一种H5亚型禽流感病毒的快速检测方法技术

技术编号:20885799 阅读:38 留言:0更新日期:2019-04-17 13:37
本发明专利技术提供一种H5亚型禽流感病毒的快速检测方法,通过比对了近年来分离到的H5亚型禽流感病毒HA基因核苷酸序列,在其保守区设计了引物和探针,建立了针对H5亚型禽流感病毒实时荧光定量RT‑PCR核酸快速检测方法。本发明专利技术所提供的H5亚型禽流感病毒实时荧光RT‑PCR方法具有灵敏度高、检测时间短,不需要电泳等开放环节,只需一台荧光PCR仪即可在密闭反应管中完成,且在检测过程中可实时查看反应曲线,对结果作出快速判断。而作为禽流感诊断金标准的病毒分离方法,则需要更多的设备、更长的时间、更高的硬件要求。

【技术实现步骤摘要】
一种H5亚型禽流感病毒的快速检测方法
本专利技术属于病毒检测
,具体涉及一种H5亚型禽流感病毒的快速检测方法。
技术介绍
1996年,我国首次从广东的鹅体内分离到H5N1亚型高致病性禽流感病毒。从2003年末开始,H5N1亚型禽流感在东南亚多个国家的家禽中暴发,包括越南、泰国、韩国、日本、柬埔寨和印度尼西亚。2004年至2015年,我国的多个省份暴发了疫情,超过2千万只禽类被扑杀,给养禽业造成了巨大的经济损失。2005年底开始,我国针对H5亚型禽流感病毒实行大规模强制免疫政策,疫情开始得到了有效控制。实践证明,在禽流感防控方面,疫苗免疫发挥了巨大的作用。但是,不可否认,它也带来了一系列的问题,如免疫加快了病毒变异,使得疫苗必须加快更新换代。随着病毒的进化,H5亚型禽流感病毒一直在发生较快的变异;从最初的N28、Re-1到Re-4、Re-5,再到Re-6、Re-8,到最新的Re-11、Re-12。病毒变异是由于其血凝素基因(HA)中核苷酸的变异引起的。目前,全球H5亚型禽流感病毒共存在10个分支。我国存在或流行的分支包括第0分支、第2.3.4.4分支、第2.3.2.1分支和第7分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于H5亚型禽流感病毒检测的引物组和探针,其特征在于,所述的引物组合探针的序列信息如下:其中上游引物的序列为SEQ ID NO.1,下游引物的序列为SEQ ID NO.2;探针的序列为SEQ ID NO.3。

【技术特征摘要】
1.一种用于H5亚型禽流感病毒检测的引物组和探针,其特征在于,所述的引物组合探针的序列信息如下:其中上游引物的序列为SEQIDNO.1,下游引物的序列为SEQIDNO.2;探针的序列为SEQIDNO.3。2.如权利要求1所述的引物组和探针,其特征在于,所述探针的5'端标记FAM,3'端标记BHQ1。3.权利要求1或2所述的引物组和探针在制备使用实时荧光定量RT-PCR方法检测H5亚型禽流感病毒的试剂盒中的应用。4.一种检测H5亚型禽流感病毒的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包含有荧光定量RT-PCR扩增反应的试剂,和权利要求1或2所述的引物组和探针。5.一种非疾病诊断治疗目的的检测H5亚型禽流感病毒的方法,其特征在于,所述的方法包括如下的步骤:1)配置反应体系:在聚合酶...

【专利技术属性】
技术研发人员:蒋文明刘华雷
申请(专利权)人:中国动物卫生与流行病学中心
类型:发明
国别省市:山东,37

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