基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术是关于一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，它包括免疫侧向流道和孔径小于1.2um的微孔膜，免疫侧向流道的末端设置溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述微孔膜；免疫侧向流道中设置了至少一种标记试剂，微孔膜上包被了捕获试剂。本实用新型专利技术还公开了一种微孔膜渗滤检测装置，免疫侧向流道和孔径基本均匀且孔径大于20nm的微孔膜，所述免疫侧向流道的末端设置溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述的微孔膜，所述微孔膜为亲水性的微孔膜；免疫侧向流道中设置了包被微球、固定于微球表面的捕获试剂、以及标记试剂。捕获试剂及标记试剂中分别设置有互为直接或间接配位体关系的物质。

【技术实现步骤摘要】
基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置
本技术属于生物医学诊断领域的免疫侧向流动检测技术，具体的说，是关于一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置。
技术介绍
免疫侧向层析技术是20世纪末发展起来的结合免疫技术和色谱层析技术的一种生物分析方法，该方法具有特异性、操作简单、快速等特点，广泛应用于临床诊断、环境监测、食品安全等重要领域。传统免疫层析技术以胶体金为标记物，通过条带显色对目标物定性检测或半定量分析。荧光免疫层析技术作为一项新型免疫检测技术，既有传统胶体金试纸条的现场快速检测优点，又发展了荧光技术的高灵敏度特点。免疫层析技术是基于抗原抗体特异反应的。该技术以亲水多孔膜固定有检测线(包被抗体或包被抗原，也记作T线)和质控线(抗抗体，也记作C线)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。对于带有多个抗原决定簇的大分子抗原(蛋白、病毒、致病菌等)，通常采用“三明治”型双抗夹心免疫层析方法，即待测物在流动相作用下先与荧光标记抗体结合，当到达检测线时再被包被抗体动态捕获结合形成双抗夹心的“三明治”反应复合物。斑点金免疫渗滤法试验是在硝酸纤维素膜的膜片中央滴加纯化的抗体，为膜所吸附。当滴加在膜上的标本液体渗滤过膜时，标本中含抗原被膜上抗体捕获，其余无关蛋白等被滤出膜片。其后加入的胶体金标记也在渗滤中与已结合在膜上的抗原相结合。因胶体金本身呈红色，阳性反应即在膜中央显示红色斑点。相比较免疫侧向层析中5-20um孔径的硝酸纤维素膜，渗滤法中的膜孔径一般是0.45um，因此穿越膜的溶液流动速度慢不少，因此亲和力较弱的免疫反应能在渗滤法实验中得到合适的结果。但斑点金免疫渗滤实验中需要多个溶液的添加操作，如果能设法改造成一步加样操作简便的方案就更好了。免疫侧向层析在固相膜上展开长度一般超过2cm，T线宽度不超过1mm，液体前行1mm的时间仅仅3秒左右，待测蛋白在3秒内要被动态捕获蛋白捕获结合。因此包被蛋白的免疫亲和力要求很高，很多蛋白在静态捕获的酶联免疫吸附试验(ELISA)中表现不错，但在免疫侧向层析的应用中却不能采用。因此很多项目中，将标记抗体预先与样品溶液进行混合反应，或增加包被试剂与标记试剂混合层析的距离以便更充分的进行结合反应，这都能提高检测灵敏度，但却增加了额外的操作步骤。如果能在免疫层析的方法中摒弃蛋白动态捕获却采用偏向静态孵育的混合孵育方式进行免疫结合捕获，将会有更好的应用效果。国内专利文献CN201310228708.8公开了一种基于纤维膜捕集分离的定量检测装置及其检测方法：将标记蛋白的包被微球放入深孔滤板，与标记试剂进行静态的混合孵育反应，随后通过离心力作用将样品溶液及洗涤溶液从滤板的滤膜流尽，标记试剂等小分子或小粒径的物质随溶液流出了深孔滤板，包被微球则在穿越底部滤膜时被部分截留，随后通过光学对膜表面进行检测得到相关检测信号的实验。这个方法的意义在于免疫反应试剂在均相环境中进行了静态孵育，更加降低了对免疫抗体抗原的亲和力要求；同时孵育反应后溶液中承载着反应复合物的包被微球被集聚到滤膜中，起到了良好的反应物质浓缩作用。但是，该专利文献中的包被微球的粒径与滤膜的孔径的关系没有明确界定，微球将渗入滤膜一定深度，这将导致部分微球会穿越滤膜，从而导致检测结果不准确。同时，也将导致滤膜不同深度的微球反射的光谱信号的差异。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，以实现将免疫层析试纸的免疫反应复合物通过免疫侧向流道中设置的微孔膜捕获截留或微球捕获截留，能在一步免疫层析的基础上对免疫反应复合物的信号通过微孔膜的方式捕获，从而达到更高检测灵敏度的结果。为实现上述目的，本技术采用如下技术方案：作为本技术的第一个方面，一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，包括免疫侧向流道和孔径小于1.2um的微孔膜，免疫侧向流道的溶液直接流入其末端设置的溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述微孔膜。根据本技术，免疫侧向流道中设置了至少一种标记试剂，微孔膜上包被了捕获试剂；捕获试剂及标记试剂中分别设置有互为直接或间接配位体关系的物质。根据本技术，免疫侧向流道包括能定向传递水溶液的亲水多孔膜,所述亲水多孔膜选自硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜、化学纤维膜及滤纸中的一种或多种；免疫侧向流道还包括由两片亲水膜的亲水表面夹持所述亲水多孔膜所构建的空隙通道，溶液从空隙通道的一端流向另一端。根据本技术，所述两片亲水膜的上亲水膜是透明的，它与微孔膜之间构建的空隙通道将溶液导引流入微孔膜。根据本技术，所述标记试剂包括肉眼直接可见的颜色微粒或荧光物质；所述颜色微粒选自纳米胶体金、乳胶微球、炭黑微粒、其他带颜色信号的纳米颗粒等中的一种或几种；所述荧光物质选自荧光分子及其微球、量子点微粒及其微球、上转换发光微粒及其微球、时间分辨荧光分子及其微球、荧光蛋白等中的一种或几种。根据本技术，所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置还包括能对所述经过免疫侧向流动后集聚在微孔膜的反应复合物进行特定波长的光线照射被激发后接收反射出的至少一个波长光谱信号的检测设备。作为本技术的第二个方面，一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，包括免疫侧向流道和孔径基本均匀且孔径范围在0.02-1.2um的微孔膜，所述免疫侧向流道的溶液流向其末端设置的溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述的微孔膜，所述微孔膜为亲水性的，溶液可以穿越渗滤。根据本技术，免疫侧向流道中设置了至少一种直径基本均匀且大于微孔膜孔径的包被微球、固定于微球表面的捕获试剂、以及直径小于微孔膜孔径的标记试剂；捕获试剂及标记试剂中分别设置有互为直接或间接配位体关系的物质。根据本技术，免疫侧向流道包括能定向传递水溶液的亲水多孔膜,所述亲水多孔膜选自硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜、化学纤维膜及滤纸中的一种或多种；免疫侧向流道还包括由两片亲水膜的亲水表面夹持所述亲水多孔膜所构建的空隙通道，溶液从空隙通道的一端流向另一端。根据本技术，两片亲水膜设置于所述免疫侧向流道末端，两片亲水膜的亲水表面夹持亲水多孔膜的上下表面，两片亲水膜中底部的亲水膜的下表面贴合有所述微孔膜，贴合在微孔膜上表面的亲水膜的中部设置有缺口作为溶液流出口；或者，两片亲水膜的亲水表面夹持亲水多孔膜的左右两侧，两片亲水膜夹持形成的空隙通道底面的的中部设置有缺口作为溶液流出口。根据本技术，所述亲水膜上设置的缺口形状中至少包括最大间隙不超过1.5mm的空隙形状或角度不超过95度的夹角。根据本技术，微孔膜的下表面贴合有吸水材料，流入亲水膜缺口的溶液穿越微孔膜后被吸水材料吸收传递。根据本技术，所述标记试剂包括肉眼直接可见的颜色微粒或荧光物质；所述颜色微粒选自纳米胶体金、乳胶微球、炭黑微粒、其他带颜色信号的纳米颗粒等中的一种或几种；所述荧光物质选自荧光分子及其微球、量子点微粒及其微球、上转换发光微粒及其微球、时间分辨荧光分子及其微球、荧光蛋白等中的一种或几种。进一步的，基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置还包括能对所述经过免疫侧向流动后截留集聚在微孔膜的反应复合物进行特定波长的光线照射被激发后接收反射出的至本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，包括免疫侧向流道和孔径小于1.2um的微孔膜，免疫侧向流道的溶液直接流入其末端设置的溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述微孔膜，以供溶液穿越渗滤。

【技术特征摘要】
1.一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，包括免疫侧向流道和孔径小于1.2um的微孔膜，免疫侧向流道的溶液直接流入其末端设置的溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述微孔膜，以供溶液穿越渗滤。2.如权利要求1所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，免疫侧向流道中设置了至少一种标记试剂，微孔膜上包被了捕获试剂；捕获试剂及标记试剂中分别设置有互为直接或间接配位体关系的物质。3.如权利要求1所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，免疫侧向流道包括能定向传递水溶液的亲水多孔膜,所述亲水多孔膜选自硝酸纤维素膜、样品吸收垫玻璃纤维膜、化学纤维膜及滤纸中的一种或多种；免疫侧向流道还包括由上、下两片亲水膜的亲水表面夹持所述亲水多孔膜所构建的空隙通道，溶液从空隙通道的一端流向另一端。4.如权利要求3所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，两片亲水膜的上亲水膜是透明的，它与微孔膜之间构建的空隙通道将溶液导引流入微孔膜。5.如权利要求2所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，所述标记试剂包括肉眼直接可见的颜色微粒或荧光物质；所述颜色微粒选自纳米胶体金、乳胶微球、炭黑微粒、其他带颜色信号的纳米颗粒中的一种或几种；所述荧光物质选自荧光分子及其微球、量子点微粒及其微球、上转换发光微粒及其微球、时间分辨荧光分子及其微球、荧光蛋白中的一种或多种。6.如权利要求5所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，还包括能对所述经过免疫侧向流动后集聚在微孔膜的反应复合物进行特定波长的光线照射被激发后接收反射出的至少一个波长光谱信号的检测设备。7.一种基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，包括免疫侧向流道和孔径基本均匀且孔径范围在0.02-1.2um的微孔膜，所述免疫侧向流道的溶液流向其末端设置的溶液流出口，所述溶液流出口处贴合有所述的微孔膜供溶液穿越渗滤，所述微孔膜为亲水性的。8.如权利要求7所述的基于免疫侧向流动的微孔膜渗滤检测装置，其特征在于，免疫侧向流道中设置了至少一种直径基本均匀且大于微孔膜孔径的包被微球、固定于微球表面的捕获试剂、以及直径小于微孔膜孔径的标记试剂；捕获试剂及标...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏鹏海，刘芳，周中人，
申请(专利权)人：上海快灵生物工程有限公司，上海快灵生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：上海,31