一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法技术

本发明专利技术公开了一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法。包括先经过亲和层析，将收集到的洗脱峰的pH调节为5.0‑5.50；电导调节至4.90‑5.10ms/cm；再经过阴离子交换层析柱，待出现穿透峰且A280吸收值达到20mAU时，开始收集流穿液，收集到的流穿液即为去除电荷异构体后的抗人神经生长因子。采用本发明专利技术的方法获得的抗人神经生长因子抗体的电荷异构体收率高，活性好。

【技术实现步骤摘要】
一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法
本专利技术涉及抗体的分离领域，尤其涉及一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法。
技术介绍
抗人神经生长因子抗体可以阻断神经生长因子介导的疼痛传递通路，从而在神经性疼痛、骨折疼痛、骨关节炎、类风湿关节炎、痛风关节痛等疼痛性疾病方面具有广泛的治疗作用。在生产、提取和储存过程中，抗体会经过一系列转译后修饰过程，包括糖基化、聚合、破碎、脱酰氨基化等作用，会使抗体表现出多种类型的不均一性，进而产生不同类型的变体，它们在分子量、疏水性、电荷等理化性质上存在差异。电荷异构体通常依据其相对于主峰的等电点，分为酸性或碱性异构体。一般地，酸性异构体具有相对主峰较低的等电点，而碱性异构体则具有相对主峰较高的等电点。目前制备型分离抗体电荷异构体的方法通常是使用阳离子交换层析技术，该方法使用吸附洗脱模式，去除酸性峰和碱性峰，从而得到主峰。分析型分离抗体电荷异构体的方法有离子交换色谱、反相液相色谱、疏水色谱、体积排阻色谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管等电聚焦、毛细管区带电泳、质谱等，其中毛细管等电聚焦用于抗体电荷异构体的分析具有的高效、快速、分离度高、经本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法，其特征在于，包括如下步骤，亲和层析：将含有抗人神经生长因子抗体的细胞发酵液经亲和层析柱层析，A280收集得到洗脱峰；将收集到的洗脱峰的pH调节为5.0‑5.50；电导调节至4.90‑5.10ms/cm；阴离子交换层析：再经过阴离子交换层析柱，待出现穿透峰且A280吸收值达到20mAU时，开始收集流穿液，收集到的流穿液即为去除电荷异构体后的抗人神经生长因子。

【技术特征摘要】
1.一种抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法，其特征在于，包括如下步骤，亲和层析：将含有抗人神经生长因子抗体的细胞发酵液经亲和层析柱层析，A280收集得到洗脱峰；将收集到的洗脱峰的pH调节为5.0-5.50；电导调节至4.90-5.10ms/cm；阴离子交换层析：再经过阴离子交换层析柱，待出现穿透峰且A280吸收值达到20mAU时，开始收集流穿液，收集到的流穿液即为去除电荷异构体后的抗人神经生长因子。2.如权利要求1所述抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法，其特征在于，所述含有抗人神经生长因子抗体的细胞发酵液为重组抗人神经生长因子抗体CHO细胞的发酵液。3.如权利要求1所述抗人神经生长因子抗体的电荷异构体分离方法，其特征在于，所述pH调节采用醋酸钠缓冲液来调节；优选的，p...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文宇，邹有土，阮卡，王明灶，马燕玲，黄奋飞，陈振雄，
申请(专利权)人：未名生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35