一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法技术

本发明专利技术涉及疫苗制备技术领域，提供一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法，提供离开机体的癌细胞，利用激光作用于所述癌细胞从而破坏癌细胞的遗传物质获得所需的疫苗。本技术使用的激光制备癌细胞疫苗的技术可以达到精准的破坏癌细胞增殖作用的目的，同时，不破坏癌细胞在机体内引起免疫反应的能力。

A Method of Preparing Cancer Cell Vaccine by Laser

【技术实现步骤摘要】
一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法
本专利技术涉及疫苗制备
，尤其涉及一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法。
技术介绍
随着生物科技的进步，已经有越来越多的途径尝试对癌症细胞的无限增殖过程进行干预。现今最广为使用的包括手术、放射和化学药物等方式。手术切除肿瘤一般需要术前有明确的病理诊断，或术中快速病理切片确定诊断，然后对肿瘤进行整体切除，其中为保证手术效果，可能会将周围的正常组织和区域性淋巴结一起切除，对机体伤害较大。放射主要是利用射线对机体进行照射，通过放射线对癌细胞的作用，破坏癌细胞的正常增殖行为；然而射线对癌细胞和正常组织均具有杀伤作用，对机体有一定损伤。化学药物主要是利用化学药物的细胞毒性来杀灭肿瘤细胞；然而化疗药物存在一定毒副作用，会损伤正常细胞，且肿瘤细胞会逐渐产生耐药性，加大难度。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的缺点，提供一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法。为解决上述技术问题，专利技术采用如下所述的技术方案。一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法，提供离开机体的癌细胞，利用激光作用于所述癌细胞从而破坏癌细胞的遗传物质获得所需的疫苗。优选地，所述的利用激光制备癌细胞疫苗的方法还包括对癌细胞进行传代培养后，并筛选其中增殖能力小的癌细胞。优选地，所述的筛选其中增殖能力小的癌细胞为，将癌细胞接种至小鼠细胞中然后通过观察癌细胞与小鼠细胞的相互作用和小鼠细胞的变化进行筛选。优选地，所述激光的波长为266-1064nm。优选地，所述激光的脉宽为300fs～5000fs、能量为1-100μJ。优选地，所述激光的频率为0.001-1MHz。优选地，所述激光的光斑大小为5～10μm。优选地，所述激光的作用时长为2-20min。本专利技术的有益效果在于：将激光作用于从机体提取出的癌细胞，激光破坏癌细胞遗传物质，在不破坏癌细胞抗原性的前提下，使得癌细胞失去增殖能力，这样制备的疫苗能用于注射到机体内，可以刺激机体T细胞产生更加强大的免疫反应，从而达到免疫的效果。本技术使用的激光制备癌细胞疫苗的技术可以达到精准的破坏癌细胞增殖作用的目的，同时，不破坏癌细胞在机体内引起免疫反应的能力。具体实施方式为使本领域的普通技术人员更加清楚地理解专利技术的目的、技术方案和优点，以下结合实施例对专利技术做进一步的阐述。一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法，提供离开机体的癌细胞，利用激光作用于所述癌细胞从而破坏癌细胞的遗传物质获得所需的疫苗。可以理解，遗传物质即为DNA或RNA。优选地，所述的利用激光制备癌细胞疫苗的方法还包括对癌细胞进行传代培养后，并筛选其中增殖能力小的癌细胞。通过传代培养并筛选，能先行初步获取增殖能力小的癌细胞，降低激光作用的难度。其中，传代培养就是原代培养物长成单层细胞达到一定密度时，营养消耗殆尽，需要分开扩大培养，补充营养，使之继续增殖的过程。培养的基本条件包括细胞必须的营养(如12种必须氨基酸，葡萄糖，维生素，无机盐，血清等)，适宜的胞外条件(如36℃左右的温度，气体环境，PH7.2-7.4)，无污染的实验环境等其他条件下进行培养。将细胞进行传代培养后，细胞的生长方式一般包括贴壁、半贴壁和悬浮生长。对于悬浮生长的细胞，则应该先进行离心操作，再将细胞进行分装后培养。对于半贴壁生长的细胞，应该先进行吹打操作，再进行分装后培养。对于贴壁生长的细胞，则应该先进行消化，再吹打，最后进行分装后培养。优选地，所述的筛选其中增殖能力小的癌细胞为，将癌细胞接种至小鼠细胞中然后通过观察癌细胞与小鼠细胞的相互作用和小鼠细胞的变化进行筛选。优选地，所述激光的波长为2661064nm。优选地，所述激光的脉宽为300fs～5000fs、能量为1-100μJ。优选地，所述激光的频率为0.001-1MHz。优选地，所述激光的光斑大小为5～10μm。优选地，所述激光的作用时长为2-20min。首先是波段的选择，应该根据不同癌细胞对激光的敏感程度和吸收特性选择不同波段的激光。其次是脉宽，不同脉宽对癌细胞的作用效果会有差别，在选择脉宽时，应该选择在脉冲能量范围内可以破坏癌细胞遗传物质而不破坏癌细胞膜蛋白的脉宽。最后是实验过程中的各项工艺参数，例如功率，频率，光斑大小，都可以根据激光与癌细胞作用的具体效果进行调试。从机体提取出的癌细胞是该制备方法的疫苗原料，本方法中可以利用特定激光破坏癌细胞的遗传物质，达到灭活的目的，从而产生疫苗；也可以对癌细胞进行传代培养，通过筛选找到增殖能力小、不对机体产生伤害但是仍然保留有抗原性的癌细胞，进行减毒过程，从而产生疫苗。所使用的激光可以根据实际需求选择不同波段、脉宽等各项参数，在破坏癌细胞遗传物质DNA或RNA的同时，而不破坏癌细胞的表面膜蛋白，从而引起机体的免疫反应。具体来说本方法有以下优点：1、激光制备癌细胞疫苗的方式，其中激光可以精准的破坏癌细胞的遗传物质，但保留其膜蛋白，该过程可控性高且操作简单；2、采用激光技术制备癌细胞疫苗的方式，再注射到机体中产生免疫反应，可以减小传统杀灭癌细胞的方式对机体产生的伤害；3、从机体提取出的癌细胞是该制备方法的疫苗原料，本方法中利用特定激光作用癌细胞，破坏癌细胞的遗传物质，达到灭活的目的，从而产生疫苗；也可以对癌细胞进行传代培养，通过筛选找到增殖能力小、不对机体产生伤害但是仍然保留有抗原性的癌细胞，进行减毒过程，从而产生疫苗；4、激光作用于癌细胞的过程中，所选择的光源可以根据具体癌细胞的敏感程度进行调节，同时，这一过程中，激光作用的相关工艺参数(包括脉宽，波长，能量密度，频率等)只会对癌细胞遗传物质产生杀伤作用，不会对其表面膜蛋白产生破坏，不会影响其刺激机体产生T细胞进行免疫反应。本专利技术目的在于革新现阶段传统杀死癌细胞的方法，以及消除传统方法中各种因素造成的二次伤害和潜在危险。传统杀死癌细胞的方法，包括手术、放射和化学，其中手术过程切除面积大、放射过程损伤周围正常组织、化学药物存在毒副作用，这些都会对周围正常组织产生不同程度的伤害，导致机体在一定程度上被损伤。对于非全身性扩散的肿瘤细胞来说，目前可以采用手术的方式进行去除杀死。肿瘤外科手术，要求术前有明确的病理诊断或术中快速病理切片确定诊断，对诊断的准确性和及时性有很高的要求。同时，为了保证手术的有效性，在切除时会将周围可能隐藏癌细胞的正常组织或区域性淋巴结一起切除。而且在手术操作过程中对于有瘤区和无瘤区要有严格的隔离，避免医源性癌细胞的播散，防止发生不必要的转移。这些操作都使得手术难度急剧加大，存在一定的手术危险性，并且会对周围正常组织造成一定的损伤。利用本专利技术的方法，从机体中提取出癌细胞，采用激光作用的方式，通过调节激光与癌细胞的相互作用效果，破坏癌细胞的遗传物质，但保留癌细胞表面膜蛋白，从而制备得到癌细胞疫苗。再将此处理过的癌细胞注射到机体内，引发机体产生更多T细胞，有更强的免疫反应。利用癌细胞特性，选择合适的光源对其进行作用，破坏其遗传物质，扰乱癌细胞的增殖行为。所使用的激光可以根据实际需求选择不同波段、脉宽等各项参数，在破坏癌细胞遗传物质的同时，不破坏癌细胞表面膜蛋白，从而不影响其产生免疫反应，以达到制备疫苗的目的。对于恶性肿瘤，目前主要的方式包括放射线杀死癌细胞，通过放射线(如X射线，伽马射线等)经过一定的腔道对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法，其特征在于：提供离开机体的癌细胞，利用激光作用于所述癌细胞从而破坏癌细胞的遗传物质获得所需的疫苗。

【技术特征摘要】
1.一种利用激光制备癌细胞疫苗的方法，其特征在于：提供离开机体的癌细胞，利用激光作用于所述癌细胞从而破坏癌细胞的遗传物质获得所需的疫苗。2.如权利要求1所述的利用激光制备癌细胞疫苗的方法，其特征在于：还包括对癌细胞进行传代培养后，并筛选其中增殖能力小的癌细胞。3.如权利要求2所述的利用激光制备癌细胞疫苗的方法，其特征在于：所述的筛选其中增殖能力小的癌细胞为，将癌细胞接种至小鼠细胞中然后通过观察癌细胞与小鼠细胞的相互作用和小鼠细胞的变化进行筛选。4.如权利要求1所述的利用激光制备癌细胞疫苗的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓杰，吴双，秦国双，
申请(专利权)人：英诺激光科技股份有限公司，江苏微纳激光应用技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44