焦谷氨酸淀粉样蛋白-β的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了结合到3pE Aβ的抗体或其抗原结合片段以及制备和使用该抗体或其抗原结合片段的方法，包括用于制剂、给药和试剂盒的用途。所公开的抗体及其抗原结合片段和方法可用于诊断、预后和治疗阿尔茨海默病或其它β‑淀粉样蛋白相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】焦谷氨酸淀粉样蛋白-β的抗体及其用途
本专利技术涉及淀粉样蛋白-β(Aβ)肽的抗体领域和使用该抗体的治疗方法。具体地，抗体可用于鉴定和治疗淀粉样蛋白相关的疾病。
技术介绍
阿尔茨海默病(AD)为退行性脑疾病，其临床特征是渐进性的记忆、认知、推理、判断和情感稳定性的丧失，这种丧失会逐渐导致重度精神衰退并最终死亡。阿尔茨海默病是老年人渐进式心智衰退(失智症)的常见原因。阿尔茨海默病在世界范围内都已发现，并且代表了主要的公共健康问题。据估计仅在美国该疾病当前影响超过约五百万人。目前它是不可治愈的，并且任何治疗均不有效地预防AD或逆转其症状或过程。患有AD的个体的脑显示出称作淀粉样蛋白斑、淀粉样蛋白血管病(淀粉样蛋白在血管中沉积)和神经原纤维缠结的特征性病变。通常可在对于记忆和认知功能重要的几个大脑区域中发现大量这些病变，具体地，淀粉样蛋白斑和神经原纤维缠结。患有21号染色体三体性(唐氏综合征)、弥散性路易体病和荷兰型遗传性脑出血伴淀粉样蛋白变性(HCHWA-D)的个体的大脑也是以淀粉样蛋白斑和淀粉样蛋白血管病为特征。淀粉样蛋白斑的主要组分是多种淀粉样蛋白-β(Aβ)肽，它们由β-淀粉样蛋白前体蛋白质(APP)的切割产生。假设Aβ肽在脑中的沉积是导致AD的疾病级联中的早期且必要的步骤。淀粉样蛋白前体蛋白和早老蛋白基因中鉴定出导致改变的Aβ产生并导致家族早期起始AD的突变提供了改变的淀粉样蛋白代谢是构成该疾病基础的致病过程中的中心事件的有力证据。在第三残基处具有焦谷氨酸的淀粉样蛋白-β肽(3pEAβ)是沉积在AD患者脑中的主要物质。3pEAβ存在于AD中的几乎所有弥散性和成熟斑块中，是代谢稳定的并且可在斑块接种和稳定两者中起作用(Cynis等人，MolecularNeurodegeneration，2016；11:48)。尚未报道CSF或血浆中3pEAβ的可检测量，因此表明靶肽是病理特异性的(DeMattos等人，Neuron，2012；76:1-13)。选择性地结合到3pEAβ的抗体可用于免疫疗法。
技术实现思路
如本专利技术所实施且完整描述的，本专利技术涉及结合到在第三残基处具有焦谷氨酸的淀粉样蛋白-β(3pEAβ)的抗体或其抗原结合片段，制备结合到3pEAβ的抗体或其抗原结合片段的方法，使用此类抗体或其抗原结合片段的测定方法，以及本专利技术的抗体或其抗原结合片段用于制造药物、治疗、延缓或逆转阿尔海默兹病和其它β-淀粉样蛋白相关疾病的至少一种病变或症状的用途。与不含有3pE的Aβ肽相比，本专利技术的抗体优先结合含有3pE的Aβ肽。具体地，本专利技术涉及结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段，其包含SEQIDNO:1的重链和SEQIDNO:12的轻链。在其它实施方案中，本专利技术涉及结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段，其包含SEQIDNO:2的重链可变区和SEQIDNO:13的轻链可变区。在其它实施方案中，重链可变区包含SEQIDNO:3、6和9中任一种的CDR1，SEQIDNO:4、7和10中任一种的CDR2，SEQIDNO:5、8和11中任一种的CDR3，并且轻链可变区包含SEQIDNO:14、17和20中任一种的CDR1，SEQIDNO:15和18中任一种的CDR2，SEQIDNO:16和19中任一项的CDR3。在一个具体实施方案中，重链可变区分别包含SEQIDNO:3-5的CDR1、CDR2和CDR3，并且轻链可变区分别包含SEQIDNO:14-16的CDR1、CDR2和CDR3。在另一具体实施方案中，重链可变区分别包含SEQIDNO:6-8的CDR1、CDR2和CDR3，并且轻链可变区分别包含SEQIDNO:17-19的CDR1、CDR2和CDR3。在另一具体实施方案中，重链可变区分别包含SEQIDNO:9-11的CDR1、CDR2和CDR3，并且轻链可变区分别包含SEQIDNO:20、18和16的CDR1、CDR2和CDR3。在另一实施方案中，本专利技术涉及结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区，该重链可变区包含与SEQIDNO:2具有至少85％、90％、95％或98％序列同一性的氨基酸序列，以及轻链可变区，该轻链可变区包含与SEQIDNO:13具有至少85％、90％、95％或98％序列同一性的氨基酸序列。本专利技术的实施方案为分离抗体或其抗原结合片段，其包含具有包含SEQIDNO:2的氨基酸残基31-35的CDR1序列的重链可变区，具有包含SEQIDNO:2的氨基酸残基50-66的CDR2序列的重链可变区，具有包含SEQIDNO:2的氨基酸残基99-108的CDR3序列的重链可变区，具有包含SEQIDNO:13的氨基酸残基24-39的CDR1序列的轻链可变区，具有包含SEQIDNO:13的氨基酸残基55-61的CDR2序列的轻链可变区；和具有包含SEQIDNO:13的氨基酸残基94-102的CDR3序列的轻链可变区。本专利技术的一个优选实施方案为分离抗体及其抗原结合片段，其包含含有SEQIDNO:3的重链可变区CDR1序列，包含SEQIDNO:4的重链可变区CDR2序列，包含SEQIDNO:5的重链可变区CDR3序列，包含SEQIDNO:14的轻链可变区CDR1序列，包含SEQIDNO:15的轻链可变区CDR2序列，以及包含SEQIDNO:16的轻链可变区CDR3序列。在优选的实施方案中，上述抗体为单克隆抗体。在一些优选的实施方案中，抗原结合片段选自由Fv、F(ab')、F(ab')2和scFv构成的片段。抗体或其抗原结合片段选择性地结合至3pEAβ肽(例如Aβ3pE-40和Aβ3pE-42)，与其它Aβ肽或β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)具有很少或不具有交叉反应性。本专利技术的实施方案包括生成对3pEAβ的单克隆抗体的方法。本专利技术的具体实施方案涉及产生结合至3pEAβ的单克隆抗体的杂交瘤。在另一实施方案中，结合至3pEAβ的单克隆抗体重组产生。在实施方案中，单克隆抗体由杂交瘤细胞表达或重组表达。产生的单克隆抗体包含由SEQIDNO:2组成的重链可变区，和由SEQIDNO:13组成的轻链可变区。本专利技术的实施方案涉及治疗阿尔茨海默病和其它β-淀粉样蛋白相关疾病的方法，所述方法包括向患有阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病的个体施用上述结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段。本专利技术的另一实施方案是清除与阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病相关的斑块的方法，所述方法包括向患有阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病的个体施用上述结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段。其它实施方案涉及一种预防3pEAβ的菌斑接种活性的方法，所述方法包括向患有阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病的个体施用上述结合至3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段。实施方案包括一种药物组合物，包含上述抗体或其抗原结合片段以及药学上可接受的载体。此类药物组合物可施用于患有阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病的受试者，或用于治疗阿尔茨海默病或其它β-淀粉样蛋白相关疾病的方法，诸如上述方法中。一个实施方案包括包含上述抗体或其抗原结合片段的试剂盒和装置。由下文的优选实施方案的详细描述，本专利技术更多的目的、特征和优点对于本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种结合到3pE Aβ的分离抗体或其抗原结合片段，所述分离抗体或其抗原结合片段包含：a)重链可变区，所述重链可变区具有SEQ ID NO:2的重链可变区的互补决定区(CDR)1、CDR2和CDR3，以及b)轻链可变区，所述轻链可变区具有SEQ ID NO:13的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.03 US 62/4167881.一种结合到3pEAβ的分离抗体或其抗原结合片段，所述分离抗体或其抗原结合片段包含：a)重链可变区，所述重链可变区具有SEQIDNO:2的重链可变区的互补决定区(CDR)1、CDR2和CDR3，以及b)轻链可变区，所述轻链可变区具有SEQIDNO:13的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3。2.根据权利要求1中任一项所述的分离抗体或其抗原结合片段，其中a)所述重链可变区CDR1包含SEQIDNO:3，b)所述重链可变区CDR2包含SEQIDNO:4，c)所述重链可变区CDR3包含SEQIDNO:5，d)所述轻链可变区CDR1包含SEQIDNO:14，e)所述轻链可变区CDR2包含SEQIDNO:15，并且f)所述轻链可变区CDR3包含SEQIDNO:16。3.根据权利要求1-2中任一项所述的分离抗体或其抗原结合片段，其中a)所述重链可变区CDR1为SEQIDNO:3，b)所述重链可变区CDR2为SEQIDNO:4，c)所述重链可变区CDR3为SEQIDNO:5，d)所述轻链可变区CDR1为SEQIDNO:14，e)所述轻链可变区CDR2为SEQIDNO:15，并且f)所述轻链可变区CDR3为SEQIDNO:16。4.根据权利要求1所述的分离抗体或其抗原结合片段，其中a)所述重链可变区CDR1包含SEQIDNO:6，b)所述重链可变区CDR2包含SEQIDNO:7，c)所述重链可变区CDR3包含SEQIDNO:8，d)所述轻链可变区CDR1包含SEQIDNO:17，e)所述轻链可变区CDR2包含SEQIDNO:18，并且f)所述轻链可变区CDR3包含SEQIDNO:19。5.根据权利要求1或4中任一项所述的分离抗体或其抗原结合片段，其中a)所述重链可变区CDR1为SEQIDNO:6，b)所述重链可变区CDR2为SEQIDNO:7，c)所述重链可变区CDR3为SEQIDNO:8，d)所述轻链可变区CDR1为SEQIDNO:17，e)所述轻链可变区CDR2为SEQIDNO:18，并且f)所述轻链可变区CDR3为SEQIDNO:19。6.根据权利要求1所述的分离抗体或其抗原结合片段，其中a)所述重链可变区CDR1包含SEQIDNO:9，b)所述重链可变区CDR2包含SEQIDNO:10，c)所...

【专利技术属性】
技术研发人员：M默克肯，B范布勒克，M范德梅伦，B赫曼斯，A博特尔伯格斯，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE