一种噬菌体、噬菌体表达的解聚酶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种噬菌体、噬菌体表达的解聚酶及其制备方法和应用，所述噬菌体命名为SH‑KP152302，具有降解生物被膜的特性，噬菌体的基因组的第42位开放阅读框编码解聚酶，能够特异性降解肺炎克雷伯菌的胞外荚膜多糖，抑制生物被膜的形成，去除生物膜，并在抵抗生物膜的形成过程中表现出剂量依赖的活性，可以作为一种潜在的抗生素替代品。

A kind of depolymerase expressed by bacteriophage and bacteriophage and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种噬菌体、噬菌体表达的解聚酶及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，涉及一种噬菌体、噬菌体表达的解聚酶及其制备方法和应用，尤其涉及一种肺炎克雷伯菌噬菌体、噬菌体表达的解聚酶及其制备方法和应用。
技术介绍
近年来，抗生素的耐药问题日益严峻，细菌表面的生物被膜使细菌对抗生素的抵御能力提高了10-1000倍，给临床治疗带来巨大挑战。据美国疾病预防与控制中心估计，65％的人类感染与生物被膜细菌感染有关，细菌形成生物被膜的能力决定了细菌的致病性，而生物被膜的形成过程也是重要的感染过程。肺炎克雷伯菌是一种具有重要临床研究价值的机会致病性革兰氏阴性杆菌，正常情况下定植在口、皮肤和肠道等部位，但也可能导致严重的院内和院外感染，例如社区获得性肺炎、肝脓肿、呼吸道感染和脓毒血症等。近年来，抗生素的滥用使得肺炎克雷伯菌成为了重要的医源性感染病原体，克雷伯氏菌菌株分泌的多重耐药性广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶(carbapenemases)日益增加，美国疾病控制中心已将肺炎克雷伯菌列为严重威胁公共健康的因素之一。多糖是肺炎克雷伯菌最重要的致病因子之一，包括在细菌周围形成的包膜多糖(CP本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肺炎克雷伯菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的基因组的第42位开放阅读框编码解聚酶。

【技术特征摘要】
1.一种肺炎克雷伯菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的基因组的第42位开放阅读框编码解聚酶。2.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述肺炎克雷伯菌的wzi分型为K47荚膜型；优选地，所述噬菌体的基因组包括至少28个功能基因。3.一种如权利要求1或2所述的肺炎克雷伯菌噬菌体的分离方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)向污水中加入肺炎克雷伯菌，培养后收集上清液；(2)将上清液点斑于双层琼脂平板上，纯化后得到单一斑块；(3)向单一斑块中加入缓冲液，搅拌后静置，收集液体和上层琼脂；(4)离心取上清，采用PEG-8000富集，氯化铯密度梯度离心1h，得到噬菌体颗粒。4.一种如权利要求1或2所述的噬菌体表达的解聚酶，其特征在于，所述解聚酶的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示；优选地，所述解聚酶的结构域包括T7噬菌体尾丝蛋白、果胶酸裂解酶、含氮氧化酶和右手β螺旋结构域；优选地，所述解聚酶为85kDa。5.编码如权利要求4所述的解聚酶的核酸序列；优选地，所述核酸序列如SEQIDNO:2所示。6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如权利要求5所述的核酸序列。7.一种宿...

【专利技术属性】
技术研发人员：何平，祝先潮，吴运强，刘畅，杜娟，
申请(专利权)人：上海瑞宙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31