抗CEACAM6抗体及其使用方法技术

本发明专利技术涉及结合CEACAM6的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其包含(i)重链可变结构域，其包含具有氨基酸序列GNTFTSYVMH的VHCDR1；和具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG的VHCDR2；和具有氨基酸序列STARATPYFYAMDY的VHCDR3和(ii)轻链可变结构域，其包含具有氨基酸序列KSS样品QSLLWSVNQNSYLS的VLCDR1、具有氨基酸序列GASIRES的VLCDR2和具有氨基酸序列QHNHGSFLPYT的VLCDR3。本发明专利技术还涉及包含抗原结合蛋白或其抗原结合片段的组合物、使用抗原结合蛋白或其抗原结合片段用于癌症的治疗、预防或检测的方法和包含抗原结合蛋白或其抗原结合片段的试剂盒。

Anti-CEACAM6 antibody and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CEACAM6抗体及其使用方法相关申请案的交叉引用本申请要求于2016年10月10日提交的新加坡申请号10201608481W的优先权，其内容通过引用整体并入本文用于所有目的。
本专利技术总体上涉及抗体。具体地，本专利技术涉及抗CEACAM6单克隆抗体及其用途。
技术介绍
癌胚抗原相关细胞粘附分子6(CEACAM6)属于癌胚抗原(CEA)家族。CEACAM6是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的细胞表面糖蛋白，已经观察到其在多种癌症(包括乳腺癌、胰腺癌、结肠癌和非小细胞肺癌)中过表达。作为肿瘤中的癌基因，CEACAM6促进癌症侵袭、转移、失巢凋亡抵抗和化学抵抗，并抑制分化。迄今为止，数量非常有限的抗CEACAM6单克隆抗体可用于抗体疗法或用作癌症治疗的抗体-药物缀合物。因此需要开发针对CEACAM6的新抗体，其可用于抗体疗法或用作癌症治疗的抗体-药物缀合物。
技术实现思路
在一个方面，提供了抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其包含(i)重链可变结构域，其包含具有氨基酸序列GNTFTSYVMH(SEQIDNO：3)的VHCDR1；具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG(SEQIDNO：4)的VHCDR2和具有氨基酸序列STARATPYFYAMDY(SEQIDNO：5)的VHCDR3；(ii)轻链可变结构域，其包含具有氨基酸序列KSSQSLLWSVNQNSYLS(SEQIDNO：6)的VLCDR1、具有氨基酸序列GASIRES(SEQIDNO：7)的VLCDR2和具有该氨基酸序列QHNHGSFLPYT(SEQIDNO：8)的VLCDR3。另一方面，提供了组合物，其包含生理学上可接受的载体和本文所公开的治疗有效量的抗原结合蛋白或其抗原结合片段。另一方面，提供了如本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段或本文所公开的组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途。另一方面，提供了如本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段或如本文所公开的组合物用于治疗或预防癌症。另一方面，提供了治疗或预防癌症的方法，包括施用本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段或本文所公开的组合物至有需要的受试者。另一方面，提供了用于检测受试者中的癌症的方法，该方法包括：使得从受试者获得的样品与本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段体外接触；检测样品中抗原结合蛋白或其抗原结合片段的结合；将该结合与对照样品中的结合水平相关联以确定样品中的结合水平，其中相对于对照样品，样品中结合水平增加指示癌症。另一方面，提供了鉴定易患癌症的受试者的方法，该方法包括：使得从受试者获得的样品与本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段体外接触；检测样品中抗原结合蛋白或其抗原结合片段的结合；将该结合与对照样品中的结合水平相关联以确定样品中的结合水平，其中相对于对照样品，样品中结合水平增加指示癌症。在一个方面，提供了用于本文所公开的方法的试剂盒，其包含本文所公开的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，以及使用说明书。定义以下是可以有助于理解本专利技术的描述的一些定义。这些定义旨在作为一般性定义，决不应将本专利技术的范围仅仅限制在这些术语中，它们是为了更好地理解以下描述。如本文所用的术语“抗原结合蛋白”是指抗体、抗体片段和其他蛋白质构建体(例如结构域)，其能够结合CEACAM6。术语“抗体”在本文中以最广泛的含义使用，是指具有免疫球蛋白样结构域的分子，包括单克隆抗体、重组抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、双特异性抗体和异源缀合抗体；嵌合抗原受体(CAR)、单可变结构域、结构域抗体、抗原结合片段、免疫有效片段、单链Fv、双抗体、TandabsTM等(对于替代性“抗体”形式的概述，参见Holliger和Hudson，自然生物技术(NatureBiotechnology)，2005，第23卷，第9期，1126-1136)。短语“单可变结构域”是指抗原结合蛋白可变结构域(例如，VH、VHH、VL)，其独立于不同的可变区或结构域与抗原或表位特异性结合。可以认为“结构域抗体”或“dAb”与能够结合抗原的“单可变结构域”相同。单可变结构域可以是人抗体可变结构域，但也包括来自其他物种的单抗体可变结构域，比如啮齿动物(例如，如WO00/29004中所公开的)、护士鲨和骆驼科动物VHHdAb的单抗体可变结构域。骆驼科动物VHH是免疫球蛋白单可变结构域多肽，其衍生自包括骆驼、美洲驼、羊驼、单峰骆驼和原驼的物种，其产生天然缺乏轻链的重链抗体。这些VHH结构域可以根据本领域可获得的标准技术进行人源化，并且这些结构域被认为是“结构域抗体”。如本文所用，VH包括骆驼科动物VHH结构域。如本文所用，术语“结构域”是指折叠的蛋白质结构，其具有独立于其余蛋白质的三级结构。通常，结构域负责蛋白质的离散功能特性，并且在许多情况下可以被添加、去除或转移至其他蛋白质而不丧失蛋白质和/或结构域的其余部分的功能。“单可变结构域”是折叠的多肽结构域，其包含抗体可变结构域的序列特征。因此，它包括完整的抗体可变结构域和修饰的可变结构域，例如，其中一个或多个环已被不具有抗体可变结构域特征的序列替换，或已被截短或包含N-或C-末端延伸区的抗体可变结构域替换，以及被至少保留全长结构域的结合活性和特异性的可变结构域的折叠片段替换。结构域可独立于不同的可变区或结构域与抗原或表位结合。可以通过在非抗体蛋白质支架如结构域上排列一个或多个CDR来提供抗原结合片段。该结构域可以是结构域抗体，或者可以是为支架衍生结构物，所述支架衍生结构物选自由以下组成的组：CTLA-4、脂质运载蛋白、SpA、亲和体、avimer、GroE1、转铁蛋白、GroES和纤连蛋白/adnectin，其已经过蛋白质工程改造以获得与除天然配体之外的抗原(如CEACAM6)的结合。抗原结合片段或免疫有效片段可包含部分重链或轻链可变序列。片段长度至少为5、6、8或10个氨基酸。或者，片段的长度为至少15、至少20、至少50、至少75或至少100个氨基酸。本说明书中与抗原结合蛋白相关的术语“特异性结合”是指抗原结合蛋白与CEACAM6结合而不与或不显著与其他(例如，无关的)蛋白质结合。然而，该术语不排除抗原结合蛋白也可与密切相关的分子交叉反应的事实。本文所述的抗原结合蛋白可以与CEACAM6结合，其亲和力比与紧密相关的分子结合的亲和力至少高2、5、10、50、100或1000倍。本说明书中使用的术语“中和”是指，在体外或体内，与在没有抗原结合蛋白的情况下的CEACAM6的活性相比，CEACAM6的生物活性在存在本文所述的抗原结合蛋白时降低。中和可能是由于以下的一种或多种原因：阻止CEACAM6与其受体结合、防止CEACAM6激活其受体、下调CEACAM6或其受体或影响效应功能。生物活性的降低或抑制可以是部分或全部的。与在不存在抗原结合蛋白的情况下CEACAM6活性相比，中和抗原结合蛋白可以将CEACAM6的活性中和至少20％、30％、40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、82％、84％、86％、88％、90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％。可以使用本领域技术人员已知的或如本文所述的一种或多种检测来确定或测量中和。例如，可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含(i)重链可变结构域，所述重链可变结构域包含具有氨基酸序列GNTFTSYVMH(SEQ ID NO：3)的VHCDR1；具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG(SEQ ID NO：4)的VHCDR2；和具有氨基酸序列STARATPYFYAMDY(SEQ ID NO：5)的VHCDR3；和(ii)轻链可变结构域，其包含具有氨基酸序列KSSQSLLWSVNQNSYLS(SEQ ID NO：6)的VLCDR1、具有氨基酸序列GASIRES(SEQ ID NO：7)的VLCDR2和具有氨基酸序列QHNHGSFLPYT(SEQ ID NO：8)的VLCDR3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.10 SG 10201608481W1.一种抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含(i)重链可变结构域，所述重链可变结构域包含具有氨基酸序列GNTFTSYVMH(SEQIDNO：3)的VHCDR1；具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG(SEQIDNO：4)的VHCDR2；和具有氨基酸序列STARATPYFYAMDY(SEQIDNO：5)的VHCDR3；和(ii)轻链可变结构域，其包含具有氨基酸序列KSSQSLLWSVNQNSYLS(SEQIDNO：6)的VLCDR1、具有氨基酸序列GASIRES(SEQIDNO：7)的VLCDR2和具有氨基酸序列QHNHGSFLPYT(SEQIDNO：8)的VLCDR3。2.如权利要求1所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含与(i)和(ii)的重链CDR区和轻链CDR区约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％相同的重链CDR区和轻链CDR区。3.如权利要求1所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中重链可变区包含SEQIDNO：1所示的氨基酸序列SGPELVKPGASVKMSCKASGNTFTSYVMHWVKQKPGQGLEWIGYINPYNDGTKYNEKFKGKATLTSDKSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCARSTARATPYFYAMDYWGQGTSVTVSS。4.如权利要求3所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含重链可变区，所述重链可变区包含与SEQIDNO：1所示的氨基酸序列具有约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的氨基酸序列。5.如权利要求1所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中轻链可变区包含SEQIDNO：2所示的氨基酸序列DILMTQSPSSLAVTAGEKVTMRCKSSQSLLWSVNQNSYLSWYQLKQGQPPKLLLYGASIRESWVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVHVEDLAVYYCQHNHGSFLPYTFGGGTKLEIK。6.如权利要求5所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含轻链可变区，所述轻链可变区包含与SEQIDNO：2所示的所述氨基酸序列具有约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的氨基酸序列。7.如权利要求1至6中任一项所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述抗原结合蛋白选自由以下组成的组：单克隆抗体、重组抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、双特异性抗体和异源偶联抗体；嵌合抗原受体(CAR)、单可变结构域、结构域抗体、抗原结合片段、免疫有效片段、单链Fv、单链抗体、缺少铰链区的单价抗体、微抗体、双抗体和TandabsTM。8.如权利要求7所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述结合蛋白是单克隆抗体。9.如权利要求8所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体是GR6A04。10.如权利要求8或9所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体是人源化的。11.如权利要求8或9所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体是嵌合的。12.如权利要求1至11中任一项所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述抗原结合蛋白或其抗原结合片段与CEACAM6结合。13.如权利要求12所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述抗原结合蛋白或其抗原结合片段与CEACAM6上的聚糖结合。14.如权利要求13所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，其中所述抗原结合蛋白或其抗原结合片段与CEACAM6上的N-连接聚糖结合。15.如权利要求1至14中任一项所述的抗原结合蛋白或其抗原结合片段，包含放射性同位素或与其共轭的细胞毒素。16.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁巧尹，徐文华，陈美仪，陈邵文，N·G·耶尔，
申请(专利权)人：新加坡保健服务集团有限公司，新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG