一种均相酶免疫偶联物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及均相酶免疫检测技术领域，尤其涉及一种小分子半抗原与酶在偶联剂的作用下脱水得到的偶联产物。首先将小分子半抗原溶解于磷酸盐缓冲液中；然后向上述小分子半抗原溶液中加入偶联剂、酶以及蛋白质反应得到均相酶免疫偶联物。本发明专利技术克服了现有技术中通过均相酶免疫法测定血清中特定抗原抗体的过程中使用的酶偶联物容易受到个体健康状况影响，导致测试结果可靠性不足以及偶联效率较低的缺陷，本发明专利技术具有降低个体健康状况对测试的干扰，提高测试结果可靠性；酶以及蛋白质与小分子半抗原在偶联剂的作用下直接结合，无需其它桥连分子，偶联效率高且反应条件温和；所制得的酶偶联物水溶性好，酶活力损失较小等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种均相酶免疫偶联物及其制备方法和应用
本专利技术涉及均相酶免疫检测
，尤其涉及一种均相酶免疫偶联物及其制备方法和应用。
技术介绍
均相酶免疫技术是一种基于液相均相反应体系的竞争性免疫测定技术，该技术基于抗原-抗体反应原理，即酶标记的半抗原与其对应的抗体结合后产生空间位阻抑制酶活力，而当样本中含有游离的小分子半抗原时，其将与酶标记的半抗原竞争性结合抗体，与抗体结合的酶标记半抗原将得到释放，其活力也将增强，通过建立吸光值与待测物校准品浓度的标准曲线，计算未知样本的含量。该方法反应灵敏度高、特异性强；且因为是均相酶促反应体系，既避免了抗原、抗体分离对结果的影响，同时反应可以在较短时间内达到平衡，利用全自动生化分析仪可实现样本的快速高通量检测。血清甘胆酸(Cholyglycine，CG)是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸之一。当肝细胞受损时，肝细胞摄取CG能力下降，致使血中CG含量增高；胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍，而返流血液循环的CG含量增高，也使血CG含量增高。因此，测定血清甘胆酸水平是评价肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标之一。甘胆酸也是妊娠晚期血清中最主要的胆汁酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种均相酶免疫偶联物，其特征在于，所述的均相酶免疫偶联物为小分子半抗原与酶及蛋白质在偶联剂的作用下脱水得到的偶联产物。

【技术特征摘要】
1.一种均相酶免疫偶联物，其特征在于，所述的均相酶免疫偶联物为小分子半抗原与酶及蛋白质在偶联剂的作用下脱水得到的偶联产物。2.根据权利要求1所述的一种均相酶免疫偶联物，其特征在于，所述的小分子半抗原为甘胆酸或3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸中的一种；所述的酶为苹果酸脱氢酶或者甲酸脱氢酶中的一种；所述的蛋白质为牛血清白蛋白、卵白蛋白、血蓝蛋白、卵清蛋白或多聚赖氨酸中的一种；所述的偶联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐或二环己基碳二亚胺中的一种或两种组合物。3.一种如权利要求1~2中所述的均相酶免疫偶联物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法具体步骤如下：（S.1）将小分子半抗原溶解于磷酸盐缓冲液中，得到小分子半抗原溶液；（S.2）向上述小分子半抗原溶液中加入酶以及蛋白质，搅拌混合后再加入偶联剂，继续搅拌反应得到反应液；（S.3）将反应得到的反应液进行透析纯化，得到均相酶免疫偶联物。4.根据权利要求3所述的一种均相酶免疫偶联物的制备方法，其特征在于，所述的步骤（S.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：王轶雄，杨晓东，缪刘，曹静，
申请(专利权)人：杭州博谱医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33