一种化合物及其水合物、盐或衍生物的用途制造技术

发明专利技术涉及制药领域，特别是一种化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物在作为诱导剂诱导干细胞分化为神经样细胞中的用途。本发明专利技术所述诱导剂诱导bMSCs在体外分化为神经样细胞后，会有较好的脑靶向性，能更多地分布在脑病灶部位，发挥更加有效的治疗作用。

【技术实现步骤摘要】
一种化合物及其水合物、盐或衍生物的用途
本专利技术涉及制药领域，特别是一种化合物及其水合物或盐的用途。
技术介绍
缺血性脑卒中现在仍是危害人类性命的重大疾病之一,其发病率、致残率及死亡率都极高,由于该疾病的复杂性及神经修复的困难性,至今仍缺乏有效的治疗与预后手段。现有如抗炎、抗氧化等多种治疗方案被报道,但在临床治疗效果评价中,均未取得显著性突破。令人欣喜的是,干细胞用于心脑血管疾病治疗成为新的研究热点,也为脑缺血的治疗提供了新的方向。其中,骨髓间充质干细胞(BoneMarrowMesenchymalStemCells,bMSCs)是一种来源于骨髓基质系统中的非造血组织干细胞,具有较强的增殖能力且有多向分化潜能,在特定的理化环境或一些细胞因子的诱导下可以向神经系细胞(如神经元细胞、星形胶质细胞等)分化,且bMSCs易获取、易在体外培养,具有较强的增殖能力,因此常被用于干细胞分化与治疗研究。目前最常用于诱导bMSCs分化为神经样细胞的物质是β-巯基乙醇和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),其中,bFGF来源少且价格昂贵,而β-巯基乙醇易引起细胞死亡且诱导成功后维持时间较短,因此需进一步研发新型药物分子用于干细胞治疗。
技术实现思路
现如今并没有如式(I)结构式的化合物在作为诱导剂诱导干细胞分化为神经样细胞的相关报道，其中具有式(I)化合物的结构式如下：更进一步的，是关于诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的相关报道。通过研究发现，所述化合物在药学上可接受的水合物、盐或衍生物，在诱导干细胞分化为神经样细胞上同该结构式的化合物具有同等功效。本专利技术所述诱导剂的作用即诱导细胞的分化。在本专利技术具体的实验过程中发现，采用式(I)化合物作为诱导剂具有明显的上调NSE、GFAP和Nestin神经细胞蛋白表达量的作用。其中，所述诱导干细胞分化为神经样细胞的方法，包括以下内容：取纯化的干细胞，然后置于含有诱导剂的培养液中培养12h以上，即得所述神经样细胞。所述干细胞为骨髓间充质干细胞。申请经过实验发现，诱导剂的浓度超过10μM以后，细胞的存活率明显下降，而在2-10μM范围内时，细胞的存活率高于90％，因此，选定诱导剂的浓度为2-10μM。此处的诱导剂指的是上述式(I)化合物。采用式(I)化合物主要是上调NSE、GFAP和Nestin神经细胞蛋白表达量，其中蛋白GFAP和Nestin的表达量在诱导后24h达到峰值，蛋白NSE的表达量在诱导后12h达到最高值，因此，诱导培养时间为12-24h。本专利技术另一专利技术目的是提供一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物作为诱导剂诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞在制备预防或/和治疗缺血或缺血性损伤类疾病药物中的用途。申请人利用广泛使用的小鼠大脑MCAO缺血模型进行评价。其结果证实，经诱导后得到的神经样细胞对由小鼠大脑中动脉缺血再灌注引起的神经症状、脑梗塞范围扩大有效。其中，所述药物为预防或/和治疗脑缺血或脑缺血性损伤类疾病的药物。更进一步的，所述脑缺血类疾病或脑缺血性损伤类疾病为缺血脑卒中或脑缺血再灌注损伤。申请人利用广泛使用的小鼠大脑MCAO缺血模型进行评价，发现经诱导后得到的神经样细胞对由小鼠大脑中神经功能损伤有效。本专利技术还提供了一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物作为诱导剂诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞在制备预防或/和治疗神经保护或修复类药物中的用途。本专利技术还提供了一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物作为诱导剂诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的方法，包括以下内容：取纯化的干细胞，然后置于含有诱导剂的培养液中培养12h以上，即得所述神经样细胞。其中，诱导剂的浓度为2-10μM。诱导培养时间为12-24h。本专利技术有益效果：一、本专利技术所述化合物及其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物能诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞，诱导得到的神经样细胞不仅对神经保护具有显著的作用，同时对缺血脑卒中、脑缺血在灌注损伤类病症也具有明显的治疗的效果。二、bMSCs在体外分化为神经样细胞后，会有较好的脑靶向性，能更多地分布在脑病灶部位，发挥更加有效的治疗作用。附图说明图1是木香烃内酯对bMSCs细胞毒性测定图；图2是光学显微镜下观察bMSCs形态学变化图，图中各区域分别为A.空白组，B.诱导4h，C.诱导12h，D.诱导24h；图3是bMSCs细胞骨架染色免疫荧光检测图，图中各区域分别为A.空白组，B.诱导4h，C.诱导12h，D.诱导24h；图4是诱导后bMSCs细胞NSE，GFAP及Nestin免疫荧光染色图，图中各区域分别为A.空白组，B.诱导4h，C.诱导12h，D.诱导24h；图5是术后动物脑组织TTC染色图；图6是大鼠脑组织HE染色图，图中各区域分别为A.假手术组，B.模型组，C.MSC组，D.诱导组。具体实施方式下面通过具体的实施例子对本专利技术做进一步的详细描述。1材料与方法1.1材料1.1.1试剂及仪器胎牛血清(Gibco批号：1908121)；DMEM低糖培养基(Hyclone，批号：J180003)；胰蛋白酶(Hyclone，批号：J180003)；四甲基偶氮唑盐(MTT)(锐赛生物公司，批号：180315)；2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)(源叶生物科技有限公司，批号：BCBR5460V)；4％多聚甲醛(Biosharp，批号：180119)；96孔板(Thermo，批号：167008)；苏木素染液套装(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：G1005)；NESTIN一抗(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB12137)；GFAP一抗(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB11096)；NSE一抗(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB11376-1)；二抗CY3山羊抗小鼠(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB21301)；二抗488山羊抗兔(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB25303)；二抗CY3山羊抗兔(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：GB21303)1.1.2实验动物SPF级成年雄性SD大鼠40只，平均体重在280-300g，用于制备脑缺血再灌注动物模型；SPF级2-4周龄雄性SD大鼠2只，平均体重在120-140g，用于制备骨髓间充质干细胞。1.2试验方法1.2.1bMSCs的分离、培养选取2-4周龄健康雄性SD大鼠脱颈处死，将全身浸入75％乙醇中消毒约10min。在无菌条件下取出双侧胫骨和股骨，剪去两端骨骺，用5mL注射器抽取5mL含15％胎牛血清的DMEM完全培养基先自一端冲出骨髓，再从另一端冲洗，制成单细胞悬液，置于10mL培养皿中，放置于37℃、体积分数为5％CO2及饱和湿度培养箱中，24h后全量换液，以后每2d换液1次，去除非贴壁细胞，并按1：2比例传代。每日观察细胞的生长情况，待原代细胞融合达到80％-90％时，按1：2比例进行传代，并将培养基更换为含10％胎牛血清的DMEM完全培养基。经多次传代扩增培养，使骨髓间充质干细胞逐渐得到纯化。1.2.2木香烃内酯对bMSCs毒性检测通过MTT检测木香烃内酯对bMSCs的毒性。取第三代bMSCs，按照每孔1.0×104个细胞接种于96孔板中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物在作为诱导剂诱导干细胞分化为神经样细胞中的用途，其中具有式(I)的化合物结构式如下

【技术特征摘要】
1.一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物在作为诱导剂诱导干细胞分化为神经样细胞中的用途，其中具有式(I)的化合物结构式如下2.根据权利要求1所述用途，其特征在于：所述干细胞为骨髓间充质干细胞。3.根据权利要求1所述用途，其特征在于：所述诱导剂为上调NSE、GFAP和Nestin神经细胞蛋白表达量的诱导剂。4.根据权利要求1所述用途，其特征在于：所述诱导干细胞分化为神经样细胞的方法，包括以下内容：取纯化的干细胞，然后置于含有诱导剂的培养液中培养12h以上，即得所述神经样细胞。5.根据权利要求4所述用途，其特征在于：所述诱导剂的浓度为2-10μM。6.根据权利要求4所述用途，其特征在于：所述培养时间为12-24h。7.一种如式(I)的化合物或其在药学上可接受的水合物、盐或衍生物作为诱导剂诱导骨髓间充...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭锐，谭立伟，江羽，
申请(专利权)人：西南交通大学，
类型：发明
国别省市：四川,51