用于在治疗肝损伤中使用的基于巨噬细胞的疗法制造技术

本发明专利技术涉及用于在治疗肝损伤中使用的替代性活化的巨噬细胞(AAM)和采用AAM以治疗和预防肝损伤的方法。

Macrophage-based therapy for treatment of liver injury

The present invention relates to an alternatively activated macrophage (AAM) used in the treatment of liver injury and a method of using AAM to treat and prevent liver injury.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于在治疗肝损伤中使用的基于巨噬细胞的疗法
本专利技术涉及用于在治疗肝损伤中使用的替代性活化的巨噬细胞。
技术介绍
在美国过量服用对乙酰氨基酚(扑热息痛，APAP)是临床上急性肝损伤(ALI)的常见病因，也是急性肝衰竭(ALF)的主要病因(1-5)。APAP还可作为临床前研究的范例肝毒素，并且支持APAP肝毒性的分子机制现已得到充分了解，这是至少四十年的研究。然而，在临床中，对于APAP诱发的ALI的治疗管理主要局限于N-乙酰半胱氨酸(NAC)疗法，在药物摄入后早期(通常在10小时内)其作为有效的解毒剂。然而，对于APAP摄入后迟发(即超过10小时)的患者，NAC治疗的有效性大大降低(6)。对迟发性患者的治疗主要在于支持性护理，可能需要对随后发展为ALF的患者进行肝移植。由于短缺合适的器官供体并需要相关的终生免疫抑制，因而肝移植显然不是理想的治疗性干预方式。因此，迫切寻求适用于APAP中毒迟发性患者的新疗法。APAP中毒被表征为肝脏中的小叶中心肝细胞快速坏死。如果没有立即的临床干预，大量肝损伤可能发展成与败血症样反应相关的肝衰竭，被称为全身性炎症反应综合征(SIRS)，通常以免疫激活、脑病、体温过低和高风险的多器官衰竭及死亡为特征(7)。最近的研究已经表明，用于维持肝脏先天免疫力的组织驻留巨噬细胞(库普弗细胞(KupfferCell)，KC)将会在APAP攻击后早期被耗竭，导致损伤期间肝脏免疫缺陷(8)。巨噬细胞被认为通过分泌TNF相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)来刺激胆管细胞增殖(Bird,T.G.等人，Bonemarrowinjectionstimulateshepaticductularreactionsintheabsenceofinjuryviamacrophage-mediatedTWEAKsignaling.ProcNatlAcadSciUSA110,6542-6547,doi:10.1073/pnas.1302168110(2013)；Jakubowski,A.等人，TWEAKinducesliverprogenitorcellproliferation.JClin548Invest115,2330-2340,doi:10.1172/jci23486(2005))。虽然这些胆管细胞可能与纤维化相关(Williams,M.J.,Clouston,A.D.&Forbes,S.J.Linksbetweenhepaticfibrosis,ductularreaction,andprogenitorcellexpansion.Gastroenterology146,349-356,doi:10.1053/j.gastro.2013.11.034(2014))，但是它们也可能含有再生性肝祖细胞(HPC)(Lu,W.Y.等人，Hepaticprogenitorcellsofbiliaryoriginwithliverrepopulationcapacity.NatCellBiol17,971-983,doi:10.1038/ncb3203(2015))。KC还提供肠源性病原体的免疫屏障，该肠源性病原体在肝损伤期间变得失调，进一步危害全身性毒性(9,10)。还存在全身性免疫效应，导致以CCR2依赖性方式被募集于肝脏中的循环性单核细胞的耗竭和功能障碍(11-13)。还存在关于巨噬细胞在肝损伤期间的作用的相互矛盾的文献，其可能反映在组织损伤和再生期间巨噬细胞生物学的复杂塑性。健康肝脏中的干细胞具有巨大的再生能力，但由病毒感染、酒精滥用、暴露于毒素和代谢紊乱所引起的慢性损伤会导致纤维化瘢痕、肝硬化和再生过程最终失败(Friedman,S.L.Mechanismsofhepaticfibrogenesis.Gastroenterology134,1655-1669,doi:10.1053/j.gastro.2008.03.003(2008))。唯一可用的治疗方法是器官移植，但随着需求不断增加以及供体数量受限，迫切需要替代疗法(Soltys,K.A.等人，Barrierstothesuccessfultreatmentofliverdiseasebyhepatocytetransplantation.JHepatol53,769-774,doi:10.1016/j.jhep.2010.05.010(2010))。迫切寻求可用于治疗肝损伤的新疗法。本专利技术的目的是提供用于肝损伤的新疗法。有利地是，这种疗法将能够加速肝坏死消退、抑制全身性炎症反应并促进肝再生。
技术实现思路
根据本专利技术，提供了替代性活化的巨噬细胞(AAM)，将其用于在预防或治疗肝损伤中使用，如慢性或急性肝损伤。合适地，肝损伤可以是急性肝损伤，如与使用药物或过量服用药物相关的肝损伤。合适地，肝损伤可能是由使用一种或多种选自由以下所组成的组的药物导致：对乙酰氨基酚、克拉霉素、他汀类、烟酸、胺碘酮、甲氨蝶呤、异烟肼、呋喃妥因、沃格孟汀、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生、吡罗昔康、萘丁美酮、双氯芬酸、他克林或双硫仑。合适地，药物可以是对乙酰氨基酚。合适地，肝损伤可能由中毒引起，如蘑菇中毒。合适地，可以在肝脏显现出坏死迹象时给予AAM。合适地，可以在中毒或过量服用药物后10小时或更长时间给予AAM。可以通过用IL-4、IL-13、CSF-1或其组合将巨噬细胞极化来制备替代性活化的(M2样)巨噬细胞。合适地，可以用IL-4和IL-13将源自骨髓的巨噬细胞(BMDM)极化。有利地是，可以从来自待治疗的受试者的巨噬细胞样品来制备替代性活化的巨噬细胞，使得AAM相对于具有肝损伤的受试者是自体同源的。合适地，替代性活化的巨噬细胞可以源自多能细胞，如诱导的多能干细胞(iPSC)或胚胎干细胞(ES细胞)。合适地，将替代性活化的巨噬细胞配制用于静脉内给药。合适地，可以以107至109个细胞的剂量提供替代性活化的巨噬细胞。在另一方面，本专利技术提供了预防或治疗受试者中肝损伤的方法，包括向所述受试者给予治疗有效量的替代性活化的巨噬细胞。合适地，肝损伤可以是急性肝损伤，如与使用药物或过量服用药物相关的肝损伤。合适地，肝损伤可能是由使用一种或多种选自由以下所组成的组的药物导致：对乙酰氨基酚、克拉霉素、他汀类、烟酸、胺碘酮、甲氨蝶呤、异烟肼、呋喃妥因、沃格孟汀、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生、吡罗昔康、萘丁美酮、双氯芬酸、他克林或双硫仑。合适地，药物可以是对乙酰氨基酚。合适地，可以在肝脏显现出坏死迹象时给予AAM。合适地，可以在中毒或过量服用药物后10小时或更长时间给予AAM。可以通过用IL-4、IL-13、CSF-1或其组合将巨噬细胞极化来制备替代性活化的(M2样)巨噬细胞。合适地，可以用IL-4和IL-13将源自骨髓的巨噬细胞(BMDM)极化。有利地是，可以从来自待治疗的受试者的巨噬细胞样品来制备替代性活化的巨噬细胞，使得AAM相对于具有肝损伤的受试者是自体同源的。合适地，替代性活化的巨噬细胞可以源自多能细胞，如诱导的多能干细胞(iPSC)或胚胎干细胞(ES细胞)。合适地，可以静脉内给药和/或可以以107至109个细胞的剂量进行给药。附图说明以下通过参考附图进一步描本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种替代性活化的巨噬细胞，其用于在治疗肝损伤中使用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.19 GB 1615923.8;2017.05.05 GB 1707183.81.一种替代性活化的巨噬细胞，其用于在治疗肝损伤中使用。2.根据权利要求1使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述肝损伤是急性肝损伤。3.根据权利要求1或权利要求2使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述肝损伤是由使用一种或多种选自由以下所组成的组的药物导致：对乙酰氨基酚、克拉霉素、他汀类、烟酸、胺碘酮、甲氨蝶呤、异烟肼、呋喃妥因、沃格孟汀、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、萘普生、吡罗昔康、萘丁美酮、双氯芬酸、他克林或双硫仑。4.根据权利要求3使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述药物是对乙酰氨基酚。5.根据权利要求3或权利要求4使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中在使用所述一种或多种药物后10小时给予所述替代性活化的巨噬细胞。6.根据前述权利要求中任一项使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中通过用IL-4、IL-13、CSF-1或其任何组合将巨噬细胞极化而获得所述替代性活化的巨噬细胞。7.根据权利要求6任一项使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述巨噬细胞是源自骨髓的巨噬细胞。8.根据前述权利要求中任一项使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述替代性活化的巨噬细胞相对于患有肝损伤的受试者是自体同源的。9.根据权利要求1至6中任一项使用的所述替代性活化的巨噬细胞，其中所述替代性活化的巨噬细胞源自多能干细胞，如诱导的多能干细胞或胚胎干细胞。10.根据前述权利要求中任一项使用的...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯图尔特·福布斯，菲利普·斯达克·刘易斯，莱斯利·弗雷斯特，
申请(专利权)人：爱丁堡大学管理处，
类型：发明
国别省市：英国,GB