一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用，属于食品及化妆品技术领域。本发明专利技术利用椰子粕为原料，获得了通过复合蛋白酶同步酶解制备抗氧化椰子多肽的最佳工艺，为椰子粕的深加工提供了理论依据，并且制备工艺简单，多肽得率较单一蛋白酶更高，并且对DPPH和羟基自由基都具有较强的清除能力；本发明专利技术对所得的椰子多肽进行抗氧化性评价，DPPH清除能力为57.3～84.5％，羟基自由基清除率为53.5～74.2％。通过本发明专利技术的复合酶解工艺，得到椰子多肽的收率高，分子量低，抗氧化性效果明显，且安全无刺激，可作为功能性添加剂广泛应用于食品及化妆品领域，对于提高椰子资源的综合应用价值具有重要意义。

An Antioxidant Coconut Peptide and Its Preparation and Application

The invention discloses an antioxidant coconut polypeptide and a preparation method and application thereof, belonging to the technical field of food and cosmetics. The present invention uses coconut meal as raw material, obtains the optimum technology for preparing antioxidant coconut polypeptide by simultaneous enzymatic hydrolysis of complex protease, provides theoretical basis for further processing of coconut meal, and has simple preparation process, higher polypeptide yield than single protease, and strong scavenging capacity for DPPH and hydroxyl radicals. The scavenging capacity of DPPH was 57.3-84.5% and the scavenging rate of hydroxyl radicals was 53.5-74.2%. Through the compound enzymatic hydrolysis process of the invention, the coconut polypeptide has high yield, low molecular weight, obvious antioxidant effect, safety and no stimulation, and can be widely used in the field of food and cosmetics as a functional additive, which is of great significance for improving the comprehensive application value of coconut resources.

【技术实现步骤摘要】
一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用
本专利技术属于食品及化妆品
，具体涉及一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用。
技术介绍
自由基是人体生命活动中各种化学反应的中间代谢产物，具有高度的化学活性，若不能维持在一定水平则会影响人体的生命活动，但自由基过多则会攻击人机体内的生命大分子以及细胞器，导致脂质过氧化和抗氧化物酶活性的减弱，从而造成细胞损伤，加速人体的衰老过程并诱发各种疾病。因此抗氧化剂对清除人体自由基和预防人类各种疾病具有重要意义。目前市场上使用的主要是以化学合成的2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和叔丁基对苯二酚最为广泛，但毒理实验表明化学合成抗氧化剂毒副作用较大，对人体肝、脾、肺等均有不利影响。所以开发天然无毒的抗氧化剂已成为近年来国内外学者的研究热点。目前已经通过酶解、发酵等技术从猪肉、鸡蛋、牡蛎、大豆、牡丹籽粕、小球藻等多种食源性蛋白中获得了具有抗氧化活性的多肽。其中酶解法成本更低，更易于操作，同时制备的生物活性肽具有良好的溶解性、耐酸和耐热稳定性。椰子是药食同源蔬果，是一种经济价值和营养价值都很高的植物，除了生产椰子油外，还可加工成椰子汁、椰子糖、椰子糕、椰子饼等营养丰富的特色食品。椰子粕是椰子提取油脂后的副产物，其中蛋白质含量高达20％，蛋白中氨基酸种类齐全，具有一定降血脂、降低胆固醇以及抑制高血脂症等生理功能，是一种优质的蛋白质资源。但由于适口性差，长期以来多被当作饲料使用或自然排放，造成了蛋白质资源的巨大浪费。与椰子蛋白相比，椰子多肽由于分子量小，更容易被人体吸收利用，而且具有抗氧化性和降血脂等生理功能，在食品和化妆品等领域中具有广阔的应用前景。申请号为201210041195.5的中国专利公开了一种采用琉基蛋白酶与复合蛋白酶两种蛋白酶分两步水解椰子蛋白制备椰子多肽工艺，申请号为201710946924.4的中国专利公开了一种采用纤维素酶+糖化酶+胰酶与木瓜蛋白酶+复合风味蛋白酶二次酶解椰子蛋白制备椰子多肽的工艺，但都没有涉及利用复合酶同步酶解来制备抗氧化活性肽的技术，因此研究一种抗氧化性椰子多肽的制备工艺对于提高椰子粕的应用价值具有重要意义。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的首要目的在于提供一种抗氧化性椰子多肽的制备方法。本专利技术的另一目的在于提供通过上述制备方法制备得到的抗氧化性椰子多肽。本专利技术的再一目的在于提供上述抗氧化性椰子多肽的应用。本专利技术通过复合蛋白酶同步酶解提供一种制备简单、抗氧化活性强的椰子粕抗氧化活性多肽，并且可以将抗氧化活性多肽应用于食品和化妆品的研制和开发，实现椰子粕资源的综合利用，提高其应用价值。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种抗氧化性椰子多肽的制备方法，包括如下步骤：(1)椰子粕经预处理，得到精椰子粕粉；(2)将精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1：15～25混合后，调节混合液的pH至6～9，按照精椰子粕粉质量的2～3％加入复合蛋白酶在50～60℃条件下进行酶解反应1～4h，得到酶解液；所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少两种；(3)步骤(2)获得的酶解液经灭酶活、离心分离，上清液采用分子截留量为5000Da以下的超滤膜超滤分离，滤液冷冻干燥得到抗氧化性椰子多肽。优选的，步骤(1)中所述的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1：20混合；优选的，步骤(1)中所述的复合蛋白酶的用量为按照精椰子粕粉质量的2％加入复合蛋白酶。优选的，步骤(1)中所述的精椰子粕粉的制备方法，包括如下步骤：将椰子粕按照质量体积比1：20加入至乙醇中，130℃回流3h，分离干燥得到脱脂椰子粕粉；然后按料液比1：25加入脱脂椰子粕粉和蒸馏水，调节PH至9，高速搅拌下50℃处理2h，离心取上清液，然后调节PH至3.5～3.6，离心收集沉淀，水洗至中性后冷冻干燥，得精椰子粕粉。优选的，步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶-中性蛋白酶、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶、中性--蛋白酶-菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜性蛋白酶-中性蛋白酶。更优选的，步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括以质量比计，碱性蛋白酶-中性蛋白酶＝1：0.5～2、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.2～0.8、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、中性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.2～0.8、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.4～1.6、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.5：0.2～0.8、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-中性蛋白酶＝1：0.5：0.5～2。进一步优选的，所述的复合蛋白酶包括以质量比计，碱性蛋白酶-中性蛋白酶＝1：1～2、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.2～0.4、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、中性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.4～0.8、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.8～1.6、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.5：0.8、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-中性蛋白酶＝1：0.5：2。所述的碱性蛋白酶酶活力≥200000U/g，中性蛋白酶酶活力为≥200000U/g，菠萝蛋白酶酶活力≥500000U/g，木瓜蛋白酶酶活力≥400000U/g。优选的，步骤(3)中所述的灭酶活的条件为90～95℃下灭酶5～10min；更优选为90℃下灭酶10min。优选的，步骤(3)中所述的离心的条件为8000～10000rpm下离心分离5～10min；更优选为8000rpm下离心分离10min。优选的，步骤(3)中，采用分子截留量为4000Da的超滤膜超滤分离，多肽收率为精椰子粕粉质量的9.6～25.8％，多肽分子量为2547～3126Da。更优选的，多肽收率为精椰子粕粉质量的17.3～25.8％，多肽分子量为2547～2879Da。优选的，所制备的椰子多肽的DPPH清除能力为57.3～84.5％，羟基自由基清除率为53.5～74.2％。更优选的，所制备的椰子多肽的DPPH清除能力为70.5～84.5％，羟基自由基清除率为60.4～74.2％。一种抗氧化性椰子多肽，通过上述制备方法制备得到。所述的抗氧化性椰子多肽作为食品或化妆品的抗氧化剂的应用。进一步的，所述的抗氧化性椰子多肽在制备食品或化妆品中的应用。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术利用椰子粕为原料，获得了通过复合蛋白酶同步酶解制备抗氧化椰子多肽的最佳工艺，为椰子粕的深加工提供了理论依据，并且制备工艺简单，多肽得率(9.6～25.8％)较单一蛋白酶(5.3～8.7％)更高，并且对DPPH和羟基自由基都具有较强的清除能力，为食品及化妆品的抗氧化剂提供了一种新原料，并且安全无刺激。(2)本专利技术对所得的椰子多肽制成2mg/mL的溶液进行抗氧化性评价，DPPH清除能力为57.3～84.5％，羟基自由基清除率为53.5～74.2％。通过本专利技术的复合酶解工艺，得到椰子多肽的收率高，分子量低，抗氧化性效果明显，可以作为功能性添加剂广泛应用于食品及化妆品领域，对于提高椰子资源的综合应用价值具有重要意义。具体实施方式本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗氧化性椰子多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)椰子粕经预处理，得到精椰子粕粉；(2)将精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1：15～25混合后，调节混合液的pH至6～9，按照精椰子粕粉质量的2～3％加入复合蛋白酶在50～60℃条件下进行酶解反应1～4h，得到酶解液；所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少两种；(3)步骤(2)获得的酶解液经灭酶活、离心分离，上清液采用分子截留量为5000Da以下的超滤膜超滤分离，滤液冷冻干燥得到抗氧化性椰子多肽。

【技术特征摘要】
1.一种抗氧化性椰子多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)椰子粕经预处理，得到精椰子粕粉；(2)将精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1：15～25混合后，调节混合液的pH至6～9，按照精椰子粕粉质量的2～3％加入复合蛋白酶在50～60℃条件下进行酶解反应1～4h，得到酶解液；所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少两种；(3)步骤(2)获得的酶解液经灭酶活、离心分离，上清液采用分子截留量为5000Da以下的超滤膜超滤分离，滤液冷冻干燥得到抗氧化性椰子多肽。2.根据权利要求1所述的抗氧化性椰子多肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1：20混合；步骤(1)中所述的复合蛋白酶的用量为按照精椰子粕粉质量的2％加入复合蛋白酶。3.根据权利要求1或2所述的抗氧化性椰子多肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶-中性蛋白酶、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶、中性--蛋白酶-菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜性蛋白酶-中性蛋白酶。4.根据权利要求3所述的抗氧化性椰子多肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括以质量比计，碱性蛋白酶-中性蛋白酶＝1：0.5～2、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.2～0.8、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶＝1：0.25～1、中性蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.2～0.8、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶＝1：0.4～1.6、碱性蛋白酶-木瓜蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：李秀华，陈国东，余以刚，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44