一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法技术

本发明专利技术涉及农业害虫生物防治领域，旨在提供一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法。包括：选取刚羽化并经充分交配3‑4天后的雌、雄毛角锤角细蜂，或尚在寄主果蝇体内的发育至3龄及以上的毛角锤角细蜂幼虫或蛹；将冷藏处理对象放置在4℃的低温环境中，进行冷藏处理和保存，保存时间小于等于10天。本发明专利技术通过对不同生长发育时期的毛角锤角细蜂进行4℃低温处理，利用低温使其生长发育停滞，从而延缓其羽化，延长保存时间。为毛角锤角细蜂投入实际使用时的保存运输问题提供了解决方案；有利于毛角锤角细蜂大规模生产时的保存运输，为其大规模投入实际使用奠定了基础。对其他作为生物防治材料的蜂种的保存运输具有参考作用。

A Method for Extending the Shelf Life of Parasitic Wasps of Drosophila Pests

【技术实现步骤摘要】
一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法
本专利技术是关于农业害虫生物防治领域，特别涉及一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法。
技术介绍
黑腹果蝇Drosophilamelanogaster食性广泛，生长环境特殊，喜阴暗潮湿的栖息场所，对酸甜和腐败气味具有明显趋性，可为害多种瓜果蔬菜及许多植物的多汁器官，是重要的农业害虫。近年来，果蝇对果蔬的危害不断扩大，目前已蔓延到欧洲、北美洲、南美洲等30多个国家和地区。斑翅果蝇Drosophilasuzukii是一种为害软皮水果的全球性害虫，对果蔬业造成的影响尤为严重，已被美国、日本、澳大利亚、新西兰、英国、德国等多个国家列为重要的检疫性害虫。由于浆果类果实不易清洗，采用传统的化学防治喷施农药后将直接影响果实安全性，从而影响人体健康。且常规的防治方法难以防治，容易破坏生态环境，不利于农业可持续发展，因而生物防治显得尤为重要。毛角锤角细蜂TrichopriadrosophilaePerkins，属膜翅目锤角细蜂科，是果蝇蛹期的主要寄生蜂，寄主范围广。在实验室条件下，其寄生效率高于环腹瘿蜂科Figitida两种主要的果蝇幼虫寄生蜂——布拉迪小环腹瘿蜂Leptopilinaboulardi和异腹小环腹瘿蜂Leptopilinaheterotoma，是较好的生防资源。申请号CN201710749534.8的中国专利提供了一种有效进行人工繁殖毛角锤角细蜂的方法，为批量获得优质的毛角锤角细蜂提供了方法。而如果需要将毛角锤角细蜂作为一种大规模使用的生物防治材料和商品的话，就会涉及到运输和保存等方面的问题。但由于该生物活体羽化后难以在运输和保存中维持其存活条件，导致商品货架期很短。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，克服现有技术中的不足，提供一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法。为解决上述技术问题，本专利技术的解决方案是：提供一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法，是选取生长发育时期的寄生蜂进行冷藏处理，具体包括下述步骤：(1)选取下述任意一种冷藏处理对象：(1.1)刚羽化的雌、雄毛角锤角细蜂，经充分交配3-4天后备用；(1.2)尚在寄主果蝇体内的发育至3龄及以上的毛角锤角细蜂幼虫；(1.3)尚在寄主果蝇体内的，发育至蛹期的毛角锤角细蜂；(2)将冷藏处理对象放置在4℃的低温环境中，进行冷藏处理和保存，保存时间小于等于10天(具体保存时间长短根据实际保存或运输的需要进行调整)。本专利技术中，该方法进一步包括，将经低温保存的冷藏处理对象放置在常温(如25℃)环境中，使冷藏处理对象恢复正常生长发育。本专利技术中，所述冷藏处理对象通过下述方法获得：(a)对毛角锤角细蜂进行人工繁殖，包括收集和扩繁蜂种、寄主果蝇的接种繁殖、毛角锤角细蜂接种、毛角锤角细蜂培养与收集、留种(参考申请号为CN201710749534.8的中国专利)；(b)在接近毛角锤角细蜂的羽化期时，每24h使用一次二氧化碳气体麻醉并去除培养瓶内的果蝇成虫；待毛角锤角细蜂羽化后，每24h使用一次二氧化碳气体将新羽化的成虫麻醉；按2:1的雌雄比例选取新羽化的成虫，放置在温度25±1℃、湿度50％的培养箱中，充分交配3天后备用；或者，选取被毛角锤角细蜂寄生过的果蝇蛹，放置在温度25±1℃、湿度50％的培养箱中8天以上，待毛角锤角细蜂在寄主体内发育成为3龄及以上的幼虫；或者，选取在寄主体内已发育至蛹的毛角锤角细蜂。本专利技术中，当冷藏处理对象选择毛角锤角细蜂的幼虫或蛹时，是将幼虫或蛹连同其寄主果蝇一并进行冷藏处理和保存。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术是通过对不同生长发育时期的毛角锤角细蜂进行4℃低温处理，利用低温使其生长发育停滞，从而延缓其羽化，延长保存时间(即毛角锤角细蜂作为商品的货架期)。2、本专利技术所述方法为毛角锤角细蜂投入实际使用时的保存运输问题提供了解决方案；有利于毛角锤角细蜂大规模生产时的保存运输，为其大规模投入实际使用奠定了基础。3、本专利技术对其他作为生物防治材料的蜂种的保存运输具有参考作用。附图说明图1为本专利技术所述方法的流程图。具体实施方式本专利技术所述延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法，是选取合适生长发育时期的寄生蜂进行冷藏处理，具体包括下述步骤：(1)选取下述任意一种冷藏处理对象：(1.1)刚羽化的雌、雄毛角锤角细蜂，经充分交配3-4天后备用；(1.2)尚在寄主果蝇体内的发育至3龄及以上的毛角锤角细蜂幼虫；(1.3)尚在寄主果蝇体内的，发育至蛹期的毛角锤角细蜂；所述冷藏处理对象通过下述方法获得：(a)对毛角锤角细蜂进行人工繁殖，包括收集和扩繁蜂种、寄主果蝇的接种繁殖、毛角锤角细蜂接种、毛角锤角细蜂培养与收集、留种(参考申请号为CN201710749534.8的中国专利)；(b)在接近毛角锤角细蜂的羽化期时，每24h使用一次二氧化碳气体麻醉并去除培养瓶内的果蝇成虫；待毛角锤角细蜂羽化后，每24h使用一次二氧化碳气体将新羽化的成虫麻醉；按2:1的雌雄比例选取新羽化的成虫，放置在温度25±1℃、湿度50％的培养箱中，充分交配3天后备用；或者，用羽化后3-8天充分交配的雌性毛角锤角细蜂以1:6左右比例寄生8日龄果蝇蛹，24h后取出雌性毛角锤角细蜂以防过寄生。取被毛角锤角细蜂寄生过的果蝇蛹，放置在温度25±1℃、湿度50％的培养箱(购于杭州来泊生物科技有限公司)中8天以上，此时的毛角锤角细蜂大致处于3龄幼虫至羽化前阶段；或者，选取在寄主体内已发育至蛹的毛角锤角细蜂。(2)将冷藏处理对象装入塑料培养瓶中，放置在4℃的低温环境进行冷藏处理和保存。保存时间小于等于10天，具体保存时间长短根据实际保存或运输的需要进行调整)。(3)将经低温保存的冷藏处理对象移至常温环境的培养箱中(温度25±1℃、湿度50％的)，使冷藏处理对象恢复正常生长发育。当冷藏处理对象选择毛角锤角细蜂的幼虫或蛹时，是将幼虫或蛹连同其寄主果蝇一并进行冷藏处理和保存(即，被送入低温环境的是处于寄生状态的幼虫或蛹，而不能是分离出来的单体)。实验数据及分析：与通过本专利技术处理前的正常生长发育的毛角锤角细蜂相比，经本专利技术处理的毛角锤角细蜂尽管羽化时间延后，但在寄生率和产雌率方面并无明显降低。在最长4℃低温处理时长下(成虫10天、幼虫或蛹10天)，得到的毛角锤角细蜂对黑腹果蝇蛹的寄生率和产雌率分别为78.75％±13.09％、61.59％±17.13％、以及85％±7.07％、72.23±7.86％，与不经处理的个体相比无显著性差异。本专利技术处理后的毛角锤角细蜂所产下的子代个体寄生率80.48％±13.11％，与正常生长发育的毛角锤角细蜂相比也无明显差异。因此，经本专利技术所述方法处理后的毛角锤角细蜂在羽化时间延长的同时产雌率、寄生率以及子代寄生率无明显降低，仍能保持在接近正常生长发育个体的较高水平。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法，其特征在于，是选取生长发育时期的寄生蜂进行冷藏处理，具体包括下述步骤：(1)选取下述任意一种冷藏处理对象：(1.1)刚羽化的雌、雄毛角锤角细蜂，经充分交配3‑4天后备用；(1.2)尚在寄主果蝇体内的，发育至3龄及以上的毛角锤角细蜂幼虫；(1.3)尚在寄主果蝇体内的，发育至蛹期的毛角锤角细蜂；(2)将冷藏处理对象放置在4℃的低温环境中，进行冷藏处理和保存，保存时间小于等于10天。

【技术特征摘要】
1.一种延长果蝇类害虫寄生蜂货架期的方法，其特征在于，是选取生长发育时期的寄生蜂进行冷藏处理，具体包括下述步骤：(1)选取下述任意一种冷藏处理对象：(1.1)刚羽化的雌、雄毛角锤角细蜂，经充分交配3-4天后备用；(1.2)尚在寄主果蝇体内的，发育至3龄及以上的毛角锤角细蜂幼虫；(1.3)尚在寄主果蝇体内的，发育至蛹期的毛角锤角细蜂；(2)将冷藏处理对象放置在4℃的低温环境中，进行冷藏处理和保存，保存时间小于等于10天。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括，将经低温保存的冷藏处理对象放置在常温环境中，使冷藏处理对象恢复正常生长发育。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冷藏处理对象通过下述方法获得：(a)对毛角锤角细蜂进行人工繁殖，包括收集和...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄健华，陈佳妮，陈学新，郭育龙，王莹，时敏，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33