环状RNA的应用、试剂盒和药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种环状RNA作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的应用和相应的试剂盒以及药物组合物及其应用。上述环状RNA的CircBase ID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229、hsa_circ_0006208、hsa_circ_0006677、hsa_circ_0004491。用于口腔鳞状细胞癌的诊断和/或预后的试剂盒，包括定量检测上述环状RNA的试剂，本发明专利技术申请公开的环状RNA在口腔鳞状细胞癌患者癌和癌旁正常粘膜组织具有比较明显的表达差异，而目前用于口腔鳞癌的临床辅助诊断技术尚不完善，因此这些环状RNA具有作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的潜能。

Applications, Kits and Pharmaceutical Compositions of Cyclic RNA and Their Applications

【技术实现步骤摘要】
环状RNA的应用、试剂盒和药物组合物及其应用
本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种环状RNA的应用、试剂盒和药物组合物及其应用。
技术介绍
口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一，约占口腔颌面部恶性肿瘤的80％。口腔鳞状细胞癌(即口腔鳞癌)的发病率高，其在全身恶性肿瘤发病率的排名中可以排到第6位。口腔鳞癌的患病率也逐年增长，每年新发病患者人数竟高达600000例，而且患病人群趋于年轻化。毫无疑问，口腔鳞癌对人类健康和生命已经构成了严重威胁。虽然近年关于口腔鳞癌的研究日益增多，口腔鳞癌在临床治疗方面也有了显著的提高，但口腔鳞癌患者的5年生存率却没有明显的改善，近年来一直维持在63％左右，研究人员和一线工作者对于其致病机制尚不完全清楚，临床上也缺乏用于口腔鳞状细胞癌诊治的有效靶点。在人体不同的组织器官中，研究人员发现了一类表达丰富的特殊非编码RNA，即环状RNA(circularRNA，circRNA)。环状RNA的表达量能够高于其线性异构体10倍左右。而且，在不同发育阶段，环状RNA常表现出特异性表达的特征。另一方面，因为环状RNA是封闭式环型结构，没有5′和3′端，所以不易被RNaseR酶降解，相对于线性RNA能更稳定地存在于生物体中。这些特性表明环状RNA可能在维持人体正常功能中起着重要作用。因此，有必要针对口腔鳞癌中的circRNA进行研究，从中筛选出口腔鳞癌的特异性生物靶点以用于口腔鳞癌的早期诊断和预后评估。
技术实现思路
本专利技术所要解决的一个技术问题在于如何提供一种环状RNA作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的应用和相应的试剂盒以及药物组合物及其应用。为解决上述技术问题，本专利技术所采取的技术方案是：环状RNA作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的应用，环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。定量检测环状RNA的试剂在制备口腔鳞状细胞癌的诊断和/或预后的试剂盒中的应用，环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。优选的，定量检测环状RNA的试剂包括扩增环状RNA的引物。进一步优选的，扩增hsa_circ_0093229的引物包括：F：5′-GCCCACTTGTAGAAGGTCCG-3′(SEQIDNo：5)，R：5′-CTGGCAGGGAGGGCTCATTA-3′(SEQIDNo：6)；扩增hsa_circ_0006208的引物包括：F：5′-AGTCAACCTATGGAATCCAATCCC-3′(SEQIDNo：7)，R：5′-GAGTGCCTGAAATGCTGGGT-3′(SEQIDNo：8)；扩增hsa_circ_0006677的引物包括：F：5′-TAGCAGAAGACCTGGAAGAACCA-3′(SEQIDNo：9)，R：5′-TGGACACAGCCATTCTGCTTT-3′(SEQIDNo：10)；扩增hsa_circ_0004491的引物包括：F：5′-GGACCCCGAGGATCAGGAAAA-3′(SEQIDNo：11)，R：5′-GCCTTGACAGACAGACAGCA-3′(SEQIDNo：12)。一种口腔鳞状细胞癌的诊断和/或预后的试剂盒，包括定量检测环状RNA的试剂，环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。优选的，试剂包括扩增上述至少一种环状RNA的引物。进一步优选的，扩增hsa_circ_0093229的引物包括：F：5′-GCCCACTTGTAGAAGGTCCG-3′(SEQIDNo：5)，R：5′-CTGGCAGGGAGGGCTCATTA-3′(SEQIDNo：6)；扩增hsa_circ_0006208的引物包括：F：5′-AGTCAACCTATGGAATCCAATCCC-3′(SEQIDNo：7)，R：5′-GAGTGCCTGAAATGCTGGGT-3′(SEQIDNo：8)；扩增hsa_circ_0006677的引物包括：F：5′-TAGCAGAAGACCTGGAAGAACCA-3′(SEQIDNo：9)，R：5′-TGGACACAGCCATTCTGCTTT-3′(SEQIDNo：10)；扩增hsa_circ_0004491的引物包括：F：5′-GGACCCCGAGGATCAGGAAAA-3′(SEQIDNo：11)，R：5′-GCCTTGACAGACAGACAGCA-3′(SEQIDNo：12)。优选的，还包括RNA提取试剂和反转录反应体系。进一步优选的，RNA提取试剂为TRIzol试剂。优选的，试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。一种药物组合物，包括环状RNA、增加环状RNA的表达量的试剂、增加环状RNA的表达产物的活性的试剂中的至少一种，环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。上述药物组合物在制备用于治疗口腔鳞状细胞癌的药物中的应用。本专利技术的有益效果是：本专利技术申请公开的环状RNA在口腔鳞状细胞癌患者癌和癌旁正常粘膜组织具有比较明显的表达差异，而目前用于口腔鳞癌的临床辅助诊断技术尚不完善，因此这些环状RNA具有作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的潜能。附图说明图1是本专利技术的一个实施例的环状RNA表达谱。横坐标表示在癌旁正常组织中环状RNA表达水平，纵坐标表示癌组织中环状RNA表达水平。图2是本专利技术的一个实施例的环状RNA的差异性表达结果图，图2中的A、B、C、D分别是通过qRT-PCR验证hsa_circ_0093229、hsa_circ_0006208、hsa_circ_0006677和hsa_circ_0004491在40对口腔鳞癌组织中的表达差异，采用配对t检验分析，***P<0.001，表示有统计学意义。图3是本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.环状RNA作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的应用，其特征在于，所述环状RNA的CircBase ID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQ ID No：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQ ID No：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQ ID No：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQ ID No：4所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.环状RNA作为口腔鳞状细胞癌的诊断、治疗、预后靶点的应用，其特征在于，所述环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。2.定量检测环状RNA的试剂在制备口腔鳞状细胞癌的诊断和/或预后的试剂盒中的应用，其特征在于，所述环状RNA的CircBaseID为以下的至少一种：hsa_circ_0093229，具有如SEQIDNo：1所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006208，具有如SEQIDNo：2所示的核苷酸序列；hsa_circ_0006677，具有如SEQIDNo：3所示的核苷酸序列；hsa_circ_0004491，具有如SEQIDNo：4所示的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述定量检测环状RNA的试剂包括扩增所述环状RNA的引物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，扩增所述hsa_circ_0093229的引物包括：F：5′-GCCCACTTGTAGAAGGTCCG-3′(SEQIDNo：5)，R：5′-CTGGCAGGGAGGGCTCATTA-3′(SEQIDNo：6)；扩增所述hsa_circ_0006208的引物包括：F：5′-AGTCAACCTATGGAATCCAATCCC-3′(SEQIDNo：7)，R：5′-GAGTGCCTGAAATGCTGGGT-3′(SEQIDNo：8)；扩增所述hsa_circ_0006677的引物包括：F：5′-TAGCAGAAGACCTGGAAGAACCA-3′(SEQIDNo：9)，R：5′-TGGACACAGCCATTCTGCTTT-3′(SEQIDNo：10)；扩增所述hsa_circ_0004491的引物包括：F：5′-GGACCCCGAGGATCAGGAAAA-3′(SEQIDNo：11)，R：5′-GCCTTGACAGACAGACAGCA-3′(SEQIDNo：12)。5.口腔鳞状细胞癌的诊断和/或预后的试剂盒，其特征在于，包括定量检测环状RNA的试剂，所述环状RNA的CircBaseI...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨宏宇，沈月洪，王宇帆，王锋，李翔，
申请(专利权)人：北京大学深圳医院，
类型：发明
国别省市：广东,44