一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，包括以下步骤：(1)将均质猪肉样品加入离心管中，加入甲醇与水的混合溶剂涡旋混合，离心，得固体沉淀；(2)将步骤(1)的固体沉淀中加入内标液，混匀后加入酸性试剂和衍生剂进行衍生化处理；(3)对步骤(2)衍生化后的溶液调节pH值至中性，加入正己烷摇匀、离心，将清液加入盐包管中，依次用乙腈、甲酸水溶液离心，得提取液；(4)提取液过滤，将滤液上机测试。本发明专利技术的测定方法不需要将样品过固相萃取柱，也不需要使用乙酸乙酯萃取吹干等步骤，前处理简单方便，缩短了前处理时间，提高检测效率，而且该方法得到的检测数据稳定、可靠。

A Method for the Determination of Nitrofurans in Pork

The invention discloses a method for determining nitrofurans in pork, which comprises the following steps: (1) adding homogeneous pork sample into centrifugal tube, adding methanol and water mixed solvent to mix in a whirlpool, centrifuging, and obtaining solid precipitation; (2) adding internal standard solution to the solid precipitation of step (1) mixing, adding acid reagent and derivative agent to derivatize after mixing; (3) derivatizing step (2) adding acid reagent and derivative agent to derivatize** After treatment, the solution was adjusted to neutral pH value, shaken with n-hexane, centrifuged, and the clear liquid was added to the salt-laden tube, then centrifuged with acetonitrile and formic acid aqueous solution to obtain the extract; (4) the extract was filtered and the filtrate was tested on the machine. The determination method of the invention does not need to pass the solid phase extraction column of the sample or use the extraction and drying steps of ethyl acetate. The pretreatment is simple and convenient, the pretreatment time is shortened, the detection efficiency is improved, and the detection data obtained by the method is stable and reliable.

【技术实现步骤摘要】
一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法
本专利技术涉及食品中有机化合物的检测方法，更具体地说，涉及一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法。
技术介绍
猪肉又名豚肉，是主要家畜之一、猪科动物家猪的肉。其性味甘咸平，含有丰富的蛋白质及脂肪、碳水化合物、钙、铁、磷等营养成分。猪肉是日常生活的主要副食品，具有补虚强身，滋阴润燥、丰肌泽肤的作用。凡病后体弱、产后血虚、面黄赢瘦者，皆可用之作营养滋补之品。因此，为了保证猪肉安全以及满足检测的要求，建立能够准确、高效测定猪肉中硝基呋喃类药物的检测方法十分重要。现有技术中，大多按照国标GB/T21331-2007对猪肉进行处理并检测其硝基呋喃类药物的含量，在处理时需要将样品过固相萃取柱、使用乙酸乙酯萃取吹干等步骤，前处理时间长、检测效率低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，以解决现有的国标GB/T21331-2007对食品进行处理并检测其硝基呋喃类药物的含量时前处理时间长、检测效率低的技术问题，大大缩短了前处理的时间，且检测结果稳定、可靠。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，包括以下步骤：(1)将均质猪肉样品加入离心管中，加入甲醇与水的混合溶剂涡旋混合，离心，得固体沉淀；(2)将步骤(1)的固体沉淀中加入内标液，混匀后加入酸性试剂和衍生剂进行衍生化处理；(3)对步骤(2)衍生化后的溶液调节pH值至中性，加入正己烷摇匀、离心，将清液加入盐包管中，依次用乙腈、甲酸水溶液离心，得提取液；(4)对步骤(3)得到的提取液过滤，将滤液上机测试。进一步地，步骤(1)中所述甲醇与水的体积比为1:1。进一步地，所述步骤(2)中酸性试剂为盐酸溶液，衍生剂为邻硝基苯甲醛。进一步地，所述步骤(3)中调节pH值的方法为：预先加入盐酸溶液，然后加入衍生化后的溶液，再加入磷酸盐缓冲液，再逐次加入氢氧化钠溶液，测定每次加入氢氧化钠溶液后的pH值，调节到pH为7.4为止。进一步地，所述步骤(3)中，盐包管内的物质为氯化钠。进一步地，所述均质猪肉样品与所述氯化钠的质量比为2:4～6。进一步地，所述均质猪肉样品与所述氯化钠的质量比为2:5。进一步地，所述步骤(1)中离心的转速为4500～5000r/min。进一步地，所述步骤(3)中，调节pH值后加入正己烷，摇均，在4500～5000r/min的转速下离心8～10min，取下清液至盐包管中，再加入乙腈，在4500～5000r/min的转速下离心8～10min，取上清液加入甲酸水溶液，在14000～15000r/min的转速下离心3～5min。更进一步地，所述步骤(3)中，调节pH值后加入正己烷，摇均，在,4750r/min的转速下离心10min，取下清液至盐包管中，再加入乙腈，在4750r/min的转速下离心10min，取上清液加入甲酸水溶液，在15000r/min的转速下离心3min。与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：本专利技术的方法不需要将样品过固相萃取柱，也不需要使用乙酸乙酯萃取吹干等步骤，前处理简单方便，大大缩短了前处理时间，提高检测效率，而且该方法得到的检测数据稳定、可靠。具体实施方式实施例1称取2.00g均质猪肉样品于50mL离心管中，加入10mL甲醇和水的混合溶剂(甲醇与水的体积比为1:1)，漩涡10min，在4750r/min的转速下离心5min，弃去上清液得固体沉淀，在固体沉淀中加入内标液100μL，再加入10mL盐酸溶液、100μL邻硝基苯甲醛衍生剂，再涡旋10min，置于37℃水浴震荡16h。取出溶液，放至室温，预先在空白离心管加入10mL盐酸溶液，再加入溶液、2mL磷酸盐缓冲液，逐次加入氢氧化钠溶液，测定每次加入氢氧化钠溶液后的pH值，调节到pH为7.4，轻微摇均，加入15mL正己烷，摇均，在4750r/min的转速下离心10min。取下清液6.50mL，至装有5g氯化钠的盐包管中，再加入2.50mL乙腈，上下振摇，在4750r/min的转速下离心10min，取上清液0.70mL至2mL离心管，再加入0.70mL甲酸水溶液，摇均，15000r/min离心3min，取上清液过滤，将滤液上机测试。实施例2称取2.00g均质猪肉样品于50mL离心管中，加入10mL甲醇和水的混合溶剂(甲醇与水的体积比为1:1)，漩涡10min，在4750r/min的转速下离心5min，弃去上清液得固体沉淀，在固体沉淀中加入内标液100μL，再加入10mL盐酸溶液、100μL邻硝基苯甲醛衍生剂，再涡旋10min，置于37℃水浴震荡16h。取出溶液，放至室温，预先在空白离心管加入10mL盐酸溶液，再加入溶液、2mL磷酸盐缓冲液，逐次加入氢氧化钠溶液，测定每次加入氢氧化钠溶液后的pH值，调节到pH为7.4，轻微摇均，加入15mL正己烷，摇均，在5000r/min的转速下离心8min。取下清液6.50mL，至装有4g氯化钠的盐包管中，再加入2.50mL乙腈，上下振摇，在5000r/min的转速下离心8min，取上清液0.70mL至2mL离心管，再加入0.70mL甲酸水溶液，摇均，15000r/min离心3min，取上清液过滤，将滤液上机测试。实施例3称取2.00g均质猪肉样品于50mL离心管中，加入10mL甲醇和水的混合溶剂(甲醇与水的体积比为1:1)，漩涡10min，在4750r/min的转速下离心5min，弃去上清液得固体沉淀，在固体沉淀中加入内标液100μL，再加入10mL盐酸溶液、100μL邻硝基苯甲醛衍生剂，再涡旋10min，置于37℃水浴震荡16h。取出溶液，放至室温，预先在空白离心管加入10mL盐酸溶液，再加入溶液、2mL磷酸盐缓冲液，逐次加入氢氧化钠溶液，测定每次加入氢氧化钠溶液后的pH值，调节到pH为7.4，轻微摇均，加入15mL正己烷，摇均，在4500r/min的转速下离心10min。取下清液6.50mL，至装有6g氯化钠的盐包管中，再加入2.50mL乙腈，上下振摇，在4750r/min的转速下离心10min，取上清液0.70mL至2mL离心管，再加入0.70mL甲酸水溶液，摇均，14000r/min离心5min，取上清液过滤，将滤液上机测试。实施例1～3所用的检测仪器为安捷伦1290-6490三重四极杆液相质谱联用仪，其具体检测条件如表1所示。表1实施例1～3中内标液的配置方法为：取AOZ-D4、AMOZ-D5、AHD-13C、SCA-HCl-13C,15N2各2.00mg，用乙腈分别溶解至2.0mL(放置-18℃冰箱内有限期为3个月)，得到浓度为1mg/mL的内标储备液。取上述内标储备液各0.10mL，至10mL量瓶，用乙腈稀释至刻度，浓度均为10μg/mL。再取稀释液0.50mL至10mL量瓶，用乙腈稀释至刻度(现用现配)。浓度均为：500ng/mL。内标液中AOZ-D4、AMOZ-D5、AHD-13C、SCA-HCl-13C,15N2的体积为1:1:1:1。取6个猪肉样品使用本专利技术的检测方法进行检测，各样品中呋喃类药物的回收率以及精密度如表2所示。表2表2中的实验相关数据说明，样品的重现性好，精密度在标准要求的10％以下，该方法得到的检测数据稳定、可靠。以上实施例为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将均质猪肉样品加入离心管中，加入甲醇与水的混合溶剂涡旋混合，离心，得固体沉淀；(2)将步骤(1)的固体沉淀中加入内标液，混匀后加入酸性试剂和衍生剂进行衍生化处理；(3)对步骤(2)衍生化后的溶液调节pH值至中性，加入正己烷摇匀、离心，将清液加入盐包管中，依次用乙腈、甲酸水溶液离心，得提取液；(4)对步骤(3)得到的提取液过滤，将滤液上机测试。

【技术特征摘要】
1.一种猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将均质猪肉样品加入离心管中，加入甲醇与水的混合溶剂涡旋混合，离心，得固体沉淀；(2)将步骤(1)的固体沉淀中加入内标液，混匀后加入酸性试剂和衍生剂进行衍生化处理；(3)对步骤(2)衍生化后的溶液调节pH值至中性，加入正己烷摇匀、离心，将清液加入盐包管中，依次用乙腈、甲酸水溶液离心，得提取液；(4)对步骤(3)得到的提取液过滤，将滤液上机测试。2.根据权利要求1所述的猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于：步骤(1)中所述甲醇与水的体积比为1:1。3.根据权利要求1或2所述的猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中酸性试剂为0.2mol/L的盐酸溶液，衍生剂为15μg/mL的邻硝基苯甲醛。4.根据权利要求3所述的猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中调节pH值的方法为：预先加入盐酸溶液，然后加入衍生化后的溶液，再加入磷酸盐缓冲液，再逐次加入氢氧化钠溶液，测定每次加入氢氧化钠溶液后的pH值，调节到pH为7.4为止。5.根据权利要求1所述的猪肉中硝基呋喃类药物的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中，盐包管内...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁峰，钟水桥，谢衍，蒋德莉，刘慧妍，
申请(专利权)人：梧州市食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西,45