一种实时荧光定量PCR检测方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供一种实时荧光定量PCR检测方法和装置，包括以下步骤：检测反应管中内置固体石蜡；在检测反应管中加入实时荧光定量PCR检测试剂、待检测模板；加热检测反应管，所述固体石蜡遇热融化并浮于PCR反应液表面；所述实时荧光定量PCR反应结束，温度降低，所述融化后的石蜡浮于PCR反应液表面并凝固，形成固态的石蜡密封层。该实时荧光定量PCR检测方法方法和装置能够保证检测空间的密封性，防止荧光定量PCR检测反应体系发生气溶胶现象，避免因操作不慎导致的实时荧光定量PCR检测试剂渗漏，避免检测环境污染，保证待检测模板检测结果的准确性。

A Real-time Fluorescence Quantitative PCR Detection Method and Device

【技术实现步骤摘要】
一种实时荧光定量PCR检测方法和装置
本专利技术涉及一种实时荧光定量PCR检测方法和装置，特别涉及一种能有效防止气溶胶形成的实时荧光定量PCR检测方法和装置。
技术介绍
基于荧光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR，RTFQPCR)方法的核酸检测方法，在生物学、医学、食品药品检测等领域得到了极大的发展和推广，具有灵敏度高，检测准确，检测效率高等优势。但在实际应用中也存在一定的问题，其中一个突出的问题是气溶胶污染的产生。由于PCR反应在反应过程中经历多次高温循环，同时反应管中形成的DNA片断往往浓度非常高，在反应中或反应后，一旦操作不慎，容易导致液体渗漏并在检测环境中形成气溶胶污染。气溶胶污染的形成会导致之后进行相同检测检测时假阳性的出现，严重影响了检测结果的真实有效性。为避免气溶胶污染这一问题，实验室往往将样品处理区，试剂制备区和检测区独立为不同的物理隔绝空间，以避免污染的扩散。这一办法虽然有效，却需要较大面积的检测空间和金额较大的实验室装修投入，限制了基于荧光定量PCR检测方法的推广和普及。例如在一些城乡结合部、偏远地区，或者临时设立的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：首先、检测反应管中内置固体石蜡；其次、在检测反应管中加入实时荧光定量PCR检测试剂、待检测模板；最后，加热检测反应管，所述固体石蜡遇热融化并浮于PCR反应液表面；所述实时荧光定量PCR反应结束，温度降低，所述融化后的石蜡浮于所述PCR反应液表面并凝固，形成固态的石蜡密封层。

【技术特征摘要】
1.一种实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：首先、检测反应管中内置固体石蜡；其次、在检测反应管中加入实时荧光定量PCR检测试剂、待检测模板；最后，加热检测反应管，所述固体石蜡遇热融化并浮于PCR反应液表面；所述实时荧光定量PCR反应结束，温度降低，所述融化后的石蜡浮于所述PCR反应液表面并凝固，形成固态的石蜡密封层。2.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于：在所述检测反应管中内置固体石蜡，具体包括以下步骤：所述检测反应管包括管体和管盖，将固体石蜡融化后的液态石蜡加到检测反应管的管体内壁形成的容置空间中，并等液态石蜡凝固；或者将固体石蜡融化后加到检测反应管的管盖内壁中，等液态石蜡凝固；或者将固体石蜡直接投入检测反应管管体的容置空间中。3.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于：所述待检测模板是DNA模板。4.根据权利要求1所述的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所述实时荧光定量PCR反应结束后的PCR条件设置中加入一个降温段，让所述PCR反应液降温到室温，保证液态石蜡层凝固。5.一种实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：首先，将检测反应管内置固体石蜡和冻干检测试剂；其次，在检测反应管中加入待检测模板；最后，加热检测反应管，所述固体石蜡遇热融化，并浮于PCR反应液表面；所述实时荧光定量PCR反应结...

【专利技术属性】
技术研发人员：邬鹏，石文迪，张锦华，
申请(专利权)人：北京亦泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11