提取食品中抗生素残留的试剂盒以及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种快速破碎、高效提取碎食品中残留抗生素的试剂盒和方法。该试剂盒由破碎介质及提取液组成，所述破碎介质是由不同粒径的锆珠和石英砂组成，所述提取液由柠檬酸钠和甲醇按一定的比例混合而成。本发明专利技术的方法能够快速破碎禽兽肉类样本并高效地将残留抗生素，例如磺胺类、四环素类提取出来。

A Kit for Extracting Antibiotic Residues in Food and Its Detection Method

The invention discloses a kit and a method for rapidly crushing and efficiently extracting residual antibiotics in crushed food. The kit is composed of crushing medium and extract. The crushing medium is composed of zirconium beads and quartz sand with different particle sizes. The extract is composed of sodium citrate and methanol in a certain proportion. The method of the invention can quickly crush animal meat samples and efficiently extract residual antibiotics, such as sulfonamides and tetracyclines.

【技术实现步骤摘要】
提取食品中抗生素残留的试剂盒以及检测方法
本专利技术涉及食品安全检测领域；具体地说，本专利技术涉及用于提取食品中的残留抗生素，例如磺胺类和四环素类抗生素的试剂盒以及检测方法。
技术介绍
“民以食为天，食以安为先”，食品安全既是保证人类健康生存的基本保障要求，也是社会发展的先决条件，人们已从以前单纯的果腹转变为如今的吃得健康，吃得安心。食品安全也越来越引起人们的重视，其中食品检测技术的发展是确保食品安全的技术支撑。完整的食品检测过程包括样品采集、样品前处理、分析测定、数据处理、结果表达。其中食品检测的前处理方法是指对样品进行纯化和浓缩，使被分析物适于分析。对样品进行纯化的目的是提取样品中的待检测成分同时去除其他成分的干扰。近年来，在禽畜产品养殖过程中不合理使用磺胺、四环素的报道屡屡出现，肉类中磺胺、四环素残留导致细菌的耐药问题日益严重。而且，每年使用数以百吨的抗生素扫过全世界的微生群落，这些微生物生活在人畜体内，并具有感染性。这导致了进化加速和耐药病原体的扩散，造成环境中抗性耐药菌和抗生素抗性基因日益增多。也就是说抗生素使用的选择压力使得耐药菌在人、动物和环境之间传播、自由移动。为了应对耐药菌的增加，，建立全面的食品中抗生素检测体系是非常有必要的。针对禽畜肉类食品流通环节实际现场样本的特殊性，以及特定指标测定的要求，开发利用微珠高速震荡和碰撞的固体样品破碎仪器，可快速将固体样品均一地破碎。结合不同的需要检测的样品形式，开发可高效、稳定处理不同样品的专一性抽提剂，可高效萃取、净化各种样品中的抗生素。样品前处理仪器具有操作快速高效、高通量、重复性高等特点。对固体食品样品而言，只有将其进行彻底破碎，并用适当的溶液抽提才能使其中所含的抗生素小分子，如抗生素释放到上清抽提液中，以用于免疫学检测或其他的进一步实验；固体样品传统的破碎方式其均一度差，操作时间长。为此，固体样品前处理技术需要能够进行多个样品的平行处理，程序可定，并快速实现样品的前处理，处理量能够满足一般实验所需，回收率得到保证。综上所述，本领域急需能够快速、准确地检测食品中的残留抗生素的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能够快速、准确地检测食品中的残留抗生素的方法以及用于这种方法中的检测试剂盒。在第一方面，本专利技术提供一种检测食品中的抗生素残留的方法，所述方法包括：1)利用破碎介质和提取液提取食品样本中的残留抗生素；2)检测该残留抗生素的含量。在优选的实施方式中，所述食品包括但不限于肉类、蔬菜、水果、谷物、坚果、奶粉；优选肉类，包括但不限于猪肉、鸡肉、火腿、虾肉、鱼肉、猪肝等。在优选的实施方式中，步骤1)包括在提取液中利用破碎介质使得食品样本完全破碎。在优选的实施方式中，将肉类样本和破碎介质置于15ml离心管中，用MPFastPrep-24均质破碎仪1min将肉类样本完全破碎。在优选的实施方式中，步骤2)包括采用免疫层析荧光法检测残留抗生素的含量。在具体的实施方式中，所述抗生素是磺胺类或四环素类抗生素。在具体的实施方式中，所述破碎介质由锆珠和石英砂组成。在具体的实施方式中，所述锆珠的直径为5.5-6.0mm或7-7.5mm；优选7-7.5mm；所述石英砂为80-100目或25-50目；优选25-50目。在具体的实施方式中，所述锆珠和石英砂的质量比为2:1；优选3:1；更优选4:1。在优选的实施方式中，所述破碎介质由四粒直径为7-7.5mm的锆珠，1.5g25-50目的石英砂混合而成。在具体的实施方式中，所述提取液由柠檬酸钠和甲醇组成，所述提取液的pH为4.5-5.0，优选4.7；优选地，所述提取液中为柠檬酸钠与甲醇的质量体积比＝1:1。在第二方面，本专利技术提供一种提取食品中的抗生素残留的试剂盒，所述试剂盒装有破碎介质和提取液。在优选的实施方式中，所述试剂盒还装有检测抗生素含量的装置。在优选的实施方式中，所述食品包括但不限于肉类、蔬菜、水果、谷物、坚果、奶粉；优选肉类，包括但不限于猪肉、鸡肉、火腿、虾肉、鱼肉、猪肝等。在具体的实施方式中，所述抗生素是磺胺类或四环素类抗生素。在具体的实施方式中，所述破碎介质由锆珠和石英砂组成。在优选的实施方式中，所述锆珠的直径为5.5-6.0mm或7-7.5mm；优选7-7.5mm；所述石英砂为80-100目或25-50目；优选25-50目。在优选的实施方式中，所述锆珠和石英砂的质量比为2:1；优选3:1；更优选4:1。在优选的实施方式中，所述破碎介质由四粒直径为7-7.5mm的锆珠，1.5g25-50目的石英砂混合而成。在具体的实施方式中，所述提取液由柠檬酸钠和甲醇组成，所述提取液的pH为4.5-5.0，优选4.7；优选地，所述提取液中柠檬酸钠和甲醇的质量体积比＝1:1。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1显示了与破碎介质和提取液相混合的猪肉样本；图2显示了对猪肉样本进行破碎和提取后的实验结果；图3-6显示了用免疫层析荧光的方法检测猪肉样本中的磺胺和四环素的结果。图7显示了利用三粒直径为7-7.5mm的国产锆珠和1.5g石英砂对猪肉样本进行破碎后的实验结果。图8-9显示了用不同提取液检测猪肉样本中的磺胺和四环素的结果。具体实施方式专利技术人经过广泛而深入的研究，出乎意料地发现利用特定的破碎介质，再结合特定的提取液能够快速破碎食品，尤其是肉类样本并且从中有效提取残留的抗生素，例如磺胺、四环素类抗生素，从而能够实现快速、准确地检测食品中的残留抗生素。在此基础上完成了本专利技术。为解决现有技术中存在的上述问题，本专利技术提供一种快速破碎，高效提取食品样本中抗生素残留的试剂盒，该试剂盒能够在短时间内将食品，例如畜肉类产品完全破碎，同时运用一定配比的有机溶剂能高效地将肉类产品中残留的抗生素，例如磺胺、四环素充分提取出来。该试剂盒具有快速、高效、操作简便等特点。具体地说，本专利技术提供了利用锆珠、石英砂混合破碎介质快速破碎食品样本，同时用柠檬酸钠、甲醇混合提取液高效提取其中的残留抗生素的方法。在本文中，所述食品与本领域技术人员常规理解的意义相同，包括但不限于肉类、蔬菜、水果、谷物、坚果、奶粉；特别是优选肉类，包括但不限于猪肉、鸡肉、火腿、虾肉、鱼肉、猪肝等禽兽类样本。本文所用的“锆珠”的含义与本领域技术人员理解的相同，是指用于添加在研磨机械中对物料进行研磨的介质。其主要由氧化锆组成，主要应用在油漆、油墨、涂料、农药等需要对物料进行精细研磨的行业。本专利技术所用的锆珠的直径为5.5-6.0mm或7-7.5mm，优选7-7.5mm。本文所用的“石英砂”的含义与本领域技术人员理解的相同，是指石英石经破碎加工而成的石英颗粒，其主要矿物成分是SiO2。本专利技术所用的石英砂为80-100目或25-50目，优选25-50目。在本专利技术的方法中，所述锆珠和石英砂的质量比可以为2:1；优选3:1；更优选4:1。在优选的实施方式中，所述破碎介质由四粒直径为7-7.5mm的锆珠，1.5g25-50目的石英砂混合而成。本专利技术人发现利用特定的破碎介质，再结合特定的提取液能够快速破碎食品并且从中有效提取残留的抗生素。本专利技术的提取液由本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测食品中的抗生素残留的方法，所述方法包括：1)利用破碎介质和提取液提取食品样本中的残留抗生素；2)检测该残留抗生素的含量。

【技术特征摘要】
1.一种检测食品中的抗生素残留的方法，所述方法包括：1)利用破碎介质和提取液提取食品样本中的残留抗生素；2)检测该残留抗生素的含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗生素是磺胺类或四环素类抗生素。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述破碎介质由锆珠和石英砂组成。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述锆珠的直径为5.5-6.0mm或7-7.5mm；优选7-7.5mm；所述石英砂为80-100目或25-50目；优选25-50目。5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述锆珠和石英砂的质量比为2:1；优选3:1；更优选4:1。6.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨志行，王滔，郭彦飞，何扬锦，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心，
类型：发明
国别省市：上海,31