本发明专利技术属分析化学领域，本发明专利技术公开了一种用液相色谱法分离分析重酒石酸卡巴拉汀中间体3‑（1‑二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的缓冲盐‑有机相为流动相，可以定量测定3‑（1‑二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的含量，从而有效控制合成重酒石酸卡巴拉汀过程中反应物的纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，提高产物收率。本发明专利技术方法专属性强，准确度高，操作简便。
【技术实现步骤摘要】
重酒石酸卡巴拉汀中间体及其有关物质的分离检测方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种用HPLC分离测定重酒石酸卡巴拉汀中间体及其有关物质的分析方法。
技术介绍
重酒石酸卡巴拉汀是一种氨基甲酸类脑选择性乙酰胆碱酯酶抑制剂，通过延缓胆碱神经元对释放乙酰胆碱的降解，而促进胆碱能神经传到。重酒石酸卡巴拉汀可以改善阿尔茨海默病患者胆碱能介导的认知功能障碍，还可减慢淀粉样蛋白β-淡粉样前体蛋白片段的形成，而淀粉样斑块是阿尔茨海默病的主药病理特征之一。重酒石酸卡巴拉汀中间体的化学名为（3-（1-二甲氨基乙基）苯酚，分子式。其化学结构式为：。在合成重酒石酸卡巴拉汀的过程中，需要控制一些关键中间体的纯度，以减少副反应的发生和杂质的生成，从而提高产物收率和纯度。合成该化合物涉及的有关物质有2个，分别为间羟基苯乙酮（有关物质Ａ）和3-（1-甲氨基乙基）苯酚（有关物质B），结构式分别为：有关物质Ａ有关物质Ｂ。对重酒石酸卡巴拉汀中间体的化学纯度进行控制，在终产品重酒石酸卡巴拉汀的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分离测定重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的高效液相色谱分析方法，从而保证重酒石酸卡巴拉汀中间体的化学纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，以实现其终产品重酒石酸卡巴拉汀的质量控制。本方法所述的用高效液相色谱法分离检测3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲盐溶液-有机相为流动相进行等度洗脱。上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，色谱柱选自Alltima、Apollo或Agela等品牌，优选Apollo品牌。上述所说的有机相选自以下化合物中的一种或几种：甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃等，优选乙腈或甲醇溶液。上述所说的方法中，缓冲盐溶液选自磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高氯酸盐，优选磷酸盐。缓冲盐溶液的浓度为0.01～0.1mol/L。上述所说的方法中，缓冲盐溶液中包含浓度为5mmol/L~10mmol/L的离子对试剂，选自十二烷基硫酸钠、辛烷磺酸钠、庚烷磺酸钠，优选十二烷基硫酸钠。本专利技术所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：（1）取3-（1-二甲氨基乙基）苯酚适量，用流动相溶解稀释，配制成每1mL含3-（1-二甲氨基乙基）苯酚0.1～1.0mg的样品溶液；（2）设置流动相流速为1.0ml/min，检测波长为210~240nm，柱温：20~30℃；（3）取（1）中的样品溶液10μl注入液相色谱仪，完成3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的分离与测定。其中：高效液相色谱仪型号无特别要求，本专利技术采用岛津高效液相色谱仪：LC-20AT泵；SPD-M20A检测器；SIL-20AC自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；CBM-20A控制器；色谱柱：C18(Apollo，250mm×4.6mm，5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸二氢钠，加5mmol/L十二烷基硫酸钠）-乙腈（60:40）；流速：1.0ml/min；检测波长：218nm；柱温：室温；进样体积：10μl。本专利技术采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，磷酸盐缓冲液（含离子对试剂）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，能够有效分离3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质，准确测定重酒石酸卡巴拉汀中间体的化学纯度；本专利技术解决了重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚溶液及其有关物质的分离测定问题，确保了3-（1-二甲氨基乙基）苯酚的化学纯度，从而保证了重酒石酸卡巴拉汀的质量可控（结果见附图）。附图说明：图1为实施例1时的重酒石酸卡巴拉汀中间体及其有关物质HPLC图；图2为实施例2时的重酒石酸卡巴拉汀中间体及其有关物质HPLC图；图3为实施例3时的溶剂HPLC图；图4为实施例3时的重酒石酸卡巴拉汀中间体及其有关物质的HPLC图；图5为实施例3时的重酒石酸卡巴拉汀中间体的HPLC图。具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本专利技术，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本专利技术涉及的分离3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1仪器与条件：岛津高效液相色谱仪：LC-20AT泵；SPD-M20A检测器；SIL-20AC自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；CBM-20A控制器；色谱柱：C18(Apollo，250mm×4.6mm，5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸二氢钠，加0.005mol/L十二烷基硫酸钠）-乙腈（60:40）；流速：1.0ml/min；检测波长：218nm；柱温：室温；进样体积：10μl。实验步骤：取重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质适量，用流动相溶解稀释，配制成每1mL含3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质0.1～1.0mg的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图1，图1中保留时间12.014min的色谱峰为重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚色谱峰，保留时间5.277min的色谱峰为间羟基苯乙酮，保留时间11.176min的色谱峰为3-（1-甲氨基乙基）苯酚。由图1可知，在该条件下，重酒石酸卡巴拉汀中间体与其有关物质可实现完全分离。实施例2仪器与条件：岛津高效液相色谱仪：LC-20AT泵；SPD-M20A检测器；SIL-20AC自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；CBM-20A控制器；色谱柱：C18(Apollo，250mm×4.6mm，5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸二氢钠，加0.005mol/L十二烷基硫酸钠）-乙腈（55：45）；流速：1.0ml/min；检测波长：218m；柱温：室温；进样体积：10μl。实验步骤：取重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质适量，用流动相溶解稀释，配制成每1mL含3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质0.1～1.0mg的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图2，图2中保留时间7.478min的色谱峰为重酒石酸卡巴拉汀中间体3-（1-二甲氨基乙基）苯酚色谱峰，保留时间4.656min的色谱峰为间羟基苯乙酮，保留时间6.885min的色谱峰为3-（1-甲氨基乙基）苯酚。由图2可知，在该条件下，重酒石酸卡巴拉汀中间体与其有关物质实现完全分离。实施例3仪器与条件：岛津高效液相色谱仪：LC-20AT泵；SPD-M20A检测器；SIL-20AC自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；CBM-20A控制器；色谱柱：C18(Alltima，250mm×4.6mm，5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸二氢钠，加0.005mol/L十二烷基硫酸钠）-乙腈（65:35）；流速：0.8ml/min；检测波长：218m；柱温：室温；进样体积：10μl。实验步骤：取重酒本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.液相色谱法分离检测重酒石酸卡巴拉汀3‑（1‑二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的方法，其特征在于：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲盐‑有机相为流动相进行等度洗脱。
【技术特征摘要】
1.液相色谱法分离检测重酒石酸卡巴拉汀3-（1-二甲氨基乙基）苯酚及其有关物质的方法，其特征在于：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲盐-有机相为流动相进行等度洗脱。2.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的色谱柱选自Alltima、Apollo或Agela等品牌。3.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的流动相中的有机相选自以下化合物中的一种或几种：甲醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃等，优选乙腈或甲醇溶液。4.根据权利要求1所述的分离测定方法，所说的流动相中的缓冲盐溶液选自磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高氯酸盐，优选磷酸盐。5.根据权利要求4所述的分离测定方法，所说的缓冲盐溶液的浓度为0.01～0.1mol/L。6.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的流动相比例为：缓...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙冬雪，王宇杰，
申请(专利权)人：万特制药海南有限公司，
类型：发明
国别省市：海南,46
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