一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法，剪取在正常自然环境下生长的处于孕穗期的水稻主分蘖，转移至人工气候室内的特定接种装置中，利用嵌入法接种水稻纹枯病菌，根据接种后7天病斑在叶鞘上扩展的相对长度，鉴定水稻的纹枯病抗性。与田间成株期接种鉴定方法和苗期温室接种鉴定方法相比，本发明专利技术解决了不同品种因生育期或农艺性状不同而难以获得可靠抗病表型的问题，同时具有高通量和操作简单的特点，可用于快速评定不同地域来源的大规模水稻自然品种或种质的纹枯病抗性水平。与离体叶片接种法相比，本方法接种成功率达100%，茎秆可较长时间存活，使品种抗、感表型差异最大化，更有利于普通技术人员判断水稻对纹枯病的抗性。

A METHOD FOR IDENTIFICATION OF RICE STRAIN BLIGHT RESISTANCE WITH ISOLATED STEMS

【技术实现步骤摘要】
一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法
本专利技术属于植物抗病鉴定
，具体地说属于一种鉴定水稻对纹枯病抗性的方法。
技术介绍
水稻纹枯病是由土传真菌立枯丝核菌(RhizoctoniasolaniKühn)引起的(Wamish等,FrontiersofAgricultureinChina,2007,1(4):361-367.)。自然界中，R.solani以菌核形式在土壤里存活。春季溶田时，菌核漂浮在水面并接触到水稻植株基部。菌核萌发形成菌丝，沿着水稻叶鞘移动，并在营养生长之后侵染叶鞘(ref)。由于半矮杆水稻品种的大规模种植和秸秆全量还田、密植高肥等栽培技术的推广，纹枯病的发生日趋加重，每年均造成严重的产量损失(Jiaetal.,MethodsinMolecularBiology,2013,956(956):257.)。目前，纹枯病已成为世界范围内最具破坏性的水稻病害之一(廖皓年等,广西植保,1997(3):35-38.)。培育和推广抗纹枯病品种是水稻纹枯病防治的重要途径，但是这需要正确评定现有种质资源的抗感病表型，并鉴定其中的数量抗病基因，从而将其运用于育种工作(陈宗祥等，中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一，在水稻孕穗期从田间稻株中剪取主茎分蘖；步骤二，在稳定可控的环境内培养；步骤三，用嵌入法进行水稻纹枯病菌接种；步骤四，接种后第7天测量茎秆长度和病斑长度，以相对病斑长度评价水稻对纹枯病的抗性。

【技术特征摘要】
1.一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一，在水稻孕穗期从田间稻株中剪取主茎分蘖；步骤二，在稳定可控的环境内培养；步骤三，用嵌入法进行水稻纹枯病菌接种；步骤四，接种后第7天测量茎秆长度和病斑长度，以相对病斑长度评价水稻对纹枯病的抗性。2.根据权利要求1所述的一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法其特征在于所述的步骤一在水稻孕穗期从田间稻株中剪取主茎分蘖是指：在大田正常生长条件下生长到孕穗期的水稻，健康无病虫害、叶鞘表面光洁无斑痕；在傍晚选取长短一致的具有完全倒二叶叶鞘的分蘖茎秆，从倒二叶叶鞘的茎节下部约1cm剪断，茎秆的创口在接种完毕前连续暴露于空气中时间小于10分钟。3.根据权利要求1所述的一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法，其特征在于所述的步骤二在稳定可控的环境内培养具体为：由人工气候室提供可控的温光条件，由以下装置组成接种环境：接种架包括铝合金型材框架、托盘和聚酯薄膜；框架由横截面20mm*20mm的铝合金柱拼接组成，所述框架的长*宽*高＝800*400*800，单位mm；托盘的长*宽*高＝925*625*140,单位mm；框架的侧面及顶面覆以聚酯薄膜并固定、无需密封，而后放置于托盘内，托盘内水深7cm；接种盒包括塑料盒、试管架、花泥和营养液；接种盒的长*宽*高＝340*270*130，单位mm；试管架孔径15mm，有单排10孔和三排30孔两种规格；花泥为花鸟市场上用于插花的商品花泥，使用前要浸水泡透；营养液按国际水稻所配方配置；加湿器包括亚克力容器、风扇和超声波雾化器；其它还包括定时开关、12V电源和电线。4.根据权利要求1所述的一种利用水稻离体茎秆鉴定纹枯病抗性的方法，其特征在于所述的步骤三用嵌入法进行水稻纹枯病菌接种具体为：选择步骤一所获得的孕穗期长势一致的健康...

【专利技术属性】
技术研发人员：左示敏，张津乔，赵剑华，金梦娴，王广达，杨晓燕，冯志明，陈宗祥，张亚芳，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32