高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法技术

本发明专利技术属于藻培养技术领域，公开了高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法，其包括如下步骤：将培养至对数生长期的球等鞭金藻接种到含有培养基的培养容器中，培养9‑12d，收集藻液；将藻液置于碟片离心机中离心,收集沉淀，然后置于‑20℃的低温条件下，冷冻处理30‑60min，然后置于50‑60℃的真空干燥箱中，干燥至恒重，收集干燥后的藻体，最后置于万能粉碎机进行粉碎，过200目筛，收集筛下物，即得。本发明专利技术通过高密度培养获得球等鞭金藻，然后通过冷冻、干燥以及粉碎等步骤，制备了藻粉，工艺简单可行，脱水彻底，可作为水产养殖中的饲料添加剂。

Preparation of Algae Powder from Isoflagella sphaeroides by High Density Culture

【技术实现步骤摘要】
高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法
本专利技术属于藻类培养
，具体涉及高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法。
技术介绍
球等鞭金藻是单细胞生活的个体，细胞裸露，形状多变，但大多数呈椭圆形，幼细胞有一略扁平的背腹面，故侧面观为长椭圆形或长方形。细胞前端生出两条等长的尾鞭型鞭毛，鞭毛平滑无附着物和膨胀体，其长度为细胞的1-2倍。鞭毛基部有液泡。细胞内具有2个大而伸长的侧生色素体，其形状和位置往往随体形而改变。一个暗红色、卵圆形的眼点位于细胞中央，偶有靠近细胞前端。细胞核一个，通常位于细胞中间。贮藏物是油滴和白糖素，小油滴分布在细胞质中，白糖素位于细胞后端，一般为2-5个小块。一般活动细胞长4.4-7.1微米，宽2.7-4.4微米，厚2.4-3微米。球等鞭金藻主要进行无性二分裂繁殖。球等鞭金藻由于个体小，无细胞壁，易消化，富含多糖，胡萝卜素及高能量的脂类物质，是世界各地水产养殖中重要的饵料微藻，广泛用于饲喂贻贝、牡蛎、泥蚶等，被认为是海产双壳类动物幼虫的理想饵料。球等鞭金藻含有较多的蛋白质、多种维生素、色素、微量元素和生长素等，还含有多种具有生物活性物质，用作饲料产品，具有其它高蛋白质饲料无法比拟的特殊价值。与小球藻(Chlorellavulgaris)和螺旋藻(Spirulinaplatensis)相比，球等鞭缺乏独特性的培养条件和强的抗污染能力，加之生长速度和培养密度也相对低，目前国内外对球等鞭金藻尚未有大规模工业化生产。微藻高密度培养是微藻产业化开发的前提，同时也是节约后续生产成本的重要手段。微藻的营养方式一般主要以二氧化碳为碳源进行光合自养，充足的二氧化碳供应是保障微藻快速生长的必要条件。在现有技术的基础上，申请人对球等鞭金藻培养基进行了改进，提高了球等鞭金藻的生长速率，该成果已经申报专利技术专利“用于培养球等鞭金藻的培养基”，该培养基包括以下组分：KNO3100-120mg/L，植酸15-20mg/L，KH2PO410-12mg/L，肌醇10-12mg/L，Co(NH2)26-8mg/L，柠檬酸铁铵3-4mg/L，Na2EDTA10-12mg/L，氯化镝0.4-0.6mg/L，胺鲜酯1-2mg/L，乙烯利0.4-0.6mg/L，维生素B60.05-0.1mg/L，维生素120.04-0.06mg/L，维生素10.006-0.008mg/L，ZnSO4·7H2O20-25μg/L，MnCl2·4H2O150-200μg/L，CuSO4·5H2O8-12μg/L，Na2MoO4·2H2O7-8μg/L，CoCl2·6H2O10-15μg/L。在上述研究的基础上，申请人继续对球等鞭金藻进行收集，并且制备了藻粉，用作水产养殖。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法。本专利技术是通过如下技术方案来实现的：高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）将培养至对数生长期的球等鞭金藻接种到含有培养基的培养容器中，光照强度3000-5000lux，24℃培养，光暗比为18:6，培养9-12d，收集藻液；步骤2）将藻液置于碟片离心机中离心,收集沉淀，然后置于-20℃的低温条件下，冷冻处理30-60min，然后置于50-60℃的真空干燥箱中，干燥至恒重，收集干燥后的藻体，最后置于万能粉碎机进行粉碎，过200目筛，收集筛下物，即得。优选地，所述碟片离心机的离心速度为4000-5000rpm，离心时间为5-10min。优选地，所述球等鞭金藻的接种初始密度为20-30万个/ml。进一步地，所述培养基包括以下组分：植酸、肌醇、乙烯利和维生素B6。进一步地，所述培养基包括以下组分：植酸15-20mg/L、肌醇10-12mg/L、乙烯利0.4-0.6mg/L和维生素B60.05-0.1mg/L。进一步地，所述培养基包括以下组分：KNO3100-120mg/L，植酸15-20mg/L，KH2PO410-12mg/L，肌醇10-12mg/L，Co(NH2)26-8mg/L，柠檬酸铁铵3-4mg/L，Na2EDTA10-12mg/L，氯化镝0.4-0.6mg/L，胺鲜酯1-2mg/L，乙烯利0.4-0.6mg/L，维生素B60.05-0.1mg/L，维生素120.04-0.06mg/L，维生素10.006-0.008mg/L，ZnSO4·7H2O20-25μg/L，MnCl2·4H2O150-200μg/L，CuSO4·5H2O8-12μg/L，Na2MoO4·2H2O7-8μg/L，CoCl2·6H2O10-15μg/L。进一步地，所述培养基包括以下组分：KNO3100mg/L，植酸20mg/L，KH2PO412mg/L，肌醇10mg/L，Co(NH2)26mg/L，柠檬酸铁铵3.5mg/L，Na2EDTA12mg/L，氯化镝0.5mg/L，胺鲜酯1mg/L，乙烯利0.5mg/L，维生素B60.1mg/L，维生素120.05mg/L，维生素10.006mg/L，ZnSO4·7H2O23μg/L，MnCl2·4H2O178μg/L，CuSO4·5H2O10μg/L，Na2MoO4·2H2O7.3μg/L，CoCl2·6H2O12μg/L。按照上述任其一所述的方法制备的球等鞭金藻藻粉。优选地，所述藻粉在水产养殖中的应用。与现有技术相比，本专利技术取得的有益效果主要包括但是并不限于几个方面：为了提高球等鞭金藻的生长速率，本专利技术在现有的在专利培养基的基础上进行改进。生长抑制物的胁迫使球等鞭金藻细胞体内积累了过量的活性氧，通过添加一定浓度的植酸，可作为抗氧化剂，通过清除藻细胞体内积累的活性氧，减轻了膜脂过氧化伤害，从而抵制了生长抑制物对球等鞭金藻细胞的抑制效应；植酸还具备一定的螯合能力，能够在球等鞭金藻养殖过程中作为重金属解毒剂和络合剂。肌醇有助于活性物质的发挥，提高维生素B1的效果，促进球等鞭金藻生长，提高二氧化碳固定反应能力。乙烯利能够促进球等鞭金藻细胞分裂，避免球等鞭金藻处于休眠状态。通过添加一定浓度的维生素B6作为生物催化剂，能够参与细胞蛋白、糖类的代谢，促进球等鞭金藻增殖。本专利技术通过高密度培养获得球等鞭金藻，然后通过冷冻、干燥以及粉碎等步骤，制备了藻粉，工艺简单可行，脱水彻底，水分含量控制在5％以内；可作为水产养殖中的饲料添加剂。附图说明图1：不同培养基对球等鞭金藻生长速率的影响。具体实施方式本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的产品及方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的产品及方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。为了进一步理解本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法，将培养至对数生长期的球等鞭金藻（以球等鞭金藻8071品种为例）接种到含有培养基的培养容器中，接种初始密度为30万个/ml，光照强度4000lux，24℃培养，光暗比为18:6，通气速率为0.2vvm，培养10d，收集藻液；将藻液置于碟片离心机中以4000r/min离心10本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）将培养至对数生长期的球等鞭金藻接种到含有培养基的培养容器中，光照强度3000‑5000lux，24℃培养，光暗比为18:6，培养9‑12d，收集藻液；步骤2）将藻液置于碟片离心机中离心，收集沉淀，然后置于‑20℃的低温条件下，冷冻处理30‑60min，再置于50‑60℃的真空干燥箱中，干燥至恒重，收集干燥后的藻体，最后置于万能粉碎机进行粉碎，过200目筛，收集筛下物，即得。

【技术特征摘要】
1.高密度培养球等鞭金藻制备藻粉的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）将培养至对数生长期的球等鞭金藻接种到含有培养基的培养容器中，光照强度3000-5000lux，24℃培养，光暗比为18:6，培养9-12d，收集藻液；步骤2）将藻液置于碟片离心机中离心，收集沉淀，然后置于-20℃的低温条件下，冷冻处理30-60min，再置于50-60℃的真空干燥箱中，干燥至恒重，收集干燥后的藻体，最后置于万能粉碎机进行粉碎，过200目筛，收集筛下物，即得。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碟片离心机的离心速度为4000-5000rpm，离心时间为5-10min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述球等鞭金藻的接种初始密度为20-30万个/ml。4.根据权利要求1-3任其一所述的方法，其特征在于，所述培养基包括以下组分：植酸、肌醇、乙烯利和维生素B6。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述培养基包括以下组分：植酸15-20mg/L、肌醇10-12mg/L、乙烯利0.4-0.6mg/L和维生素B60.05-0.1mg/L。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述培养基包括以下组分：KNO3100-120mg/L，植酸15-20mg/L，KH2PO410-12mg/L，肌醇10-12mg/L，Co(...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪敏军，孙柏荣，章建兴，
申请(专利权)人：汪敏军，
类型：发明
国别省市：浙江,33