快速检测小麦光周期基因Ppd-B1甲基化水平的引物、方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种快速检测小麦光周期基因Ppd‑B1甲基化水平的引物、方法及应用，该引物包括Ppd‑B1‑HpaII‑F1和Ppd‑B1‑HpaII‑R1，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该方法包括以下步骤：利用CTAB法提取小麦材料基因组DNA；对小麦材料基因组DNA进行酶切处理；对酶切后的产物进行PCR扩增处理；用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，如获得扩增产物的分子量为586bp的扩增片段，表明鉴定材料为Ppd‑B1高甲基化类型，否则表明鉴定材料为Ppd‑B1低甲基化类型。该方法不仅结果准确，而且大大降低了反应成本和反应时间。

【技术实现步骤摘要】
快速检测小麦光周期基因Ppd-B1甲基化水平的引物、方法及应用
本专利技术属于分子生物技术与育种应用领域，具体地说，涉及一种快速检测小麦光周期基因Ppd-B1甲基化水平的引物、方法及应用。
技术介绍
小麦(TriticumaestivumL.)是重要的粮食作物，培育高产优质小麦品种对解决全球粮食问题具有重要意义。在小麦“绿色革命”中，光周期不敏感特性决定的地域间广泛适应能力是高产小麦的重要特征。深入研究控制小麦光周期不敏感位点形成的机理，开发简便有效的分子标记并将其应用于生产实践，对于提高小麦对环境的适应性，扩大引种范围都具有重要意义。小麦有三个控制光周期的主效基因，根据光周期不敏感型定名为Ppd-1、Ppd-2、Ppd-3，分别把它们定位于小麦2D、2B和2A染色体上，也称Ppd-D1、Ppd-B1、Ppd-A1(WelshJR,KeimDL,PirastehB,etal.Geneticcontrolofphotoperiodresponseinwheat.Proceedingofthe4thInternationalWheatGeneticsSymposium.Universit本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测小麦光周期基因Ppd‑B1甲基化水平的引物，其特征在于，包括Ppd‑B1‑HpaII‑F1和Ppd‑B1‑HpaII‑R1，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种快速检测小麦光周期基因Ppd-B1甲基化水平的引物，其特征在于，包括Ppd-B1-HpaII-F1和Ppd-B1-HpaII-R1，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。2.一种快速检测小麦光周期基因Ppd-B1甲基化水平的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、利用CTAB法提取小麦材料基因组DNA；步骤2、对小麦材料基因组DNA进行酶切处理；步骤3、对酶切后的产物进行PCR扩增处理；步骤4、用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，如获得扩增产物的分子量为586bp的扩增片段，表明鉴定材料为Ppd-B1高甲基化类型，否则表明鉴定材料为Ppd-B1低甲基化类型。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤2中的酶切体系如下：10×NEBuffer2.5μL，BstUI或HpaII0.5μL，600ng/μLDNA3.0μL，ddH2O19.0μL，总量为25.0μL。...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晗，吴永振，崔法，赵春华，余梦伟，黄世霞，陈易安，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：山东,37