The invention discloses hybridoma cell lines belonging to the field of biotechnology and their applications. The storage number of hybridoma cell line 3H3 1D2 is CGMCC No. 16697, and that of hybridoma cell line 5E10 1C6 is CGMCC No. 16698. The present invention also discloses monoclonal antibodies produced by hybridoma cell line 3H3 1D2 and hybridoma cell line 5E10 1C6. The indirect ELISA titers of the monoclonal antibodies are 1:1025000 and 1:1280000, respectively. The antibody subtypes are IgG2b. The monoclonal antibodies can specifically recognize the recombinant Cry1C protein expressed in prokaryotic cells and the endogenous Cry1C protein in transgenic rice, laying a foundation for the qualitative and quantitative detection of the insect-resistant protein Cry1C in transgenic rice.
【技术实现步骤摘要】
杂交瘤细胞株及其应用
本专利技术涉及生物工程领域，具体涉及到杂交瘤细胞株及其应用。
技术介绍
苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis，Bt)是一种广泛存在的革兰氏阳性菌，该菌分泌的抗虫晶体蛋白是目前主要的生物农药；分泌的抗虫蛋白按照氨基酸序列相似性被分为两类：Cry和Cryδ-内毒素。其中Cry蛋白对多种有害昆虫(如鳞翅目，双翅目，鞘翅目，线虫类和原生生物等)幼虫具有毒性。Cry毒素已经被转入农作物使其具有抗虫性。Cry1C蛋白是Cry毒素中的一种。目前转Cry基因的农作物主要有玉米、土豆、水稻、棉花等。转基因技术的发展与进步推动了生物学的发展。转基因食品虽然能够满足人们对产量、抗虫性等方面的要求，但同时也对人类的生活带来了一些潜在的威胁，如某些基因导入宿主之后会使食品产生毒性，转基因食物产生过敏原，使人产生抗药性，食品的营养价值发生改变等。在进行转基因食品研究开发和商业化的同时，为了对转基因食品的安全性给予综合评估，使消费者能够快速区分转基因食品与天然食品，建立合适的方法对转基因食品中转基因成分进行鉴定与检测，能够促进农业转基因生物安全管理，保障...
【技术保护点】
1.杂交瘤细胞株，其特征在于，生物保藏编号为CGMCC No.16697的杂交瘤细胞株3H3 1D2、生物保藏编号为CGMCC No.16698的杂交瘤细胞株5E10 1C6。
【技术特征摘要】
1.杂交瘤细胞株，其特征在于，生物保藏编号为CGMCCNo.16697的杂交瘤细胞株3H31D2、生物保藏编号为CGMCCNo.16698的杂交瘤细胞株5E101C6。2.权利要求1所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a)通过原核表达得到Cry1C重组蛋白；b)免疫动物：将Cry1C重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠；c)细胞融合：收集免疫BALB/c小鼠的脾细胞并与SP2/0细胞进行融合；d)细胞建株：通过有限稀释法进行亚克隆，亚克隆5-7天进行ELISA检测，直至筛选出稳定分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株进行扩大再培养和保存。3.根据权利要求2所述杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，所述小鼠脾细胞与SP2/0细胞的融合比例为1:(5-10)。4.权利要求1所述杂交瘤细胞株3H31D2所产生的单克隆抗体、杂交瘤细胞株5E101C6所产生的单克隆抗体。5.根据权利要求4所述的杂交瘤细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘卫晓，金芜军，黄卫红，张哲，王迪，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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