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一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用制造技术

技术编号:21081213 阅读:46 留言:0更新日期:2019-05-11 07:00
一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于食品安全免疫检测技术领域。本发明专利技术双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株A号,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号CGMCC No.17301。本发明专利技术将高效价,低IC50小鼠的脾细胞,通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合,采用选择培养基,筛选出二种细胞融合后的杂交细胞;再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并三次亚克隆,最终得到一株单克隆抗体杂交瘤细胞株A号。此细胞株分泌的单克隆抗体,对双氯芬酸具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为2ng/mL),可实现对鸡肉、鸡的肝脏和饲料中双氯芬酸残留量的检测,为食品中双氯芬酸残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。

A monoclonal antibody hybridoma cell line against diclofenac and its application

A diclofenac monoclonal antibody hybridoma cell line and its application belong to the field of food safety immunoassay technology. The diclofenac monoclonal antibody hybridoma cell line A of the invention has been preserved in the General Microbial Center of the China Microbial Species Preservation and Management Committee, and the preservation number is CGMCC No. 17301. The spleen cells of high-titer and low-IC50 mice were fused with mouse myeloma cells by PEG method, and two kinds of hybrid cells were screened by selective medium. Then, the cells were screened by indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay and subcloned three times, finally a monoclonal antibody hybridoma cell line A was obtained. The monoclonal antibody secreted by this cell line has good specificity and sensitivity to diclofenac (IC50 value is 2ng/mL). It can detect diclofenac residues in chicken, chicken liver and feed. It provides raw materials for the immunoassay of diclofenac residues in food and has practical application value.

【技术实现步骤摘要】
一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用
本专利技术涉及一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于食品安全免疫检测

技术介绍
双氯芬酸(Diclofenac,DCF)属于非甾体抗炎药。具有抗炎、镇痛及解热作用。用于风湿性关节炎、粘连性脊椎炎、非炎性关节痛、关节炎、非关节性风湿病、非关节性炎症引起的疼痛,各种神经痛、癌症疼痛、创伤后疼痛及各种炎症所致发热等。其镇痛、消炎及解热作用比吲哚美辛强2~2.5倍,比阿司匹林强26~50倍。主要作用机制是抑制前列腺素合成酶,使前列腺素生物合成受阻。特点为药效强,不良反应少,剂量小,个体差异小。双氯芬酸已被广泛应用于农业、畜禽和饲料等领域。因此双氯芬酸在自来水中一般都有一定的残留,而人体摄入双氯芬酸过多会对人类的肝肾等器官造成代谢负担,若在自来水中,有过多双氯芬酸残留,则有害于人类健康。国家标准GB/T29691-2013将双氯芬酸(DCF)作为允许使用的饲料添加剂,同时也规定了其最高允许使用限量(0.02mg/kg)和最高允许残留量(0.1mg/kg)。但是这些标准都采用高效液相色谱方法检测,检测方法较为繁琐、复杂,为了维护广大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株A号,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2018年5月24日,保藏编号CGMCC No.17301。

【技术特征摘要】
1.一株双氯芬酸单克隆抗体杂交瘤细胞株A号,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2018年5月24日,保藏编号CGMCCN...

【专利技术属性】
技术研发人员:胥传来许晓昕匡华徐丽广马伟刘丽强吴晓玲宋珊珊胡拥明
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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