用于治疗性用途的抗BAG3抗体与免疫检查点抑制剂的组合制造技术

本发明专利技术涉及包含抗BAG3抗体和免疫检查点抑制剂的组合；涉及包含所述组合的药物制剂，所述药物制剂任选地具有药学上可接受的赋形剂；并涉及所述药物制剂在肿瘤性疾病的治疗中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗性用途的抗BAG3抗体与免疫检查点抑制剂的组合本专利技术涉及包含抗BAG3抗体和免疫检查点抑制剂的组合；涉及包含所述组合的药物制剂，所述药物制剂任选地具有药学上可接受的赋形剂；并涉及所述药物制剂在肿瘤性疾病(neoplasticdisease)的治疗中的用途。专利技术背景BAG3蛋白是一种74kDa的胞质蛋白，其属于共伴侣蛋白(co-chaperons)家族，所述共伴侣蛋白家族通过称为BAG结构域(氨基酸110-124)的结构域与蛋白HSP70(热休克蛋白)的ATP酶结构域相互作用。此外，BAG3蛋白包含WW结构域(Trp-Trp)、脯氨酸富集区(PXXP)和两个保守的基序IPV(Ile-Pro-Val)，其可介导与其他蛋白的结合。由于BAG3蛋白作为适配体(adapter)的性质(可归因于许多功能结构域的存在)，因此此类蛋白可以与不同的蛋白相互作用。在人类中，bag3基因表达对于包括肌细胞的数种正常细胞而言是组成型的，而其突变则与骨骼肌和心肌的疾病相关。此外，BAG3蛋白在许多类型的原发性肿瘤或肿瘤细胞系(淋巴性或骨髓性白血病、神经母细胞瘤、胰腺癌、甲状腺癌、乳腺癌和前列腺癌、黑素瘤、骨肉瘤、胶质母细胞瘤和肾肿瘤、结肠肿瘤、卵巢肿瘤等)中表达(RosatiA.等人,CellDeathDis.2011Apr7；2:e141)。在正常的细胞类型，诸如白细胞、上皮细胞和神经胶质细胞和视网膜细胞中，bag3基因表达可通过应激原(stressor)，诸如氧化剂、高温、血清缺乏、重金属、HIV-1感染等来诱导。这些发现表明，bag3基因表达调控是细胞对应激的反应中的重要组成部分，并与响应转录因子HSF1(热休克转录因子)的元件的存在相关，所述元件在bag3基因启动子中以各种形式的细胞应激被激活。此外，由于其结构中许多蛋白-蛋白相互作用结构域的存在，BAG3蛋白影响不同类型的细胞中的细胞存活，与不同的分子伴侣相互作用(RosatiA.等人，CellDeathDis.2011Apr7；2:e141)。被报道与BAG3抗凋亡活性有关的第一个机制在骨肉瘤和黑素瘤细胞中被鉴定出，其中观察到BAG3蛋白调节转录因子NF-kB的活化和细胞存活(AmmiranteM.等人，ProcNatlAcadSciUSA.2010；107(16):7497-502)。已描述了胶质母细胞瘤细胞中的不同的分子机制，其中BAG3蛋白以正向方式(inapositiveway)与HSP70蛋白合作，以维持细胞溶胶中的BAX蛋白并阻止其转位进入线粒体(FestaM.等人，AmJPathol.2011；178(6):2504-12)。最后，已示出BAG3在某些肿瘤中调控调节细胞粘附的蛋白。胞质BAG3蛋白的存在也已经在许多不同的细胞系统中被描述，并且不但与各种肿瘤相关，而且与涉及细胞存活的一般病理学相关。此外，专利申请号WO2011/067377描述了由一些细胞类型分泌的作为血清中的生化标志物的细胞外BAG3蛋白，其对于某些病理学状况，诸如心脏病理学和胰腺肿瘤的诊断是高度特异性的。近期已报道了BAG3蛋白在患有胰腺导管腺癌(PDAC)的346/346患者中表达，并由胰腺肿瘤的细胞释放，但此蛋白既不在周围的非肿瘤性组织中表达，也不在正常胰腺中表达；同样地，已报道了BAG3表达的水平与患者存活相关。研究的结果证明，使用对BAG3mRNA特异性的siRNA分子可以沉默bag3基因表达并诱导细胞死亡，证实了BAG3蛋白是对于胰腺肿瘤细胞而言重要的存活因子，且证实了BAG3蛋白的下调当与吉西他滨(gemcitabine)结合时，可以有助于根除肿瘤细胞(RosatiA.等人，AmJPathol.2012Nov；181(5):1524-9)。此外，在近期的一篇论文中(RosatiA.等人，NatCommun.2015Nov2；6:8695)，我们报道了PDAC释放的BAG3结合巨噬细胞，诱导其活化和PDAC支持因子的分泌。我们还将IFITM-2鉴定为BAG3受体，并示出了IFITM-2通过PI3K和p38MAPK通路传导信号。最后，我们已经示出，在三种不同的小鼠模型中使用小鼠单克隆抗BAG3抗体导致肿瘤生长减少并预防转移形成。因此，我们已经鉴定出一个参与PDAC生长和转移性扩散的旁分泌环路(paracrineloop)，并示出了抗BAG3抗体具有治疗潜力(RosatiA.等人，NatCommun.2015Nov2；6:8695)。事实上，我们示出了抗BAG3抗体阻断了巨噬细胞上的BAG3活性。在体内，我们示出了这种抗体在不同动物模型，包括患者来源的异种移植物模型和同基因(syngeneic)模型中阻断肿瘤生长的能力。该后一个模型非常重要，因为小鼠具有完整的免疫系统。针对肿瘤病理的常规化疗疗法具有许多与副作用相关的缺点，并且目前还不是治疗此类病理的确定性手段。近年来，免疫检查点抑制剂(即抑制/阻断免疫检查点系统的分子)已经成为晚期肿瘤的有效疗法；这些免疫检查点抑制剂中包括阻断细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)和程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)的治疗性抗体，这些抗体已被用于若干肿瘤(TopalianSL等人，NatRevCancer.2016May；16(5):275-87)。PD-1(程序性细胞死亡蛋白，CD279)，B7/CD28受体家族的成员，是在活化的白细胞(包括T细胞、B细胞、NK细胞和髓系来源抑制性细胞)的细胞表面表达的单体分子，其表达受遗传和表观遗传机制之间的相互影响精细调节。已知的PD-1配体是PD-L1和PD-L2(FarkonaS.等人，BMCMed.2016May5；14:73)。PD-L1(程序性细胞死亡蛋白配体1，B7H1，CD274)在造血细胞(包括T细胞、B细胞、髓系细胞和树突状细胞)和非造血细胞(诸如肺细胞、心脏细胞、内皮细胞、胰岛细胞、角质细胞)并且特别是癌细胞上以低水平表达，并在细胞活化时被上调。PD-L2(程序性细胞死亡蛋白配体2，B7-DC，CD273)在巨噬细胞、树突状细胞(DC)、活化的CD4+和CD8+淋巴细胞和一些实体瘤(卵巢癌、小细胞肺癌、食道癌)上表达。PD-L1和PD-L2二者的表达也在正常的以及癌症相关的成纤维细胞上被检测到。PD-L1和PD-L2二者与另外的受体相互作用：PD-L1与CD28配体CD80相互作用，且PD-L2与巨噬细胞和其他细胞类型上表达的排斥性导向分子(RepulsiveGuidanceMolecule，RGM)b相互作用。PD-1的胞质尾部含有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(anImmunoreceptorTyrosine-basedInhibitionMotif；ITIM)和基于免疫受体酪氨酸的转换基序(animmunoreceptortyrosine-basedswitchmotif；ITSM)。在T淋巴细胞中，PD-1与其配体的相互作用导致PD-1胞内尾部的两个酪氨酸磷酸化；将含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP-1和/或SHP-2)募集到PD-1的ITSM胞质区，然后抑制T细胞受体的下游信号，从而抑制T细胞增殖和细胞因子产生。PD-1也对T细胞产生其他作用：例本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.组合，所述组合包含抗BAG3抗体或其片段和至少一种免疫检查点抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.07 IT 1020160001118771.组合，所述组合包含抗BAG3抗体或其片段和至少一种免疫检查点抑制剂。2.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述至少一种免疫检查点抑制剂是抗体、蛋白、小分子和/或si-RNA。3.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述抗BAG3抗体或其片段是人源化抗体，所述人源化抗体包含：a)由SEQIDNO:12编码的重链氨基酸序列或至少所述重链氨基酸序列的可变结构域或与所述重链氨基酸序列具有至少80％的序列同一性的氨基酸序列，和b)由SEQIDNO:20编码的轻链氨基酸序列或至少所述轻链氨基酸序列的可变结构域或与所述轻链氨基酸序列具有至少80％的序列同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂是与PD-1、PDL-1、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、IDO、KIR、LAG3、TIM-3或VISTA蛋白，优选PD-1、PDL-1或CTLA-4蛋白结合的抗体或其片段。5.根据任一前述权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽亚·卡特里纳·图尔科，温琴佐·德劳伦兹，利维拉托·马祖罗，亚历山德拉·罗萨蒂，
申请(专利权)人：比奥尤尼沃萨有限责任公司，
类型：发明
国别省市：意大利,IT