治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法技术方案

本发明专利技术公开的属于医药技术领域，具体为治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法,该生产方法步骤如下：步骤一：IKK2阻滞剂由一个单一的乳化剂挥发法装入聚乙交酯微球；步骤二：100mg的聚乙交酯:丙交酯乙＝[50:50]溶于1.8mL二氯甲烷；步骤三：10mgIKK2阻滞剂溶于200μl二甲基亚砜；步骤四：该将步骤一到步骤三聚合物溶液用匀浆器10000/min 1分钟，然后将混合物倒入一个10ml 2％聚乙烯醇溶液中，在10000/min匀浆器常温下转18小时；步骤五：用60X油镜成像系统确定聚乙交酯微球粒度分布，保证IKK2阻滞剂聚乙交酯微球平均直径为2.4μm，该发明专利技术能有效而持久的抑制年龄相关性黄斑病变的进展，无需频繁用药且效果明显，且价格低廉。

Preparation of IKK2 Blocker Sustained Release System for Macular Disease

The invention discloses a preparation method of IKK2 blocker slow-release system for treating macular lesions, which comprises the following steps: step 1: IKK2 blocker is loaded into polyethylene lactide microspheres by a single emulsifier evaporation method; step 2: 100mg polyethylene lactide is dissolved in 1.8mL dichloromethane; step 3: 10mg IK2 blocker is dissolved in 1.8mL dichloromethane; Dimethyl sulfoxide (DMSO) was dissolved in 200 ml. Step 4: The trimer solution was homogenized for 10 000/min for 1 minute, then the mixture was poured into a 10 ml 2% polyvinyl alcohol solution, and the homogenizer was rotated at room temperature for 18 hours. Step 5: The particle size distribution of polyethylene lactide microspheres was determined by 60X oil mirror imaging system to ensure the average diameter of IK2 blocker polyethylene lactide microspheres. At 2.4 um, the invention can effectively and persistently inhibit the progress of age-related macular lesions, without frequent use of drugs, and the effect is obvious, and the price is low.

【技术实现步骤摘要】
治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法
本专利技术涉及医药
，具体为治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法。
技术介绍
年龄相关性黄斑病变(Age-relatedMacularDegeneration,AMD)是导致60岁以上人群视力丧失的主要原因。NF-kB介导的炎症传导通路参与视网膜新生血管的形成,IKK2是NF-kB信号通路中的重要调控蛋白。年龄相关性黄斑病变(AMD)的病因尚未明了，近年有报道称炎症是非常重要的原因之一。并在患者病灶区中发现有巨噬细胞、淋巴细胞及一些炎症细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞。另外发现，补体因子中的遗传多态性、补体失活因子以及其它一些补体基因与年龄相关性黄斑病变的发生有很紧密的关联性。这些研究结果表明，炎症的下调对于年龄相关性黄斑病变的抑制或延缓可能是一个重要的靶点。血管内皮细胞增殖诱导的年龄相关性黄斑病变依赖于血管内皮生长因子(VEGFs)的分泌，VEGF含有多种异构体(VEGF-A，VEGF-B，VEGF-C和VEGF-D)，对促进新生血管生成有不同功能。在年龄相关性黄斑变性患者的脉络膜新生血管膜的视网膜色素上皮细胞发现了VEGF的表达。临床应用的Lucentis正是通过抑制VEGF而抑制年龄相关性黄斑病变的进展。由于核转录因子NF-κB可以调控VEGF和PDGF的分泌及激活多个促炎性基因(例如MCP-1、ICA-1、白细胞介素IL)，因此有理由相信NF-B对于年龄相关性黄斑病变的治疗有重要的作用。NF-B在先天和后天免疫应答中起到重要的作用。脊椎动物的转录因子NF-B由5种结构蛋白组成，分别是p100、p105、relA、relB、c-Rel。没有外界刺激时,NF-B二聚体与其抑制蛋白IkBα、IkB等绑定，存于细胞质中，随着激活的IKK2激酶诱导IB磷酸化后IB蛋白再进行泛素依赖的蛋白质降解，这样NF-B可以定位到细胞核内在细胞核内，NF-κB二聚体可以通过结合细胞因子、趋化因子和生长因子达到激活转录的目的。研究已经证实IKK2在NF-κB的激活过程中是一个非常重要的调控激酶，IKK2的缺失能够抑制NF-B的活性以及促炎性反应。很多证据表明，NF-κB还可以通过上调血管生成因子如IL-8、MCP-1和VEGF的表达以调控血管再生从而促进肿瘤的生长。一些抗炎补充因子如ω-3脂肪酸及其衍生物可以抑制年龄相关性黄斑病变的进展，这与抑制NF-B活性及抑制炎性细胞因子的产生有关，示通过药物抑制NF-κB信号通路可能是预防年龄相关性黄斑病变的一个新手段。最近研究出NF-κB通过HIF-1α调控VEGF的转录，HIF-1α在缺氧条件下是VEGF转录的一个重要调控因子,虽然HIF-1α聚集的调控主要发生在翻译后水平，通过抑制氧依赖的PHDs,而PHDs在含氧正常的条件下可以降解，但最近的研究表明，HIF-1α基因的转录激活是通过IKK2激活NF-κB，这发生在HIF-1α蛋白聚集上游，这在体外和体内的病理生理学条件下是至关重要的。在正常及缺氧条件下，氧敏感的PHDs调控IKK-β的催化活性，而NF-κB调控HIF-1αmRNA的表达，这表明其作为缺氧响应的调控子。对于缺氧的小鼠，HIF-1αmRNA的表达及蛋白聚集功能缺陷，另外HIF-1α的靶基因包括VEGF也无法表达。因此推测，在衰老过程中，一些有害物质如RPE的积累会导致氧化应激和缺氧，这会导致IKK-NF-B的持续激活和慢性炎症，从而进一步通过上调血管生成因子诱导新血管形成而推进年龄相关性黄斑病变的发生发展。IKK2阻滞剂已广泛而深入作为抗炎和抗肿瘤治疗的研究热点。然而，全身毒性阻止IKK2阻滞剂成为有效的治疗药物。但是IKK2阻滞剂在眼局部用药时，既能达到抑制炎症的治疗效果又能避免其全身毒性。脉络膜新生血管膜是年龄相关性黄斑病变的一个临床症状，但是年龄相关性黄斑病变是一种慢性疾病，需要长期的眼周用药来维持药物的治疗效果。然而频繁的眼内或眼周注射产生副作用和并发症伴随的巨大风险，给眼科医生和患者带来了不小的压力。因此，一个有效的药物缓释系统，持续而稳定的眼内释放可能是行之有效的方法。最常用的聚合物是聚乳酸(PLA)药品载体，聚乙交酯、丙烯酸，都可以在体内降解形成天然代谢物。药物的释放速率可以通过改变聚合物的化学成分和分子量来实现长期的平衡给药，从数周到数月不等。纳米粒子之间的大小差异非常影响其性能，相对于较小的纳米颗粒，较大的微粒具有较大的载药量和较慢的药物释放时间。现有技术当中的年龄相关性黄斑病变的治疗虽然已有多种治疗方法，但药价昂贵、频繁用药且治疗效果不尽人意，因此亟需研发治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法不虽然已有多种治疗方法，但药价昂贵、频繁用药且治疗效果不尽人意等特性的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法,该生产方法步骤如下：步骤一：IKK2阻滞剂由一个单一的乳化剂挥发法装入聚乙交酯微球；步骤二：100mg的聚乙交酯:丙交酯乙＝[50:50]溶于1.8mL二氯甲烷；步骤三：10mgIKK2阻滞剂溶于200μl二甲基亚砜；步骤四：该将步骤一到步骤三聚合物溶液用匀浆器10000/min1分钟，然后将混合物倒入一个10ml2％聚乙烯醇溶液中，在10000/min匀浆器常温下转18小时；步骤五：用60X油镜成像系统确定聚乙交酯微球粒度分布，保证IKK2阻滞剂聚乙交酯微球平均直径为2.4μm；步骤六：IKK2阻滞剂聚乙交酯微球形成悬浮液，15000/min匀浆器中离心10min，取上清液，采用高效液相色谱法，取310nm分析，直到IKK2阻滞剂聚乙交酯微球结合率达到80％。优选的，所述匀浆器为高速匀浆器。优选的，所述60X油镜成像系统为活细胞实时成像系统。优选的，所述聚乙交酯为MW7000–17000。优选的，所述IKK2阻滞剂为水溶性小分子。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：该专利技术提供了治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法，球后注射IKK2阻滞剂纳米缓释系统能够治疗年龄相关性黄斑病变，能有效而持久的抑制年龄相关性黄斑病变的进展，无需频繁用药且效果明显，且价格低廉。附图说明图1为本专利技术HE染色示IKK2基因敲除鼠的脉络膜新生血管膜厚度对照组图；图2为本专利技术眼底造影及Fluorescein-labeleddextran染色示IKK2基因敲除鼠的脉络膜新生血管膜面积、数量对照组图；图3为本专利技术Fluorescein-labeleddextran染色计算脉络膜新生血管膜面积给药对照组图；图4为本专利技术IKK2阻滞剂眼局部给药后全身免疫系统毒性反应变化图图5为本专利技术在细胞实验中IKK2阻滞剂能够抑制人RPE-19细胞的血管生成因子的表达图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法,其特征在于：该生产方法步骤如下：步骤一：IKK2阻滞剂由一个单一的乳化剂挥发法装入聚乙交酯微球；步骤二：100mg的聚乙交酯:丙交酯乙＝[50:50]溶于1.8mL二氯甲烷；步骤三：10mgIKK2阻滞剂溶于200μl二甲基亚砜；步骤四：该将步骤一到步骤三聚合物溶液用匀浆器10000/min1分钟，然后将混合物倒入一个10ml2％聚乙烯醇溶液中，在10000/min匀浆器常温下转18小时；步骤五：用60X油镜成像系统确定聚乙交酯微球粒度分布，保证IKK2阻滞剂聚乙交酯微球平均直径为2.4μm；步骤六：IKK2阻滞剂聚乙交酯微球形成悬浮液，15000/min匀浆器中离心10min，取上清液，采用高效液相色谱法，取310nm分析，直到IKK2阻滞剂聚乙交酯微球结合率达到80％。

【技术特征摘要】
1.治疗黄斑病变药物IKK2阻滞剂缓释系统的制备方法,其特征在于：该生产方法步骤如下：步骤一：IKK2阻滞剂由一个单一的乳化剂挥发法装入聚乙交酯微球；步骤二：100mg的聚乙交酯:丙交酯乙＝[50:50]溶于1.8mL二氯甲烷；步骤三：10mgIKK2阻滞剂溶于200μl二甲基亚砜；步骤四：该将步骤一到步骤三聚合物溶液用匀浆器10000/min1分钟，然后将混合物倒入一个10ml2％聚乙烯醇溶液中，在10000/min匀浆器常温下转18小时；步骤五：用60X油镜成像系统确定聚乙交酯微球粒度分布，保证IKK2阻滞剂聚乙交酯微球平均直径为2.4μm；步骤六：IKK2阻滞剂聚乙交酯微球形成悬浮液，15000/...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕华毅，徐春玲，李富强，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22