一种湖北海棠红茶加工方法与用途技术

本发明专利技术是以湖北巴东富硒海棠园湖北海棠叶为原料，渥堆发酵制用的酵母是安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲，最佳发酵条件是：鲜叶质量150 Kg,发酵时间9小时，发酵温度40℃，用酵母80mL/kg；经发酵后湖北海棠发酵叶中总黄酮含量呈下降趋势，根皮素与根皮苷摩尔比呈上升趋势，以根皮苷为指标计算的总黄酮含量下降显示根皮苷在酵母和湖北海棠叶自身酶系的作用下转化为根皮素、黄色素等，根皮素/根皮苷摩尔比成分大于9，肝损伤的保护作用比市售茶增强；采用此方法发酵的茶叶金黄光亮，改善了苦涩，提升了海棠茶的香气，本方法成本低，制作工艺稳定可控。

Processing method and application of a kind of black tea from Begonia hupehensis

【技术实现步骤摘要】
一种湖北海棠红茶加工方法与用途
本专利技术属于一种湖北海棠红茶加工方法与用途
技术介绍
湖北海棠茶中总黄酮含量测定（1）对照品溶液的制备取根皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成20ug*mL-1的溶液，即得。（2)供试品溶液的制备精密量取海棠茶样品粉末，按照实验设计方法进行提取；将提取液进行抽滤，并将滤渣用甲醇洗涤3次，收集滤液至50mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。（3）检测波长的确定取根皮苷对照品溶液和供试品溶液，以甲醇为空白试剂，照紫外-可见分光光度法，于200～1100nm波长进行扫描，结果发现两者紫外吸收图谱类似，均在283nm处有最大吸收，故选择283nm为测定波长。（4）标准曲线的绘制分别精密吸取根皮苷对照品溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，10.0mL于10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度。采用紫外-可见分光光度法于283nm波长处测定吸光度(A)；以A为纵坐标，根皮苷质量浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程Y=0.0435X+0.0139，（R2=0.9995，n=5）。（5)精密度考察取根皮苷对照品溶液，重复测定5次，记录A，计算RSD为0.15%，表明仪器精密度良好。（6）重复性考察取样品液5份，按实验方法制备供试品溶液，测定A，结果RSD2.11%，表明本方法重复性良好。（7）稳定性考察取样品液5份，按实验方法制备供试品溶液，分别在0,2,4,6,8,12,24h测定A，结果RSD0.52%。表明样品液在24h内稳定性良好。湖北海棠茶中根皮素、根皮苷含量测定（1）色谱条件：色谱柱流动相：乙腈-水（55:45），检测波长为285nm，流速为1.0ml/min，柱温：30℃，进样量：10μL。（2）标准溶液的制备：精密称取0.01g的根皮素标准品，置于10ml容量瓶中，甲醇定容至刻度线，摇匀，即得浓度为1g/L的标准品溶液。（3）供试溶液的制备：称取待测样品1g，加甲醇50%10ml浸泡1.5h，超声波15min，0.45µ滤膜过滤，即得供试溶液。（4）线性关系考察：精密吸取上述标准溶液0.1ml、0.5ml、1ml、1.5ml、2ml，分别置于10ml容量瓶，色谱甲醇稀释并定容至刻度线，配成浓度为10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml的系列标准溶液；吸取10μL，于上述色谱条件下进样分析，每个浓度进样3次，计算平均峰面积；以根皮素浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为Y=0.4592X-1.325（r=0.9995，n=5）。（5）精密度试验：精密吸取100μg/ml的标准溶液10μL，于上述色谱条件下连续进样6次，测定峰面积；结果，根皮素峰面积的RSD=1.24%（n=6），表明仪器精密度良好。（6）重复性试验：按供试溶液的制备项下操作，平行制备6份，于上述色谱条件下测定；结果，根皮素峰面积的RSD=1.65%（n=6），表明该方法的重复性良好。（7）稳定性试验：取同一份配制好的供试溶液，室温放置，于0、1、2、4、8、12、24h进样，于上述色谱条件下测定；结果，根皮素峰面积的RSD=1.16%（n=7），表明供试溶液在24h内稳定。（8）加样回收率试验：精密量取已知浓度的根皮素供试溶液6份，每份0.5ml，分别精密加入标准溶液0.5ml，混匀，于上述色谱条件下测定，计算加样回收率；结果，平均回收率为98.64%，RSD=1.42%（n=6）。（9）含量测定：按标准曲线的测定项下方法对样品溶液进行含量测定。同法测定根皮苷的含量。
技术实现思路
本专利技术技术解决方案为：利用富硒湖北海棠叶为原料，通过可控的渥堆发酵技术，使海棠叶中活性成分达到科学合理的配比，构建适宜的功能谱，得到外观为“铜钱铁锈色”，内在成分稳定，绵甜爽口，隔夜不馊的海棠红茶；具体工艺和标准为：一.菌种的选取：以发酵后海棠茶色泽和香气为指标，考察安琪低糖高活性面包酵母、葡萄酒果酒专用酵母（SY）、安琪甜酒曲、安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲、葡萄酒果酒专用酵母（SY）+安琪甜酒曲对湖北海棠叶发酵的影响。结果表明，安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲的发酵方式可加速茶叶发酵进程，发酵后茶叶金黄光亮，并可提升海棠茶香气；酵母活化时间的确定：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各20克，溶于1%的装有2000mL蔗糖溶液的5000mL三角瓶中，至于30℃，150r/min的摇床中培养；每30min取样一次，以液体培养基为参照，于620nm处测定吸光度，考察培养时间对生长量的影响；结果表明，培养2小时后，生长速率即可达到最佳；故菌种活化液的制备工艺为：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各10克溶于1%的1000mL蔗糖溶液，30℃，摇床上150r*min-1活化2小时。接种量为50mL/kg。二.冰冻处理：将萎凋好的湖北海棠叶放入-20℃冰箱冷却保藏12h，然后置于室温，待茶叶至室温后进行实验；此过程可加速茶叶中多酚氧化酶、过氧化物酶的释放，加速红茶发酵进程。喷洒80mL/kg无菌水作为对照。三.湖北海棠鲜叶酶制备方法：取2.0kg湖北海棠鲜叶，加6L缓冲液（pH=6.5的0.1mol*L-1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液，配置好后保存于4℃。）粉碎2min，静置后用双层纱布过滤，拧干滤渣，得到湖北海棠茶鲜叶粗酶溶液，用于茶叶的酶促黄变。喷洒量为80mL/kg。四.发酵条件正交实验设计：鲜叶萎凋4-8h后，按照正交实验设计进行不同条件的发酵处理；再用80℃烘干待测。实验设计及结果见表1和表2。五.酵母接种量的考察：取萎凋好的湖北海棠叶分为5组，每组150kg；考察0mL/kg、20mL/kg、40mL/kg、60mL/kg、80mL/kg和100mL/kg不同酵母接种量对湖北海棠发酵过程的影响。六.按总黄酮含量考察最佳工艺：渥堆发酵条件：鲜叶质量150Kg,发酵时间6小时，发酵温度40℃，用酵母进行发酵；其中发酵温度及菌种对发酵影响最大；按根皮素/根皮苷摩尔比考察最佳工艺：渥堆发酵条件：鲜叶质量150Kg,发酵时间9小时，发酵温度40℃，用酵母进行发酵；其中发酵温度及菌种对发酵影响最大；综合考虑，渥堆发酵条件为：鲜叶质量150Kg,发酵时间8小时，发酵温度40℃，用酵母80mL/kg进行发酵。附图说明图1是酵母接种量对湖北海棠发酵的影响图。图2是根皮素标准曲线图。本专利技术实施实例：1.菌种的选取：以发酵后海棠茶色泽和香气为指标，考察安琪低糖高活性面包酵母、葡萄酒果酒专用酵母（SY）、安琪甜酒曲、安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲、葡萄酒果酒专用酵母（SY）+安琪甜酒曲对湖北海棠叶发酵的影响。结果表明，安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲的发酵方式可加速茶叶发酵进程，发酵后茶叶金黄光亮，并可提升海棠茶香气；酵母活化时间的确定：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各20克，溶于1%的装有2000mL蔗糖溶液的5000mL三角瓶中，至于30℃，150r/min的摇床中培养；每30min取样一次，以液体培养基为参照，于620nm处测定吸光度，考察培养时间对生长量的影响。结果表明，培养2小时后，生长速率即可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种湖北海棠红茶加工方法与用途其特征在于渥堆发酵：（1）菌种的选取：以发酵后海棠茶色泽和香气为指标，考察安琪低糖高活性面包酵母、葡萄酒果酒专用酵母（SY）、安琪甜酒曲、安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲、葡萄酒果酒专用酵母（SY）+安琪甜酒曲对湖北海棠叶发酵的影响；结果表明，安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲的发酵方式可加速茶叶发酵进程，发酵后茶叶金黄光亮，并可提升海棠茶香气；酵母活化时间的确定：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各20克，溶于1%的装有2000mL蔗糖溶液的5000 mL三角瓶中，至于30℃，150 r/min的摇床中培养；每30min取样一次，以液体培养基为参照，于620nm处测定吸光度，考察培养时间对生长量的影响；结果表明，培养2小时后，生长速率即可达到最佳；故菌种活化液的制备工艺为：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各10克溶于1%的1000mL蔗糖溶液，30℃，摇床上150 r*min‑1活化2小时；接种量为50 mL/kg；（2）冰冻处理：将萎凋好的湖北海棠叶放入‑20℃冰箱冷却保藏12h，然后置于室温，待茶叶至室温后进行实验；此过程可加速茶叶中多酚氧化酶、过氧化物酶的释放，加速红茶发酵进程；喷洒80 mL/kg无菌水作为对照；（3）湖北海棠鲜叶酶制备方法：取2.0kg湖北海棠鲜叶，加6 L 缓冲液（pH=6.5的0.1 mol*L‑1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液，配置好后保存于4℃）粉碎2min，静置后用双层纱布过滤，拧干滤渣，得到湖北海棠茶鲜叶粗酶溶液，用于茶叶的酶促黄变；喷洒量为80 mL/kg；（4） 发酵条件正交实验设计：鲜叶萎凋4‑8h后，按照正交实验设计进行不同条件的发酵处理；再用80℃烘干待测；实验设计及结果见表1和表2；（5）酵母接种量的考察：取萎凋好的湖北海棠叶分为5组，每组150 kg；考察0 mL/kg、20 mL/kg 、40 mL/kg 、60 mL/kg 、80 mL/kg 和100 mL/kg 不同酵母接种量对湖北海棠发酵过程的影响；（6）按总黄酮含量考察最佳工艺：渥堆发酵条件：鲜叶质量150 Kg , 发酵时间6小时，发酵温度40℃，用酵母进行发酵；其中发酵温度及菌种对发酵影响最大；按根皮素/根皮苷摩尔比考察最佳工艺：渥堆发酵条件：鲜叶质量150 Kg , 发酵时间9小时，发酵温度40℃，用酵母进行发酵；其中发酵温度及菌种对发酵影响最大；综合考虑，渥堆发酵条件为：鲜叶质量150 Kg , 发酵时间8小时，发酵温度40℃，用酵母80mL/kg进行发酵。...

【技术特征摘要】
1.一种湖北海棠红茶加工方法与用途其特征在于渥堆发酵：（1）菌种的选取：以发酵后海棠茶色泽和香气为指标，考察安琪低糖高活性面包酵母、葡萄酒果酒专用酵母（SY）、安琪甜酒曲、安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲、葡萄酒果酒专用酵母（SY）+安琪甜酒曲对湖北海棠叶发酵的影响；结果表明，安琪低糖高活性面包酵母+安琪甜酒曲的发酵方式可加速茶叶发酵进程，发酵后茶叶金黄光亮，并可提升海棠茶香气；酵母活化时间的确定：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各20克，溶于1%的装有2000mL蔗糖溶液的5000mL三角瓶中，至于30℃，150r/min的摇床中培养；每30min取样一次，以液体培养基为参照，于620nm处测定吸光度，考察培养时间对生长量的影响；结果表明，培养2小时后，生长速率即可达到最佳；故菌种活化液的制备工艺为：安琪低糖高活性面包酵母、安琪甜酒曲各10克溶于1%的1000mL蔗糖溶液，30℃，摇床上150r*min-1活化2小时；接种量为50mL/kg；（2）冰冻处理：将萎凋好的湖北海棠叶放入-20℃冰箱冷却保藏12h，然后置于室温，待茶叶至室温后进行实验；此过程可加速茶叶中多酚氧化酶、过氧化物酶的释放，加速红茶发酵进程；喷洒80mL/kg无菌水作为对照；（3）湖北海棠鲜叶酶制备方法：取2.0kg湖北海棠鲜叶，加6L缓冲液（pH=6.5的0.1mol*L-1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液，配置好后保存于4℃）粉碎2min，静置后用双层纱布过滤，拧干滤渣，得到湖北海棠茶鲜叶粗酶溶液，用于茶叶的酶促黄变；喷洒量为80mL/kg；（4）发酵条件正交实验设计：鲜叶萎凋4-8h后，按照正交实验设计进行不同条件的发酵处理；再用80℃烘干待测；实验设计及结果见表1和表2；（5）酵母接种量的考...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪鋆植，余祚锟，吴坚，
申请(专利权)人：恩施硒海棠生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42