【技术实现步骤摘要】
一株重组O型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法
本专利技术涉及一株重组O型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法，属兽用生物制品领域。技术背景布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌或称布鲁氏菌(Brucella)引起的以流产和发热为特征的人兽共患病，严重地威胁着人和多种动物的生命健康。本病不但对动物的繁殖和生产性能具有严重危害，更重要的是，人感染布鲁氏菌后，往往难以治愈，从而造成严重的公共卫生问题。因此在布鲁氏菌流行的国家，消除布病一直是公共卫生计划中最重要的目标之一。目前全世界范围内消除该病的主要方法是扑杀与免疫相结合，对布病发生相对比较严重的中国，由于扑杀的成本高，疫苗预防成为本病主要控制手段。2007—2012年间，本实验室陆续从我国不同省份和地区牛、羊、犬和鹿等动物体内分离到牛种布鲁氏菌41株，羊种布鲁氏菌74株，犬种布鲁氏菌9株。研究过程中，我们初步发现了一株牛种布鲁氏菌分离株，其毒力介于强毒和疫苗毒之间，专利申请人已对其进行了全面的生化检定，并分别用小鼠和豚鼠测定了其毒力。结果发现其毒力介于强毒和弱毒之间，测定为中等毒力布鲁...
【技术保护点】
1.一株重组O型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌疫苗，其特征在于该疫苗免疫动物后能同时实现对布病和O型口蹄疫的双重免疫保护，其生产菌株是一株含有能够高效表达O型口蹄疫病毒VP1基因的的重组粗糙型布鲁氏菌RA343‑VP1‑FMDV‑O株(简称布鲁氏菌RA343‑VP1‑FMDV‑O株)，该菌株是通过将P3启动子与VP1序列进行密码子优化，人工合成基因片段，并构建含有P3‑VP1(FMDV‑O)序列及布鲁氏菌上下游同源臂的蔗糖自杀质粒载体pUC/P3‑VP1+，将鹦鹉热衣原体外膜蛋白VP1基因表达框部分无痕插入到布鲁氏菌基因组中，通过氨苄蔗糖双筛选筛选出阳性克隆，并进行传...
【技术特征摘要】
1.一株重组O型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌疫苗，其特征在于该疫苗免疫动物后能同时实现对布病和O型口蹄疫的双重免疫保护，其生产菌株是一株含有能够高效表达O型口蹄疫病毒VP1基因的的重组粗糙型布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV-O株(简称布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV-O株)，该菌株是通过将P3启动子与VP1序列进行密码子优化，人工合成基因片段，并构建含有P3-VP1(FMDV-O)序列及布鲁氏菌上下游同源臂的蔗糖自杀质粒载体pUC/P3-VP1+，将鹦鹉热衣原体外膜蛋白VP1基因表达框部分无痕插入到布鲁氏菌基因组中，通过氨苄蔗糖双筛选筛选出阳性克隆，并进行传代培养，通过PCR及测序鉴定其稳定性，获得牛种布鲁氏菌(Bovinebrucella)重组粗糙型布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV-O株。并于2019年03月07日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为：CGMCCNo.17333。2.如权利要求1所述的一种重组粗糙型布鲁氏菌疫苗，其特征在于其生产用重组布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV-O株菌区别于其他细菌的特异性是采用一对特异性PCR引物扩增出大小为635bp的特异性片段(序列23)；重组布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋卉，丁家波，朱良全，孙石静，彭小薇，李秋辰，范学政，秦玉明，王芳，许冠龙，冯宇，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，
类型：发明
国别省市：北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。