH；所述豆浆水为碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的乳清。专利技术人在豆浆水的综合利用时意外发现，豆浆水沉降后大部分大豆异黄酮进入到黄色液体中，而如果向黄色液体中加入的碱发生变化时，会影响得到的产物、产物的纯度以及产物的收率。专利技术人进一步试验发现，向溶解有大豆异黄酮的黄色液体中投加NaOH时，反应后，再投加乙酸乙酯萃取时，可以制备黄豆黄素纯品，经过检测，制备得到的产品中黄豆黄素的纯度达到98％以上。而当向黄色液体中加入Na2CO3进行碱提，加入乙酸乙酯进行萃取，可以制备大豆素纯品，该制备大豆素纯品的方法同时在另一申请中申报。在一些实施例中，所述方法的具体步骤为：豆浆水自然沉降后，取下层黄色液体；向黄色液体中加入NaOH，搅拌反应设定时间后，静置；除去沉淀后，向液体中加入乙酸乙酯提取，将提取液蒸干，得到黄豆黄素。进一步的，所述自然沉降的时间为4-6h，温度为20-35℃。进一步的，反应完成后，液体分为两层，分别取两层液体，并向两层液体中分别加入乙酸乙酯进行提取。更进一步的，上层液体与加入其中的乙酸乙酯的体积比为1.5-2：1，下层液体与加入其中的乙酸乙酯的体积比为0.4-2.5：1。采用该体积比时，乙酸乙酯更容易对上层液体和下层液体中的黄豆黄素进行完全提取，避免黄豆黄素的浪费。再进一步的，还包括将乙酸乙酯的提取液蒸干后，向干渣中加入乙酸乙酯复溶的步骤。再进一步的，将复溶后的乙酸乙酯溶液离心分离，得到净化后的上清液，离心分离的转速为5500-6500r/min，时间为10-15min。再进一步的，将上清液旋干后得到黄豆黄素。进一步的，向黄色液体中加入NaOH后，反应的温度为20-35℃，反应的时间为0.5-1.5h。进一步的，每100ml黄色液体中加入的NaOH的质量为0.2-0.4g。本专利技术的有益技术效果为：脱脂豆粕经过碱提将大豆纤维等和蛋白的分离，也促使蛋白和大豆异黄酮分离，蛋白又经酸沉和溶液中的黄酮分离，碱提和酸沉排放液混合成pH接近5-6.5的豆浆水，豆浆水中含大量的黄豆黄素，是制备黄豆黄素的优质原料。该方法可以选择性提取黄豆黄素，制备的黄豆黄素具有较高的纯度，可以作为标准品使用。以豆浆水制备黄豆黄素标准品比以豆粕等为原料制备黄豆黄素标准品的工艺简单，药品用量少，而且药品也是低价格常用品，所用的乙酸乙酯可与水分层，通过简单的薄膜蒸发装置即可纯化，并反复循环使用。本专利技术的工艺方法简单，省略了冷冻沉降、加温提取、酸化提取、正己烷纯化的步骤，在仅使用乙酸乙酯单一溶剂的条件下，保持了较高的提取效率和产品纯度，为黄豆黄素的大批量生产奠定了基础，降低了成本。附图说明构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本申请的进一步理解，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。图1为黄豆黄苷、染料木苷和大豆苷的薄层分离3D扫描图；图2为实施例1制备得到的产品的薄层展开扫描峰图。图3为黄豆黄素标准品溶液的薄层展开扫描峰图。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。实施例1取2L碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的豆浆水，自然放置沉降4h，可得下层黄色液体500mL，向该液体中加1gNaOH，磁力搅拌0.5h，静置分两层，上层450mL，下层50mL(有沉淀)，将二层分离，依次分别向上下各层加入乙酸乙酯250mL和50mL，各自磁力搅拌0.5h提取，静止分两层后并各自取上层乙酸乙酯层分别得300mL和50mL。将两者分别旋蒸干得干渣。向干渣中分别加乙酸乙酯50mL和10mL。涡旋使其尽可能溶解完全。6000r/min离心10min，分别取上清各自旋蒸干，经检测上层为单一成分黄豆黄素15.39mg，下层也为单一成分黄豆黄素0.296mg，黄豆黄素的纯度为98％。实施例2取2L碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的豆浆水，自然放置沉淀5h，可得下层黄色液体500mL，向该液体中加入1.5gNaOH，磁力搅本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黄豆黄素纯品的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：将豆浆水经过静置沉降、加碱处理、乙酸乙酯选择性萃取，制得；加碱处理中，加入的碱为NaOH；所述豆浆水为碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的乳清。

【技术特征摘要】
1.一种黄豆黄素纯品的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：将豆浆水经过静置沉降、加碱处理、乙酸乙酯选择性萃取，制得；加碱处理中，加入的碱为NaOH；所述豆浆水为碱提酸沉工艺生产大豆蛋白过程中排放的乳清。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述方法的具体步骤为：豆浆水自然沉降后，取下层黄色液体；向黄色液体中加入NaOH，搅拌反应设定时间后，静置；除去沉淀后，向液体中加入乙酸乙酯提取，将提取液蒸干，得到黄豆黄素。3.根据权利要求2所述的黄豆黄素纯品的制备方法，其特征在于：所述自然沉降的时间为4-6h，温度为20-35℃。4.根据权利要求2所述的黄豆黄素纯品的制备方法，其特征在于：反应完成后，液体分为两层，分别取两层液体，并向两层液体中分别加入乙酸乙酯进行提取。5.根据权利要求4所述的黄豆黄素纯品的制备方法，其特征在于：上层液体与加...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘代成，尹成文，
申请(专利权)人：山东师范大学，
类型：发明
国别省市：山东,37