一种抗菌止痒温敏复合水凝胶及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种抗菌止痒温敏复合水凝胶及其制备方法，该复合水凝胶由质量比为100:1～1:1的聚酯‑聚乙二醇‑聚酯三嵌段共聚物与贻贝粘蛋白接枝反应得到。其制备方法包括如下步骤：将聚酯‑聚乙二醇‑聚酯三嵌段共聚物与酸酐在有机溶剂中回流1～72小时后，用低沸点有机溶剂沉淀；所得沉淀产物溶于水，加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌，然后加入贻贝粘蛋白，继续搅拌至完全溶解；用缓冲液透析，然后将透析液浓缩至3～60％的质量浓度，升温至28～40℃，即得具有抗菌止痒功能的温敏复合水凝胶。本发明专利技术的复合水凝胶在保持聚酯‑聚乙二醇共聚物水凝胶的温敏特性的同时，具有贻贝粘蛋白的抗菌止痒功能，且贻贝蛋白能更久地保持生物活性。

A thermosensitive composite hydrogel with antimicrobial and antipruritic properties and its preparation method

The present invention provides an antibiotic itch temperature sensitive composite hydrogel and its preparation method. The composite hydrogel is prepared by grafting reaction of polyester, polyethylene glycol and polyester triblock copolymer with mussel mucin in the mass ratio of 100:1 to 1:1. The preparation method includes the following steps: reflux polyester-polyethylene glycol-polyester triblock copolymer with anhydride in organic solvent for 1-72 hours, precipitate with low boiling point organic solvent; the precipitated product is dissolved in water, add 1(3_dimethylaminopropyl)3_ethylcarbodiimide and N_hydroxy succinimide, stir at room temperature, then add mussel mucin, and continue stirring. After dialysis with buffer solution, the dialysate was concentrated to 3-60% mass concentration and heated to 28-40 C. Thermosensitive composite hydrogel with anti-bacterial and anti-pruritus function was obtained. The composite hydrogel of the invention not only maintains the temperature sensitive property of the polyester polyethylene glycol copolymer hydrogel, but also has the anti-bacterial and anti-itching function of mussel mucin, and the mussel protein can maintain the biological activity for a longer time.

【技术实现步骤摘要】
一种抗菌止痒温敏复合水凝胶及其制备方法
本专利技术涉及一种抗菌止痒温敏复合水凝胶及其制备方法，属于生物材料领域。
技术介绍
温敏性水凝胶是一类随着温度变化能够进行溶液-凝胶转变的软材料。目前有文献报道的有聚异丙基丙烯酰胺和聚酯-聚乙二醇共聚物两类温敏性水凝胶。聚酯-聚乙二醇共聚物水凝胶由于其良好的生物相容性和降解性，在生物医学领域得到了广泛的应用，已有大量研究报道聚酯-聚乙二醇共聚物温敏性水凝胶在药物缓控释、组织修复、皮肤敷料等方面应用的报道。作为皮肤敷料的温敏性凝胶在体表温度下能够发生相变，由溶液转变为凝胶，对体表伤口起到封闭和保护作用，然而由于水环境的限制，伤口容易感染。通常通过在水凝胶中添加抗菌药物起到抗菌的作用。壳聚糖等带有正电荷的高分子材料可以以其自身的正电荷破坏病菌的细胞壁，杀死细菌，起到抗菌的作用，因此壳聚糖类敷料被认为具有自身抗菌功能。然而壳聚糖由于分子内和分子间强烈的氢键作用，使壳聚糖产品发硬，导致其成型加工困难，并且只能溶于酸性溶液，难以在如肠道等微碱性环境下使用。同时，壳聚糖本身也不具备温敏性功能。贻贝粘蛋白是在海洋生物贻贝中存在的一类含有大量3,4-二羟基苯丙氨酸(DOPA)和赖氨酸的蛋白质，水溶性好，DOPA的结构使其具有良好的粘附性，大量赖氨酸带来的正电荷具有很好的抗菌功能。贻贝粘蛋白还具有良好的抗过敏和止痒功能，这些功能已被大量临床研究结果所证实。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有的聚酯-聚乙二醇共聚物温敏性水凝胶不具备抗菌性、需添加抗菌药物才能实现抗菌的问题，本专利技术提供一种抗菌止痒温敏复合水凝胶，并提高一种该复合水凝胶的制备方法。技术方案：本专利技术所述的一种抗菌止痒温敏复合水凝胶，该复合水凝胶由质量比为100:1～1:1的聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物与贻贝粘蛋白接枝反应得到。其中，聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物的分子量小于5000，聚乙二醇的分子量小于等于2000。优选的，聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物中，聚酯为聚L-丙交酯、聚DL-丙交酯、聚乙交酯、聚(ε-已内酯)的均聚物或他们的共聚物中的至少一种。本专利技术所述的一种抗菌止痒温敏复合水凝胶的制备方法，包括如下步骤：(1)将聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物与酸酐在有机溶剂中回流1～72小时后，用低沸点有机溶剂沉淀；(2)将步骤(1)所得沉淀产物溶于水，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌，然后加入贻贝粘蛋白，继续搅拌至完全溶解；(3)将步骤(2)所得溶液用缓冲液于4℃透析1～3天，然后将透析液浓缩至3～60％的质量浓度，升温至28～40℃，即得具有抗菌止痒功能的温敏复合水凝胶。上述步骤(1)中，酸酐可为乙二酸酐、丙二酸酐、琥珀酸酐、马来酸酐、甲基马来酸酐、二甲基马来酸酐中的至少一种。较优的，回流时使用的有机溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、1、4-二氧六环中的至少一种；沉淀时采用的低沸点有机溶剂为乙醚、己烷、环己烷、石油醚中的至少一种。作为优选的，步骤(2)中，按照下述摩尔比加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺：聚酯-聚乙二醇-聚酯共聚物、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为2:1:1～1:4:4。更优的，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺后，室温搅拌的时间为12～72小时，加入贻贝粘蛋白后，继续搅拌1～24小时。上述步骤(3)中，缓冲液可采用磷酸缓冲液、醋酸缓冲液中的至少一种。有益效果：与现有技术相比，本专利技术的优点在于：(1)本专利技术首次将贻贝粘蛋白与聚酯-聚乙二醇共聚物温敏性水凝胶结合，在保持聚酯-聚乙二醇共聚物水凝胶的温敏特性的同时，复合水凝胶还具有贻贝粘蛋白的抗菌止痒功能；(2)与现有技术中单纯采用壳聚糖类作为抗菌水凝胶或将壳聚糖与其他水凝胶简单复配制备抗菌水凝胶相比，本专利技术的制备方法通过化学接枝，利用酸酐将聚酯-聚乙二醇共聚物端基的羟基转化为羧基，通过催化剂与贻贝粘蛋白上的氨基键合，所得复合水凝胶具有更优的抗菌性能，而且，贻贝粘蛋白在聚酯-聚乙二醇温敏性水凝胶中能够更长时间地保持其生物活性。附图说明图1为实施例1制得的贻贝粘蛋白/PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿农杆菌和白色念珠菌的抑菌性能评价；图2为实施例1制得的贻贝粘蛋白在PBS与PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶中蛋白活性保持百分比；图3为实施例2中不同浓度下贻贝粘蛋白/PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶照片，从左到右对应浓度别为30％和40％；图4为实施例2中贻贝粘蛋白/PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶在不同温度下的照片，从左到右对应温度分别为33℃、34℃、35℃；图5为对比例1制得的PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿农杆菌和白色念珠菌的抑菌性能评价；图6为对比例2制得的温敏性水凝胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿农杆菌和白色念珠菌的抑菌性能评价；图7为对比例3制得的温敏性水凝胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿农杆菌和白色念珠菌的抑菌性能评价。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步说明。实施例1将聚(L-丙交酯-乙交酯)(600)-聚乙二醇(2000)-聚(L-丙交酯-乙交酯)(600)三嵌段共聚物与马来酸酐在甲苯中回流54小时后，用己烷沉淀，将沉淀产物溶于水，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，摩尔比为1:1:1，室温搅50小时后，加入贻贝粘蛋白，共聚物与贻贝粘蛋白的质量比为10:1，继续搅拌10小时，用醋酸缓冲液于4℃透析3天后，将透析液浓缩至15％质量浓度，升温至37℃，即可得到具有抗菌止痒功能的温敏复合水凝胶。对制得的贻贝粘蛋白/PLGA-PEG-PLGA温敏性水凝胶进行抗菌性和保持贻贝蛋白生物活性测试，测试结果如图1～2，可以看到，本专利技术制备的温敏性水凝胶具有优异的抗菌性能，而且，贻贝粘蛋白在水凝胶中能够长时间地保持其生物活性。实施例2不同温度、不同质量浓度对水凝胶的影响参照实施例1的制备方法，将用醋酸缓冲液于4℃透析3天后的产物冷冻干燥。取冷冻干燥后的干凝胶重新溶于醋酸缓冲液中，配制成30％和40％质量浓度的溶液，升温至37℃，所得温敏复合水凝胶的外观形态如图3，可以看到，随着贻贝粘蛋白/PLGA-PEG-PLGA水凝胶的质量浓度增大，水凝胶由透明变成乳白色。另取冷冻干燥后的干凝胶重新溶于醋酸缓冲液中，配制成15％质量浓度的溶液，分别升温至33℃、34℃和35℃，所得温敏复合水凝胶的外观形态如图4，可以看到，三个温度下都可以形成水凝胶，随温度的升高，水凝胶越来越不透明，说明其相变程度越深。实施例3将聚L-丙交酯(1200)-聚乙二醇(2000)-聚L-丙交酯(1200)三嵌段共聚物与琥珀酸酐在氯仿回流72小时后，用乙醚沉淀，将沉淀产物溶于水，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，摩尔比为1:2:1，室温搅72小时后，加入贻贝粘蛋白，共聚物与贻贝粘蛋白的质量比为100:1，继续搅拌24小时，用磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗菌止痒温敏复合水凝胶，其特征在于，该复合水凝胶由质量比为100:1～1:1的聚酯‑聚乙二醇‑聚酯三嵌段共聚物与贻贝粘蛋白接枝反应得到。

【技术特征摘要】
1.一种抗菌止痒温敏复合水凝胶，其特征在于，该复合水凝胶由质量比为100:1～1:1的聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物与贻贝粘蛋白接枝反应得到。2.根据权利要求1所述的抗菌止痒温敏复合水凝胶，其特征在于，所述聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物的分子量小于5000，其中，聚乙二醇的分子量小于等于2000。3.根据权利要求1所述的抗菌止痒温敏复合水凝胶，其特征在于，所述聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物中，聚酯为聚L-丙交酯、聚DL-丙交酯、聚乙交酯、聚(ε-已内酯)的均聚物或他们的共聚物中的至少一种。4.一种权利要求1所述的抗菌止痒温敏复合水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将聚酯-聚乙二醇-聚酯三嵌段共聚物与酸酐在有机溶剂中回流1～72小时后，用低沸点有机溶剂沉淀；(2)将步骤(1)所得沉淀产物溶于水，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌，然后加入贻贝粘蛋白，继续搅拌至完全溶解；(3)将步骤(2)所得溶液用缓冲液透析，然后将透析液浓缩至3～60％的质量浓度，升温至28～40℃，即得具有抗菌止痒功能的温敏复合水凝胶。5.根据权利要求4所述的抗菌止痒温敏复合水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵楠，谢家银，何斌，蒲雨吉，郭兆元，高陈承，
申请(专利权)人：普丽妍南京医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32