一种治疗肝细胞癌的药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种治疗肝细胞癌的药物组合物及其应用，其有效成分包括双特异性酪氨酸‑(Y)‑磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸‑(Y)‑磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生，显著抑制了HCC异种移植肿瘤模型中的肿瘤生长和转移。

A pharmaceutical composition for the treatment of hepatocellular carcinoma and its application

The invention discloses a pharmaceutical composition for the treatment of hepatocellular carcinoma and its application. Its effective components include bispecific tyrosine (Y)phosphorylation-regulated kinase 3, which phosphorylates NCOA3, destroys the combination of NOCA3 and ATF4, causes the inhibition of transcriptional activity of ATF4, thereby down-regulating the occurrence of purine metabolism and significantly inhibits the occurrence of purine metabolism. The growth and metastasis of HCC xenotransplantation tumors were studied.

【技术实现步骤摘要】
一种治疗肝细胞癌的药物组合物及其应用
本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种治疗肝细胞癌的药物组合物及其应用。
技术介绍
双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3(Dyrk3)是哺乳动物激酶家族的五个成员之一，其包括Dyrk1A，Dyrk1B，Dyrk2，Dyrk3和Dyrk4(1)。虽然该家族在催化结构域中具有高度保守的氨基酸序列，在活化环中具有Tyr-X-Tyr基序，但它们的N-和C-末端区域完全不同。大量研究证实了Dyrk家族激酶在各种人类疾病中的重要作用，特别是在不同类型的人类肿瘤中。以前的研究报道Dyrk1A和Dyrk1B促进癌细胞增殖和侵袭。相反，Dyrk2被鉴定为肝细胞癌(HCC)和CRC中的肿瘤抑制因子。外显子组测序和阵列分析最近发现Dyrk3参与了胃癌和神经胶质瘤，其在包括肝细胞癌(HCC)在内的肿瘤中的作用和作用机制仍未得到阐明。众所周知，癌细胞的代谢重组通常由OXPHOS到糖酵解的变化来定义。值得注意的是，来自糖酵解和戊糖磷酸途径(PPP)的大量代谢物不仅是核苷酸和氨基酸合成的重要碳源，而且对于从头嘌呤生物合成也是必需的。新出现的证据表明，包括肿瘤在内的几种代谢紊乱中嘌呤代谢紊乱。例如，c-Myc依赖性嘌呤生物合成显著抑制前列腺癌中对抗雄激素的治疗反应。嘌呤合成酶水平的升高也有助于癌症干细胞的发展，并预测胶质母细胞瘤患者的预后不良。然而，嘌呤合成途径在HCC中的作用和调节仍然没有表征。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种治疗肝细胞癌的药物组合物。本专利技术的另一目的在于提供一种ATF4转录活性抑制剂。本专利技术的技术方案之一：一种治疗肝细胞癌的药物组合物，其有效成分包括双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。在本专利技术的一个优选实施方案中，其有效成分为双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3。进一步优选的，所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。本专利技术的技术方案之二：双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在制备治疗肝细胞癌的药物组合物中的应用，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。本专利技术的技术方案之三：一种ATF4转录活性抑制剂，其有效成分包括双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制。在本专利技术的一个优选实施方案中，其有效成分为双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3。进一步优选的，所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。本专利技术的技术方案之四：双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在制备ATF4转录活性抑制剂中的应用，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。本专利技术的有益效果是：本专利技术的有效成分包括双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生，显著抑制了HCC异种移植肿瘤模型中的肿瘤生长和转移。附图说明图1为本专利技术实施例1中的实验结果图之一。图2为本专利技术实施例1中的实验结果图之二。图3为本专利技术实施例1中的实验结果图之三。图4为本专利技术实施例1中的实验结果图之四。图5为本专利技术实施例1中的实验结果图之五。图6为本专利技术实施例1中的实验结果图之六。图7为本专利技术实施例1中的实验结果图之七。图8为本专利技术实施例1中的实验结果图之八。具体实施方式以下通过具体实施方式结合附图对本专利技术的技术方案进行进一步的说明和描述。实施例1一种治疗肝细胞癌的药物组合物，其有效成分包括双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。优选的，所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。本实施例通过下述方法来验证本专利技术的功能，具体如下：1、材料和方法患者和临床样本从吉林大学第一附属医院和牡丹江医科大学附属红旗医院接受肝切除术的HCC患者(n＝224)获得两组HCC组织样本和相应的相邻形态正常组织样本。所有将收集的样品在手术切除后立即置于液氮中并储存在-80℃下进行进一步分析。本研究经吉林大学伦理委员会和牡丹江医科大学附属红旗医院批准，获得了本研究所有参与者使用组织样本的书面知情同意书。根据世界卫生组织(WHO)标准确诊为HCC。基于国际抗癌联盟的第六版肿瘤-淋巴结-转移(TNM)分类，肿瘤分期：T1＝没有血管侵犯的孤立性肿瘤；T2＝单发血管侵犯，多发，5cm；T3＝多个，＞5cm，侵入门静脉或肝静脉的主要分支；T4＝入侵胆囊以外的邻近器官，穿孔内脏腹膜。在手术前，没有患者接受过任何抗癌治疗，包括经皮消融，放射治疗或化疗栓塞。微球体培养提到的相关细胞(5×103细胞/孔)在含有补充有B27，20ng/mlEGF和20ng/mlbFGF的培养基的超低附着24孔板中生长。媒介每隔一天更换一次。培养15天后，对直径＞50μm且＞150μm的球囊进行计数和分析。体内致瘤和转移测定所有动物实验均根据NIH指南进行，以用于实验动物。4至6周龄的非肥胖/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠，获自上海生命科学研究院实验动物中心(SIBS)。所有动物工作均按照国家指导方针进行，所有动物实验均经吉林大学伦理委员会和牡丹江大学批准。对于原位肝细胞癌小鼠模型，将HCCLM3-pLV-Dyrk3和HCCLM3-pLV-NC以及其他指定的细胞(每只小鼠4×106个细胞)皮下注射到NOD/SCID小鼠的侧腹中。4周后，切除皮下肿瘤并切成1mm3立方体，然后植入小鼠肝脏的左肺叶(每组10只)。对于肿瘤转移小鼠模型，将200μLPBS中的2×106个细胞注射到小鼠的尾静脉中(每组10个)。通过生物发光对肿瘤形成和转移进行成像。将D-荧光素(MilliporeSigma，USA)以100mg/kg腹膜内注射到小鼠中，并且每周用XenogenIVISSpectrumImagingSystem(CaliperLifeSciences，USA)检测生物发光。6周后，处死小鼠。分离肺用于检查转移性肿瘤的数量，并测量肝肿瘤的重量。然后制备肝脏和肺用于苏木精和伊红(HE)染色或蛋白质印迹分析。统计分析Student′st检验用于比较两组之本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗肝细胞癌的药物组合物，其特征在于：其有效成分包括双特异性酪氨酸‑(Y)‑磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸‑(Y)‑磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。

【技术特征摘要】
1.一种治疗肝细胞癌的药物组合物，其特征在于：其有效成分包括双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：其有效成分为双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3。3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化NCOA3。4.双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在制备治疗肝细胞癌的药物组合物中的应用，该双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3对NCOA3进行磷酸化，破坏NOCA3与ATF4的结合，引起ATF4的转录活性的抑制，从而下调嘌呤代谢的发生。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3在Ser-1330处直接磷酸化N...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪雪辉，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建,35