【技术实现步骤摘要】
一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法。
技术介绍
循环肿瘤DNA，即ctDNA(circulatingtumorDNA)，是指肿瘤细胞经过细胞凋亡或者坏死产生的DNA片段释放进入循环系统。ctDNA存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中。由于ctDNA半衰期为1小时左右，能准确反映肿瘤当前情况，所以ctDNA可以作为组织活检的非侵入性替代方案。另外，ctDNA在癌症早期诊断、预后和测定药物治疗反应中发挥作用。目前主流的ctDNA突变检测技术包括基于PCR扩增技术和基于DNA序列检测技术两类。但是不管哪种测序技术，都需要都对DNA进行富集和提取，以降低对扩增或者后续测序的干扰。ctDNA的主要提取方法主要是基于硅球、磁性小球的固相萃取方法和基于苯酚-氯仿的液液提取方法。主要问题是提取效率和重现性。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供一种双组分聚合物功能化材料富集循环肿瘤DNA的方法。一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，采用分散固相萃取模式...
【技术保护点】
1.一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于采用分散固相萃取模式，具体步骤如下：1)先采用上样液平衡DNA富集材料，将该DNA富集材料与生物样品以质量比100‑1000:1混合，孵化0.5‑720min，过滤或者离心分离，弃上混合层清液，收集沉淀；2)采用1‑6清洗液与沉淀混合，孵化0.5分钟‑60分钟，过滤或者离心分离，弃上层清液，收集沉淀；3)采用pH 8‑13洗脱液与沉淀混合，孵化0.5分钟‑60分钟，过滤或者离心分离，收集上清液，得ctDNA，上述整个过程在10‑60℃进行，所述DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。
【技术特征摘要】
1.一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于采用分散固相萃取模式，具体步骤如下：1)先采用上样液平衡DNA富集材料，将该DNA富集材料与生物样品以质量比100-1000:1混合，孵化0.5-720min，过滤或者离心分离，弃上混合层清液，收集沉淀；2)采用1-6清洗液与沉淀混合，孵化0.5分钟-60分钟，过滤或者离心分离，弃上层清液，收集沉淀；3)采用pH8-13洗脱液与沉淀混合，孵化0.5分钟-60分钟，过滤或者离心分离，收集上清液，得ctDNA，上述整个过程在10-60℃进行，所述DNA富集材料为双组分聚合物功能化材料。2.根据权利要求1所述的一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于所述双组分聚合物功能化材料，其结构如下：其中R为羧基、硝基、甲基、甲酸乙酯基或氢；X＝0.01-0.5；所述双组分聚合物功能化材料的基底的材料为Si、Cu、Ag、Au、Pt、CuO、Fe3O4、多孔SiO2、多孔Al2O3、多孔TiO2或多孔ZrO2中的任意一种或者两种以上任意比例的混合。3.根据权利要求1所述的一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于所述双组分聚合物功能化材料的制备方法为：利用原子转移自由基聚合反应机制，将双组分功能共聚物接枝到无机半导体、金属或金属氧化物表面上，使其获得智能响应性聚合物功能表面；所述的无机半导体为Si或SiO2中的任意一种或者两种按任意比例的混合；所述的金属为Au、Ag或Pt中的任意一种或者两种以上任意比例的混合；所述的金属氧化物为CuO、Al2O3、TiO2、ZrO2或Fe3O4中的任意一种或者两种以上任意比例的混合。4.根据权利要求3所述的一种双组分聚合物功能化材料富集提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于，所述双组分聚合物功能化材料的制备方法具体为：在25mL的烧瓶中依次加入0.4mmol异丙基丙烯酰胺，0.1mmol的硫脲功能单体，二者摩尔比为4：1，...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，李秀玲，张小菲，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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