The invention provides RPA primers, probes, kits and methods for detecting Vibrio parahaemolyticus. The RPA primers for detecting Vibrio parahaemolyticus include the upstream primer Seq ID No.1 and the downstream primer Seq ID No.2 for IRGB gene. Compared with the prior art, the kit and detection method of the present invention can rapidly detect the presence of Vibrio parahaemolyticus nucleic acid in the sample. It is simple to operate and does not need special expensive instruments. It has important application value in disease surveillance, clinical diagnosis and food safety surveillance.
【技术实现步骤摘要】
检测副溶血性弧菌的RPA引物、探针、试剂盒和方法
本专利技术属于生物
，具体涉及检测副溶血性弧菌的RPA引物和探针、试剂盒及RPA等温快速检测方法。
技术介绍
副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus,Vp)是一种革兰氏阴性嗜盐菌，属弧菌科弧菌属，是最重要的食源性致病菌之一，它广泛分布于近海区域、鱼、贝类等海产品以及腌制食品中，是沿海地区引起食物中毒的重要病原菌，可以导致患者出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐和头疼等典型胃肠炎反应，严重者可以引起败血症。国家食源性疾病监测网数据显示，副溶血弧菌引起的食物中毒在发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势，已经高居微生物性食物中毒之首，因此，开发副溶血性弧菌的快速检测方法对该菌的预防和检测非常重要。目前副溶血性弧菌的检测方法主要是传统培养方法和PCR方法。虽然传统培养方法对实验设备的要求不高，但是检测的周期较长，操作繁琐，需要分离获得纯培养物后进行嗜盐实验等系列生化鉴定实验，检测效率低，无法满足当前检测工作中对样品进行快速检测的要求。而随着分子生物学检测技术的发展，PCR检测方法也随之而出现，但PCR方法在...
【技术保护点】
1.一种检测副溶血性弧菌的RPA引物，其特征在于，针对
【技术特征摘要】
1.一种检测副溶血性弧菌的RPA引物，其特征在于，针对irgb基因包括上游引物SeqIDNo.1:5’-CGCCAAACTACATCGGAAAACATGGCCCCATC-3’和下游引物SeqIDNo.2：5’-CTAGAAAAAACTCCCCTTGTTCTGGGTGCGAG-3’。2.如权利要求1所述的检测副溶血性弧菌的RPA引物，其特征在于，所述下游引物SeqIDNo.2在5’端进行biotin修饰。3.一种检测副溶血性弧菌的RPA引物，其特征在于，采用权利要求1或2所述的引物中的上游引物、下游引物中的至少一种，或选自权利要求1或2所述的引物中的上游引物、下游引物序列或上游引物、下游引物序列的互补链序列中单条序列同源性为50%及以上的碱基序列。4.一种检测副溶血性弧菌的RPA探针，其特征在于，针对irgb基因，其包括探针序列SeqIDNo.3：5’CCACCCGAGAGAACTAAACAAACATCCGTGGATAGATTTTGGGTCG-3’所述探针序列SeqIDNo.3的5’端31bp的位置处采用dSpacer修饰，dSpacer分子两侧的胸腺嘧啶分别被荧光基团和淬灭基团取代，所述探针序列SeqIDNo.3的3’末端通过阻塞基团C3Spacer或磷酸化进行修饰。5.如权利要求4所述的检测副溶血性弧菌的RPA探针，其特征在于，所述荧光基因采用FAM-dT荧光标记基团，所述淬灭基团采用BHQ1-dT荧光标记基团。6.一种检测副溶血性弧菌的RPA探针，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘小青，陈晶，黄建飞，陈国培，王珍妮，刘斌，谢光宗，林振润，杨国武，盛司潼，张晓英，
申请(专利权)人：深圳市计量质量检测研究院国家高新技术计量站，国家数字电子产品质量监督检验中心，深圳华因康基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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