抗STEAP2抗体、抗体药物偶联物和结合STEAP2和CD3的双特异性抗原结合分子以及其用途制造技术

被称为前列腺六次跨膜上皮抗原2(STEAP2)的蛋白质在前列腺癌中被高度表达并且与其它前列腺癌相关基因的表达相关。本发明专利技术提供了结合到人STEAP2的新型全长人IgG抗体(单特异性抗体)。本发明专利技术还提供了结合到STEAP2和CD3二者并在STEAP2表达肿瘤的存在下通过CD3复合物活化T细胞的新型双特异性抗体(bsAb)。根据某些实施例，本发明专利技术提供了双特异性抗原结合分子，其包括特异性结合人和猴CD3的第一抗原结合域以及特异性结合人STEAP2的第二抗原结合分子。在某些实施例中，本发明专利技术的双特异性抗原结合分子能够抑制表达STEAP2的肿瘤的生长。本发明专利技术的双特异性抗原结合分子适用于治疗上调的或诱导的STEAP2靶向免疫应答是期望的和/或在治疗上是有益的前列腺疾病和病状。例如，本发明专利技术的双特异性抗体可用于治疗包含去势抵抗性前列腺癌的前列腺癌。本发明专利技术还包含抑制体内肿瘤生长的抗STEAP2抗体药物偶联物。

Anti-STEAP2 Antibody, Antibody Drug Coupling and Bispecific Antigen Binding Molecules Binding to STEAP2 and CD3 and Their Applications

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗STEAP2抗体、抗体药物偶联物和结合STEAP2和CD3的双特异性抗原结合分子以及其用途对序列表的引用本申请通过引用并入于2017年9月22日创建的并含有739964个字节序列的以计算机可读形式列表提交的文件10296WO01-Sequence.txt。
本专利技术涉及特异于前列腺2(STEAP2)的六跨膜上皮抗原的抗体及其抗原结合片段以及其使用方法。本专利技术还涉及结合STEAP2和CD3的双特异性抗原结合分子，及其使用方法。专利技术进一步涉及抗体-药物偶联物，其包括抗STEAP2抗体或其片段以及治疗剂(例如，细胞毒性剂)。
技术介绍
前列腺2的六跨膜上皮抗原(STEAP2)，也称为STEAP-2、金属还原酶STEAP2、前列腺癌相关蛋白1、转移性前列腺癌中上调的蛋白、前列腺1的六跨膜蛋白(STAMP1)和098P4B6，其是一种完整的六跨膜跨膜蛋白，其在正常和恶性前列腺细胞中上调。作为高尔基复合体与质膜之间的穿梭物的STEAP2是一种金属还原酶，其还原铁和铜，促进其进入细胞。STEAP2主要定位于前列腺的上皮细胞。STEAP2也在正常心脏、脑、胰腺、卵巢、骨骼肌、乳腺、睾丸、子宫、肾、肺、气管、结肠和肝脏中表达。STEAP2在以下癌组织中过表达，包含前列腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、肺癌、结肠癌、肾癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、子宫癌和卵巢癌(Gomes,I.M.等人，2012，《分子癌症研究(Mol.CancerRes.)》，10:573-587；Challita-Eid-P.M.等人，2003，WO03/087306；Emtage，P.C.R.，2005，WO2005/079490)。CD3是与T细胞受体复合物(TCR)结合的在T细胞上表达的同型二聚体或异二聚体抗原，并且是T细胞活化所需要的。功能性CD3由以下四种不同链中的两种的二聚缔合形成：ε、ζ、δ和γ。CD3二聚体排列包含γ/ε、δ/ε和ζ/ζ。已显示针对CD3的抗体在T细胞上聚集CD3，从而以类似于通过肽负载的MHC分子参与TCR的方式引起T细胞活化。因此，已提出抗CD3抗体用于涉及T细胞活化的治疗目的。此外，已提出能够结合CD3和靶抗原的双特异性抗体用于涉及靶向对表达靶抗原的组织和细胞的T细胞免疫应答的治疗用途。包含抗体-药物偶联物的靶向STEAP2的抗原结合分子以及结合STEAP2和CD3的双特异性抗原结合分子将在治疗环境中有用，在所述环境中期望表达STEAP2的细胞的特异性靶向和T细胞介导的杀死。
技术实现思路
在第一方面，本专利技术提供了结合到人STEAP2的抗体及其抗原结合片段。根据本专利技术的此方面的抗体尤其可用于靶向表达STEAP2的细胞。本专利技术还提供了结合人STEAP2和人CD3的双特异性抗体及其抗原结合片段。根据本专利技术的此方面的双特异性抗体尤其可用于靶向表达CD3的T细胞，并用于刺激T细胞活化，例如，在对表达STEAP2的细胞的T细胞介导的杀死有益或费和符合期望的情况下。例如，双特异性抗体可以将CD3介导的T细胞活化引导到如前列腺肿瘤细胞等特定的STEAP2表达细胞。本专利技术的示例性抗STEAP2抗体列于本文的表1和表2中。表1列出了重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)的氨基酸序列标识符，以及示例性抗STEAP2抗体的重链互补决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和轻链互补决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。表2列出了编码示例性抗STEAP2抗体的HCVR、LCVR、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的核酸分子的序列标识符。本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包括HCVR，所述HCVR包括选自表1中所列出的任何HCVR氨基酸序列的氨基酸序列或其与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括LCVR，所述LCVR包括选自表1中所列出的任何LCVR氨基酸序列的氨基酸序列或其与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供了抗体或其抗原结合片段，其包括HCVR和LCVR氨基酸序列对(HCVR/LCVR)，所述序列对包括与表1中所列出的任何LCVR氨基酸序列配对的表1中所列出的任何HCVR氨基酸序列。根据某些实施例，本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包括表1中所列出的任何示例性抗STEAP2抗体内含有的HCVR/LCVR氨基酸序列对。在某些实施例中，HCVR/LCVR氨基酸序列对选自由SEQIDNO:250/258组成的组(例如，H2M11162N)。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括重链CDR1(HCDR1)，所述重链CDR1包括选自表1中所列出的任何HCDR1氨基酸序列的氨基酸序列或其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括重链CDR2(HCDR2)，所述重链CDR2包括选自表1中所列出的任何HCDR2氨基酸序列的氨基酸序列或其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括重链CDR3(HCDR3)，所述重链CDR3包括选自表1中所列出的任何HCDR3氨基酸序列的氨基酸序列或其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括轻链CDR1(LCDR1)，所述轻链CDR1包括选自表1中所列出的任何LCDR1氨基酸序列或至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括轻链CDR2(LCDR2)，所述轻链CDR2包括选自表1中所列出的任何LCDR2氨基酸序列的氨基酸序列或其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供抗体或其抗原结合片段，其包括轻链CDR3(LCDR3)，所述轻链CDR3包括选自表1中所列出的任何LCDR3氨基酸序列的氨基酸序列或其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的基本相似的序列。本专利技术还提供了抗体或其抗原结合片段，其包括HCDR3和LCDR3氨基酸序列对(HCDR3/LCDR3)，所述序列对包括与表1中所列出的任何LCDR3氨基酸序列配对的表1中所列出的任何HCDR3氨基酸序列。根据某些实施例，本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包括表1中所列出的任何示例性抗STEAP2抗体内含有的HCDR3/LCDR3氨基酸序列对。在某些实施例中，HCDR3/LCDR3氨基酸序列对选自由SEQIDNO:256/264组成的组(例如，H2M11162N)。本专利技术还提供了抗体或其抗原结合片段，其包括表1中所列出的任何示例性抗STEAP2抗体中含有的一组六个CDR(即，HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)。在某些实施例中，HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3氨基酸序列组选自由SEQIDNO:252-254-256-260-262本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体‑药物偶联物(ADC)，其包括抗STEAP2抗体或其抗原结合片段以及细胞毒性剂，其中所述抗体或抗原结合片段以及所述细胞毒性剂通过连接子共价连接。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.23 US 62/399,2561.一种抗体-药物偶联物(ADC)，其包括抗STEAP2抗体或其抗原结合片段以及细胞毒性剂，其中所述抗体或抗原结合片段以及所述细胞毒性剂通过连接子共价连接。2.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其以小于约50nM的EC50结合人前列腺六次跨膜上皮抗原2(STEAP2)表达细胞，如通过本文所述的体外FACS结合测定测量。3.根据权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其被人STEAP2表达细胞内化。4.根据权利要求3所述的分离的抗体，其中所述抗体是完全人的。5.根据权利要求2到4中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与包括如表1中所列出的HCVR/LCVR氨基酸序列对的参考抗体竞争结合到人STEAP2。6.根据权利要求5所述的抗体或抗原结合片段，其中所述参考抗体包括选自由以下组成的组的HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO:2/10；18/26；34/42；50/58；66/58；74/58；82/58；90/58；98/58；106/114；122/130；138/146；154/162；170/178；186/194；202/210；218/226；234/242；250/258；266/274；282/290；298/306；314/322；330/338；346/354；362/370；以及378/386。7.根据权利要求2到6中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与包括如表1中所列出的HCVR/LCVR氨基酸序列对的参考抗体结合到人STEAP2上的同一抗原决定基。8.根据权利要求7所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与参考抗体结合到人STEAP2上的同一抗原决定基，所述参考抗体包括选自由以下组成的组的HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO:2/10；18/26；34/42；50/58；66/58；74/58；82/58；90/58；98/58；106/114；122/130；138/146；154/162；170/178；186/194；202/210；218/226；234/242；250/258；266/274；282/290；298/306；314/322；330/338；346/354；362/370；以及378/386。9.一种结合人STEAP2的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括：(a)具有如表1中所列出的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)的互补决定区(CDR)；以及(b)具有如表1中所列出的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)的CDR。10.根据权利要求9所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括选自由以下组成的组的HCVR/LCVR氨基酸序列对的重链CDR和轻链CDR：SEQIDNO:2/10；18/26；34/42；50/58；66/58；74/58；82/58；90/58；98/58；106/114；122/130；138/146；154/162；170/178；186/194；202/210；218/226；234/242；250/258；266/274；282/290；298/306；314/322；330/338；346/354；362/370；以及378/386。11.根据权利要求10所述的分离的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段分别包括选自由以下组成的组的HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3结构域：SEQIDNO:4-6-8-12-14-16；20-22-24-28-30-32；36-38-40-44-46-48；52-54-56-60-62-64；68-70-72-60-62-64；76-78-80-60-62-64；84-86-88-60-62-64；92-94-96-60-62-64；100-102-104-60-62-64；108-110-112-116-118-120；124-126-128-132-134-136；140-142-144-148-150-152；156-158-160-164-166-168；172-174-176-180-182-184；188-190-192-196-198-200；204-206-208-212-214-216；220-222-224-228-230-232；236-238-240-244-246-248；252-254-256-260-262-264；268-270-272-276-278-280；284-286-288-292-294-296；300-302-304-308-310-312；316-318-320-324-326-328；332-334-336-340-342-344；348-350-352-356-358-360；364-366-368-372-374-376；以及380-382-384-388-390-392。。12.一种结合人STEAP2的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括：(a)具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)：SEQIDNO:2、18、34、50、66、74、82、90、98、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362以及378；以及(b)具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)：SEQIDNO:10；26；42；58；114；130；146；162；178；194；210；226；242；258；274；290；306；322；338；354；370；以及386。13.根据权利要求12所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包括选自由以下组成的组的HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO:2/10；18/26；34/42；50/58；66/58；74/58；82/58；90/58；98/58；106/114；122/130；138/146；154/162；170/178；186/194；202/210；218/226；234/242；250/258；266/274；282/290；298/306；314/322；330/338；346/354；362/370；以及378/386。14.根据权利要求1所述的ADC，其中所述抗STEAP2抗体或抗原结合片段是根据权利要求2到13中任一项所述的抗体或抗原结合片段。15.根据权利要求1或14所述的ADC，其中所述细胞毒性剂选自奥瑞斯他汀(auristatin)、美登木素生物碱(maytansinoid)、妥布赖森(tubulysin)、茅屋霉素(tomaymycin)衍生物或多拉司他汀(dolastatin)衍生物。16.根据权利要求1或14所述的ADC，其中所述细胞毒性剂是选自MMAE或MMAF的奥瑞斯他汀或选自DM1或DM4的美登木素生物碱。17.根据权利要求1或14所述的ADC，其中所述细胞毒性剂是具有式(I)或式(II)的结构的美登木素生物碱。18.根据权利要求17所述的ADC，其中所述美登木素生物碱是：19.根据权利要求17所述的ADC，其中所述美登木素生物碱是：20.根据权利要求1或14所述的ADC，其包括抗STEAP2抗体或其片段，并且其中是结合到所述抗STEAP2抗体或其片段的键。21.根据权利要求1或14所述的ADC，其包括抗STEAP2抗体或其片段，并且其中是结合到所述抗STEAP2抗体或其片段的键。22.根据权利要求1或14所述的ADC，其包括抗STEAP2抗体或其片段，并且其中是结合到所述抗STEAP2抗体或其片段的键。23.根据权利要求20到22中任一项所述的ADC，其中键通过半胱氨酸残基的硫组分与所述抗体或其片段接触。24.根据权利要求1或14所述的ADC，其包括抗STEAP2抗体或其片段，以及其混合物，其中是结合到所述抗STEAP2抗体或其片段的键。25.根据权利要求24所述的ADC，其中所述键通过赖氨酸残基的氮组分与所述抗体或其片段接触。26.根据权利要求1或14到25中任一项所述的ADC，其中所述ADC包括每抗STEAP2抗体或其片段1到4种细胞毒性剂。27.一种药物组合物，其包括根据权利要求1或14到26中任一项所述的抗体-药物偶联物以及药学上可接受的载剂或稀释剂。28.一种双特异性抗原结合分子，其包括结合人CD3的第一抗原结合域和结合人STEAP2的第二抗原结合域，其中所述第二抗原结合域衍生自根据权利要求2到13中任一项所述的抗体或抗原结合片段。29.一种双特异性抗原结合分子，其包括特异性结合人CD3的第一抗原结合域和特异性结合人STEAP2的第二抗原结合域。30.根据权利要求28或权利要求29所述的双特异性抗原结合分子，其中所述第一抗原结合域结合表达人CD3的人细胞和表达食蟹猴CD3的食蟹猴细胞。31.根据权利要求28或权利要求29所述的双特异性抗原结合分子，其中所述第二抗原结合域结合表达人STEAP2的人细胞。32.根据权利要求28到31中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中所述第一抗原结合域和所述第二抗原结合域中的每一个是完全人的。33.根据权利要求28或权利要求29所述的双特异性抗原结合分子，其中所述抗原结合分子结合人CD3和人STEAP2二者并诱导对STEAP2表达细胞的T细胞介导的细胞杀死。34.根据权利要求28或权利要求29所述的双特异性抗原结合分子，其中所述抗原结合分子抑制在携带人前列腺癌异种移植物的免疫受损小鼠中的肿瘤生长。35.根据权利要求28到34中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其是双特异性抗体或其双特异性抗原结合片段。36.根据权利要求28到35中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中特异性结合人STEAP2的所述第二抗原结合域包括来自重链可变区(HCVR)的重链互补决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述重链可变区选自由以下组成的组：SEQIDNO:2、18、34、50、66、74、82、90、98、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362以及378；以及来自轻链可变区(LCVR)的轻链互补决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述轻链可变区包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQIDNO:10；26；42；58；114；130；146；162；178；194；210；226；242；258；274；290；306；322；338；354；370；以及386。37.根据权利要求28到35中任一项所述的双特异性抗原结合分子，其中特异性结合人STEAP2的所述第二抗原结合域包括三个重链互补决定区(A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3)和三个轻链互补决定区(A2-LCDR1、A2-LCDR2和A2-LCDR3)，其中A2-HCDR1包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：S...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·拉奇，F·德尔菲诺，L·哈伯，E·史密斯，J·R·基尔什内尔，A·克劳福德，T·尼托利，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US