The invention discloses a preparation method of egg yolk antibody against group A of avian Pasteurella capsular antigen, which comprises the following steps: (1) immunizing hens of reproductive age with inactivated vaccine of group A of avian Pasteurella capsular antigen to obtain high immunity eggs; (2) collecting high immunity egg yolk, removing yolk membrane and crushing egg yolk liquid; (3) mixing the obtained egg yolk liquid with purified water at a volume ratio of 1:2_4; After stirring, the final concentration of ascorbic acid, 4-8% (m/v) propylene glycol and 3-6% (m/v) dextran sulfate were added. After fully stirring, the supernatant was collected by centrifugation at low temperature for 2-4 hours. (4) The supernatant collected was filtered and the yolk antibody solution was obtained. The invention discloses a preparation method of group A yolk antibody of avian Pasteurella capsular antigen, which has simple steps, high efficiency and yield, and is economical and applicable.
【技术实现步骤摘要】
一种禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法
本专利技术涉及一种禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法。
技术介绍
禽多杀性巴氏杆菌病又称为禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida,PM)引起的一种急性、接触性败血传染病,分布在世界各地,对养禽业的发展有着严重的影响,根据菌株间抗原成分的差异,多杀性巴氏杆菌分为多个血清型,近年来,A菌株为国内主要流行血清型。预防控制该病的最有效途径是疫苗免疫,目前国内外常用的禽巴氏杆菌病疫苗是灭活疫苗,但常规灭活疫苗免疫具有保护率较低约80%左右,免疫谱窄(只对同型菌株具有较好的保护)、保护期短,费用高昂等缺点。卵黄抗体(IgY)是母禽被外来抗原刺激后,母禽血液中免疫球蛋白转移至其卵黄中对子代产生保护性作用的免疫球蛋白,是在卵黄内所产生的特异性抗体,其浓度远高于血清,并具有高度稳定性和生物学活性,这使应用卵黄抗体防病治病成为可能。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种纯度、收率高,活性强、易于制备与应用且经济的禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法。为解决上述技术问题,本专利技术公开一种禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法,其包括以下步骤:(1)利用禽巴氏杆菌荚膜抗原A群灭活疫苗免疫育龄母鸡,获得高免鸡蛋;(2)收集高免鸡蛋蛋黄,去除卵黄膜和破碎得蛋黄液;(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与纯化水以1:2-4的体积比混合,搅拌均匀后加入终浓度为1~3%(m/v)的L-抗坏血酸、4~8%(m/v)的丙二醇及3~6%(m/v)的硫酸葡聚糖,充分搅拌后,低温放置2~4h,低温离心,收集上 ...
【技术保护点】
1.一种禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)利用禽巴氏杆菌荚膜抗原A群灭活疫苗免疫育龄母鸡,获得高免鸡蛋;(2)收集高免鸡蛋蛋黄,去除卵黄膜和破碎得蛋黄液;(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与纯化水以1:2‑4的体积比混合,搅拌均匀后加入终浓度为1~3%(m/v)的L‑抗坏血酸、4~8%(m/v)的丙二醇及3~6%(m/v)的硫酸葡聚糖,充分搅拌后,低温放置2~4h,低温离心,收集上清液;(4)将步骤(3)收集的上清液过滤除菌后即得卵黄抗体液。
【技术特征摘要】
1.一种禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)利用禽巴氏杆菌荚膜抗原A群灭活疫苗免疫育龄母鸡,获得高免鸡蛋;(2)收集高免鸡蛋蛋黄,去除卵黄膜和破碎得蛋黄液;(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与纯化水以1:2-4的体积比混合,搅拌均匀后加入终浓度为1~3%(m/v)的L-抗坏血酸、4~8%(m/v)的丙二醇及3~6%(m/v)的硫酸葡聚糖,充分搅拌后,低温放置2~4h,低温离心,收集上清液;(4)将步骤(3)收集的上清液过滤除菌后即得卵黄抗体液。2.如权利要求1所述的禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法,特征在于,所述步骤(3)中蛋黄液与纯化水以1:3的体积比混合。3.如权利要求1所述的所述的禽巴氏杆菌荚膜抗原A群卵黄抗体的制备方法,特征在于:所述步骤(3)中搅拌均匀后加入终浓度为2%(...
【专利技术属性】
技术研发人员:张毓金,严悌昆,谢秉超,杨球,
申请(专利权)人:广东渔跃生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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