一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺制造技术

本发明专利技术属于生物制品技术领域，尤其为一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺，针对现有技术中羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺复杂、酶解耗费时间长的问题，现提出如下方案，其中羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺包括以下步骤：S1：原料预处理：按重量比为5：6~8的比例称取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，利用去离子水对原料进行清洗，原料清洗后对其进行切段处理，得到肉段；S2：添加辅料：选取一台电子天平，使用电子天平称取珍珠粉，珍珠粉用量为肉段总量的15%~25%。本发明专利技术设计合理，能够大幅度增加羊胚胎及羊胎盘原料的细胞组织面积，降低蛋白酶的消耗，提高蛋白酶浓度、增加酶解速率，方便快速制得羊胚胎素蛋白小肽等物质。

A Small Peptide of Sheep Embryo Protein and Its Preparation Technology

【技术实现步骤摘要】
一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺
本专利技术涉及生物制品
，尤其涉及一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺。
技术介绍
胎盘又名“紫河车”，为常用中药，现代医学研究表明：胎盘含有多种免疫球蛋白、活性肽等生物活性物质及氨基酸、矿物质等成分(统称活细胞素)，是一种机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品。科学家对多种动物胎盘进行对比实验后发现，羊胎盘的细胞组织结构与人胎盘最为相似，可望成为同人类胎盘具有同等养生价值的替代物。经检索，申请号为201110193938.6的专利文件公开了一种羊胚胎及羊胎盘生物制品及其制备方法，该方法包括以下的步骤:1）羊胚胎及羊胎盘原料前处理；2）羊胚胎及羊胎盘超微粉碎、细胞破壁；3）羊胚胎及羊胎盘的提取和酶解；4）采用葡聚糖凝胶根据分子量大小对上述步骤3）中得到的羊胎及羊胎盘素原液进行分级精制，得到氨基酸、小分子多肽和各种分子量蛋白的精制羊胎素。采用上述方法制得的羊胚胎及羊胎盘素的精制羊胎素，既保留胎盘中的天然活性物质，又增加其多肽及氨基酸含。但是现有技术中制备羊胚胎素蛋白小肽时工艺较为复杂，且蛋白酶消耗量较大、酶解耗费时间较长、经济成本高，不利于进行工业化生产，因此我们提出了一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺用于解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决有技术中制备羊胚胎素蛋白小肽时工艺复杂、蛋白酶消耗量较大、酶解耗费时间较长的缺点，而提出的一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺，包括以下步骤：S1：原料预处理：按重量比为5：6~8的比例称取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，利用去离子水对原料进行清洗，原料清洗后对其进行切段处理，得到肉段；S2：添加辅料：选取一台电子天平，使用电子天平称取珍珠粉，珍珠粉用量为S1中所述肉段总量的15%~25%，将称量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并进行搅拌混合，得到混合料；S3：研磨：选取一台研磨设备，将S2中所述的混合料投放到研磨设备内进行研磨处理，研磨时间为15~25分钟，研磨压力为0.2~0.5MPa,得到肉糜；S4：离心：选取一台离心机，将S3所述的肉糜等量注入多个试管内，并将试管置于离心机内进行离心处理，待肉糜离心结束后取所有试管中的上层清液，得到组织液；取所有试管中的下层浊液，得到组织浊液；S5：配制酶解液：利用电子天平称取复合蛋白酶，复合蛋白酶的用量为S4中所述组织浊液总量的3%~5%，将称量得到的复合蛋白酶投放到S4中所述的组织浊液内，并向其中注入去离子水，去离子水的注入量为组织浊液总量的200%~300%，酶解时间为150~240分钟；S6：投入组织液：待S5中所述的组织浊液酶解完成时，将S4中所述的组织液投放到S5中酶解完成的组织浊液中，并进行搅拌，搅拌时间为45~90分钟，得到原液；S7：选取层析柱：选取长度为80~120厘米、长度与直径比为5~11的琼脂糖层析柱，利用层析柱对S6中所述的原液进行分级精制，得到氨基酸、小分子多肽和各种分子量蛋白的精制羊胎素。优选的，所述S1中，在对原料进行切段处理时，切段的宽度为1~3厘米，切段的长度为4~8厘米，通过对羊胚胎及羊胎盘原料进行切段处理，方便后续对其进行研磨处理。优选的，所述S3中，在对肉段进行研磨前，使用去离子水对研磨设备进行清洗，待研磨设备干燥后再对肉段进行研磨工作，研磨设备使用去离子水清洗后能够降低研磨设备内部的细菌等物质。优选的，所述S4中，在对肉糜进行离心处理时，离心时间为10~15分钟，离心转速为800-1200转/分钟，能够快速使肉糜中组织液析出。优选的，所述S5中，在对组织浊液进行酶解时，酶解温度为50-55摄氏度，加热能够提高蛋白酶的活性。优选的，所述S5中，在配制酶解液时，复合蛋白酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶和木瓜蛋白酶混合而成，使用多种蛋白酶能够酶解羊胚胎及羊胎盘原料中相应成分。优选的，所述复合蛋白酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶按照重量比为0.4：1:1.2：0.8配制而成，避免使用等比例配成的复合蛋白酶，缩减使用经济成本较高的蛋白酶，优先使用价格低廉的蛋白酶。本专利技术还提出了上述的任一技术方案制备得到的羊胚胎素蛋白小肽。本专利技术中，所述一种羊胚胎素蛋白小肽及其制备工艺，通过选取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，并对原料进行切断和研磨处理，且在羊胚胎及羊胎盘的研磨过程中添加了无害且不会参与反应的珍珠粉，珍珠粉的添加使得研磨更加充分，从物理层面上最大程度的增加了羊胚胎及羊胎盘的组织的分散程度，利于后续工序中蛋白酶与细胞组织进行酶解反应，提高酶解速率；通过对肉糜进行离心处理，使得肉糜中的组织液从细胞组织内流出，组织液与组织分离后，便于后续工序中组织蛋白酶对组织进行分解，通过配制酶解液并利用酶解液对组织浊液进行分解，由于选取的复合蛋白酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶和木瓜蛋白酶配制而成，所以该复合蛋白酶能够快速高效的对组织浊液进行分解；通过等待组织浊液完成至一段时间后，将前工序中析出的组织液投放到酶解液中进行进一步酶解处理，避免组织液中含有少量的组织浊液，且避免组织液过早加入而降低了复合蛋白酶的浓度，使得复合蛋白酶能够快速分解细胞组织，再通过层析柱的分级析出作用，能够将酶解后的原液按分子量大小依次析出，进而制得氨基酸、小分子多肽和各种分子量蛋白等物质；本专利技术设计合理，通过对羊胚胎及羊胎盘原料进行粉碎研磨处理，能够大幅度增加羊胚胎及羊胎盘原料的细胞组织面积，且将细胞组织中的组织液析出后再进行酶解处理，降低蛋白酶的消耗，提高蛋白酶浓度、增加酶解速率，方便快速制得羊胚胎素蛋白小肽等物质。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。实施例一一种羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺，包括以下步骤：S1：原料预处理：按重量比为5：6的比例称取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，利用去离子水对原料进行清洗，原料清洗后对其进行切段处理，得到肉段；在S1中，在对原料进行切段处理时，切段的宽度为1厘米，切段的长度为4厘米，通过对羊胚胎及羊胎盘原料进行切段处理，方便后续对其进行研磨处理。S2：添加辅料：选取一台电子天平，使用电子天平称取珍珠粉，珍珠粉用量为S1中所述肉段总量的15%，将称量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并进行搅拌混合，得到混合料；S3：研磨：选取一台研磨设备，将S2中所述的混合料投放到研磨设备内进行研磨处理，研磨时间为15分钟，研磨压力为0.2MPa,得到肉糜；在S3中，在对肉段进行研磨前，使用去离子水对研磨设备进行清洗，待研磨设备干燥后再对肉段进行研磨工作，研磨设备使用去离子水清洗后能够降低研磨设备内部的细菌等物质。S4：离心：选取一台离心机，将S3所述的肉糜等量注入多个试管内，并将试管置于离心机内进行离心处理，待肉糜离心结束后取所有试管中的上层清液，得到组织液；取所有试管中的下层浊液，得到组织浊液；在S4中，在对肉糜进行离心处理时，离心时间为10~15分钟，离心转速为800转/分钟，能够快速使肉糜中组织液析出。S5：配制酶解液：利用电子天平称取复合蛋白酶，复合蛋白酶的用量为S本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：S1：原料预处理：按重量比为5：6~8的比例称取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，利用去离子水对原料进行清洗，原料清洗后对其进行切段处理，得到肉段；S2：添加辅料：选取一台电子天平，使用电子天平称取珍珠粉，珍珠粉用量为S1中所述肉段总量的15%~25%，将称量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并进行搅拌混合，得到混合料；S3：研磨：选取一台研磨设备，将S2中所述的混合料投放到研磨设备内进行研磨处理，研磨时间为15~25分钟，研磨压力为0.2~0.5MPa,得到肉糜；S4：离心：选取一台离心机，将S3所述的肉糜等量注入多个试管内，并将试管置于离心机内进行离心处理，待肉糜离心结束后取所有试管中的上层清液，得到组织液；取所有试管中的下层浊液，得到组织浊液；S5：配制酶解液：利用电子天平称取复合蛋白酶，复合蛋白酶的用量为S4中所述组织浊液总量的3%~5%，将称量得到的复合蛋白酶投放到S4中所述的组织浊液内，并向其中注入去离子水，去离子水的注入量为组织浊液总量的200%~300%，酶解时间为150~240分钟；S6：投入组织液：待S5中所述的组织浊液酶解完成时，将S4中所述的组织液投放到S5中酶解完成的组织浊液中，并进行搅拌，搅拌时间为45~90分钟，得到原液；S7：选取层析柱：选取长度为80~120厘米、长度与直径比为5~11的琼脂糖层析柱，利用层析柱对S6中所述的原液进行分级精制，得到氨基酸、小分子多肽和各种分子量蛋白的精制羊胎素。...

【技术特征摘要】
1.一种羊胚胎素蛋白小肽的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：S1：原料预处理：按重量比为5：6~8的比例称取新鲜的羊胚胎及羊胎盘作为原料，利用去离子水对原料进行清洗，原料清洗后对其进行切段处理，得到肉段；S2：添加辅料：选取一台电子天平，使用电子天平称取珍珠粉，珍珠粉用量为S1中所述肉段总量的15%~25%，将称量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并进行搅拌混合，得到混合料；S3：研磨：选取一台研磨设备，将S2中所述的混合料投放到研磨设备内进行研磨处理，研磨时间为15~25分钟，研磨压力为0.2~0.5MPa,得到肉糜；S4：离心：选取一台离心机，将S3所述的肉糜等量注入多个试管内，并将试管置于离心机内进行离心处理，待肉糜离心结束后取所有试管中的上层清液，得到组织液；取所有试管中的下层浊液，得到组织浊液；S5：配制酶解液：利用电子天平称取复合蛋白酶，复合蛋白酶的用量为S4中所述组织浊液总量的3%~5%，将称量得到的复合蛋白酶投放到S4中所述的组织浊液内，并向其中注入去离子水，去离子水的注入量为组织浊液总量的200%~300%，酶解时间为150~240分钟；S6：投入组织液：待S5中所述的组织浊液酶解完成时，将S4中所述的组织液投放到S5中酶解完成的组织浊液中，并进行搅拌，搅拌时间为45~90分钟，得到原液；S7：选取层析柱：选取长度为80~120...

【专利技术属性】
技术研发人员：李万千，李静，
申请(专利权)人：长沙嘉兰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43